ABSTRACT
Biofilm produced by Enterococcus faecalis isolated from root canals was detected by growing it on microplates and using 10% crystal violet stain, elution with alcohol and three procedures: no fixation, heat fixation and 10% formaldehyde fixation. The biofilm was evaluated using a Versamax Microplate Reader (USA). Twenty sterile root portions were incubated in TS broth with E. faecalis (108) for 48 hours, 4, 7, 14 and 30 days, after which they were processed and observed by scanning electron microscopy (SEM). Significantly more biofilm was found on the microplates for formaldehyde fixation than for heat fixation or no fixation (ANOVA p<0.0001). SEM showed E. faecalis growth at all times and biofilm development as from 14 days' incubation. Fixation with 10% formaldehyde was the most appropriate technique for detecting E. faecalis biofilm development on microplates. SEM confirmed biofilm formation after 14 days incubation.
Se realizó la detección de biofilm de Enterococcus faecalis aislados de conductos radiculares, desarrollándolos en microcubetas realizando tinción con Cristal Violeta 10 %, elución con alcohol y tres procedimientos: sin fijar, fijación con calor y fijación con formaldehido 10%. Se evaluó el biofilm formado realizando la lectura con lector de microplaca Versamax-Microplate-Reader (USA). Se incubaron 20 porciones radiculares estériles en el medio TS caldo con E. faecalis (108) durante 48 hs, 4, 7, 14 y 30 días. Transcurrido cada tiempo experimental se procesaron y observaron al microscopio electrónico de barrido (MEB). Se evidenció significativamente mayor formación de biofilm en microplacas cuando se realizó fijación con formaldehido, que al fijar con calor y sin fijar (ANOVA p<0,0001). Al MEB se observó crecimiento del E. faecalis en todos los tiempos y desarrollo de biofilm a partir de 14 días de incubación. La fijación con formaldehido 10% fue la técnica más apropiada para detectar biofilm de E. faecalis desarrollado en microplacas. Mediante el MEB se confirmó la formación de biofilm después de 14 días de incubación.
Subject(s)
Biofilms , Dental Pulp Cavity , Enterococcus faecalis , Microscopy, Confocal , Microscopy, Electron, ScanningABSTRACT
Se realizó la detección de biofilm de Enterococcus faecalis aislados de conductos radiculares, desarro llándolos en microcubetas realizando tinción con Cristal Violeta 10 por ciento, elución con alcohol y tres procedimientos: sin fijar, fijación con calor y fija ción con formaldehido 10 por ciento. Se evaluó el biofilm formado realizando la lectura con lector de microplaca Versamax-Microplate-Reader (USA). Se incubaron 20 porciones radiculares estériles en el medio TS caldo con E. faecalis (108) durante 48 hs, 4, 7, 14 y 30 días.Transcurrido cada tiempo experimental se procesaron y observaron al microscopio electrónico de barrido (MEB). Se evidenció significativamente mayor formación de biofilm en microplacas cuando se realizó fijación con formaldehido, que al fijar con calor y sin fijar (ANOVA p<0,0001). Al MEB seobservó crecimiento del E. faecalis en todos los tiempos y desarrollo de biofilm a partir de 14 días de incubación. La fijación con formaldehido 10% fue la técnica más apropiada para detectar biofilm de E. faecalis desarrollado enmicroplacas. Mediante el MEB se confirmó la formación de biofilm después de 14 días de incubación...
