ABSTRACT
Natural regulatory T cells (nTreg) can suppress different immune-cell responses and maintain the balance between tolerance and immunity in the individual. These cells are defined by CD4+ , CD25hi, and FOXP3+ expression, although a variety of other nTreg-associated markers have been reported to be expressed at different levels (e.g., HLA-DR, CTLA-4, GARP, Helios, CD39, etc.), presumably reflecting different functional stages of the heterogeneous nTreg population. Several markers show low/negative expression (i.e., CD127, CD49d, and CD26), but none of these markers are specific to nTreg. CD25hi expression has been a useful surface marker to identify/isolate nTreg; however, CD25 is also expressed on "adaptive" or "induced" Treg, as well as in activated conventional T cells. In addition, the fact that FOXP3 is also found in CD25 low/negative CD4+ T cells, and in a subset of CD8+ T cells, further complicates the definition of a specific nTreg marker. Although CD4+, CD25hi, and CD127low/negative markers characterize the majority of nTreg, it is still imperative to find additional surface-marker combinations that improve the identification/isolation of nTreg and their subsets. Herein, we present evidence that CD4+ CD25hi CD6(lo/-) nTreg have high expression of FOXP3and exhibit in vitro suppressive activity on CD8+ T-cell proliferation. Dot-plot analyses of CD4+ cells, with CD6, CD127, CD49d, or CD26 reveal that a higher enrichment yield of CD25hi FOXP3+ cells can be achieved in the combined CD6(lo/-) CD127(lo/-) population. We conclude that FOXP3+ nTreg cells are characterized by CD6(lo/-) expression, providing a new tool for the identification of nTreg cells without recourse to intracellular staining, and for the purification of these cells by negative selection.
Subject(s)
Antigens, CD/biosynthesis , Antigens, Differentiation, T-Lymphocyte/biosynthesis , Flow Cytometry/methods , Forkhead Transcription Factors/biosynthesis , T-Lymphocytes, Regulatory/metabolism , Gene Expression Regulation , Humans , Leukocytes, Mononuclear/metabolismABSTRACT
Los anticuerpos monoclonales anti-célula T fueron probados por inmunoflorescencia sobre células mononucleares periféricas obtenidas de 99 pacientes con linfomas no Hodgkin (LNH), 84 con enfermedad de Hodgkin (EH) y 16 adultos sanos. El objetivo de este estudio es describir la expresión de antígenos de diferenciación leucocitarios humanos CD3, CD4 y CD8 en los linfocitos circulantes de pacientes sin tratamiento previo. Las comparaciones de patrones de reactividad entre los pacientes y los adultos sanos permitió observar que las medias de los valores porcentuales de células CD3+ fueron estadísticamente diferentes (p<0,001), a expensas de una alta frecuencia de individuos con conteos bajos CD3+ en ambas entidades, así como frecuentes alteraciones de las subpoblaciones CD4+ y CD8+, aunque con diferencias estadísticamente no significativas en cada grupo de pacientes en relación con el control sano. El fenotipo CD3+, CD4+ CD8+ no logró discriminar las muestras de pacientes con EH de los LNH, como era lo esperado, dada la heterogeneidad de ambos procesos (AU)
Subject(s)
Humans , Antigens, CD/genetics , B-Lymphocytes/immunology , T-Lymphocytes/immunology , Lymphoma, Non-Hodgkin/diagnosis , Lymphoma, Non-Hodgkin/immunology , Hodgkin Disease/diagnosis , Hodgkin Disease/immunology , Biomarkers, TumorABSTRACT
Los anticuerpos monoclonales anti-celula T fueron probados por inmunoflorescencia sobre celulas mononucleares perifericas obtenidas de 99 pacientes con linfomas no Hodgkin (LNH), 84 con enfermedad de Hodgkin (EH) y 16 adultos sanos. El objetivo de este estudio es describir la expresion de antigenos de diferenciacion leucocitarios humanos CD3, CD4 y CD8 en los linfocitos circulantes de pacientes sin tratamiento previo. Las comparaciones de patrones de reactividad entre los pacientes y los adultos sanos permitio observar que las medias de los valores porcentuales de celulas CD3+ fueron estadisticamente diferentes (p<0,001), a expensas de una alta frecuencia de individuos con conteos bajos CD3+ en ambas entidades, asi como frecuentes alteraciones de las subpoblaciones CD4+ y CD8+, aunque con diferencias estadisticamente no significativas en cada grupo de pacientes en relacion con el control sano. El fenotipo CD3+, CD4+ CD8+ no logro discriminar las muestras de pacientes con EH de los LNH, como era lo esperado, dada la heterogeneidad de ambos procesos
Subject(s)
Humans , Antigens, CD/genetics , B-Lymphocytes/immunology , Hodgkin Disease/diagnosis , Hodgkin Disease/immunology , Lymphoma, Non-Hodgkin/diagnosis , Lymphoma, Non-Hodgkin/immunology , Biomarkers, Tumor , T-Lymphocytes/immunologyABSTRACT
Se estimularon poblaciones de linfocitos T enriquecidos con interleukina-2 recombinante para obtener células asesinas activadas por lifoquinas (LAK). Se ensayó su capacidad citotóxica, frente a diferentes lineas tumorales. Se estudió la expresión de marcadores fenotípicos con un panel de anticuerpos monoclonales (AcM) empleando inmunofluorescencia indirecta y análisis citofluorométrico. Los resultados indican ligeras variaciones en la expresión de antígenos de células T y un incremento en la expresión de antígenos NK inmaduros y asociados con la proliferación
Subject(s)
T-Lymphocytes , Antibodies, Monoclonal , Aniline Mustard , Killer Cells, Natural/immunologyABSTRACT
Se estimularon poblaciones de linfocitos T enriquecidos con interleukina-2 recombinante para obtener células asesinas activadas por lifoquinas (LAK). Se ensayó su capacidad citotóxica, frente a diferentes lineas tumorales. Se estudió la expresión de marcadores fenotípicos con un panel de anticuerpos monoclonales (AcM) empleando inmunofluorescencia indirecta y análisis citofluorométrico. Los resultados indican ligeras variaciones en la expresión de antígenos de células T y un incremento en la expresión de antígenos NK inmaduros y asociados con la proliferación
Subject(s)
Aniline Mustard , Antibodies, Monoclonal , Killer Cells, Natural/immunology , T-LymphocytesABSTRACT
Se informa que la transferrina es una proteína que tiene importantes funciones en diversos mecanismos del organismo, por lo que su determinación puede adquirir importancia diagnóstica y pronóstica en diferentes enfermedades. Se describen los métodos para la purificación de transferrina sérica, la obtención de su antisuero específico y la estandarización del método inmunoquímico de cuantificación. Se expresa los valores de transferrina sérica en diferentes grupos etarios de individuos sanos de nuestra población, así como niños con enfermedades gastrointestinales. Se discute el valor clínico de esta determinación
Subject(s)
Humans , Transferrin/isolation & purification , Immune SeraABSTRACT
Se informa que la transferrina es una proteína que tiene importantes funciones en diversos mecanismos del organismo, por lo que su determinación puede adquirir importancia diagnóstica y pronóstica en diferentes enfermedades. Se describen los métodos para la purificación de transferrina sérica, la obtención de su antisuero específico y la estandarización del método inmunoquímico de cuantificación. Se expresa los valores de transferrina sérica en diferentes grupos etarios de individuos sanos de nuestra población, así como niños con enfermedades gastrointestinales. Se discute el valor clínico de esta determinación
