Low resolution structural characterization of the Hsp70-interacting protein - Hip - from Leishmania braziliensis emphasizes its high asymmetry.

The Hsp70 is an essential molecular chaperone in protein metabolism since it acts as a pivot with other molecular chaperone families. Several co-chaperones act as regulators of the Hsp70 action cycle, as for instance Hip (Hsp70-interacting protein). Hip is a tetratricopeptide repeat protein (TPR) that interacts with the ATPase domain in the Hsp70-ADP state, stabilizing it and preventing substrate dissociation. Molecular chaperones from protozoans, which can cause some neglected diseases, are poorly studied in terms of structure and function. Here, we investigated the structural features of Hip from the protozoa Leishmania braziliensis (LbHip), one of the causative agents of the leishmaniasis disease. LbHip was heterologously expressed and purified in the folded state, as attested by circular dichroism and intrinsic fluorescence emission techniques. LbHip forms an elongated dimer, as observed by analytical gel filtration chromatography, analytical ultracentrifugation and small angle X-ray scattering (SAXS). With the SAXS data a low resolution model was reconstructed, which shed light on the structure of this protein, emphasizing its elongated shape and suggesting its domain organization. We also investigated the chemical-induced unfolding behavior of LbHip and two transitions were observed. The first transition was related to the unfolding of the TPR domain of each protomer and the second transition of the dimer dissociation. Altogether, LbHip presents a similar structure to mammalian Hip, despite their low level of conservation, suggesting that this class of eukaryotic protein may use a similar mechanism of action.

Ácido fumárico e sua combinação com ácido lático ou propionato de cálcio em dietas de leitões recém-desmamados / Fumaric acid associated with lactic acid or calcium propionate for weaning piglet diets

Avaliou-se o efeito da adição dos ácidos fumárico, lático e propionato de cálcio ou suas combinações sobre o desempenho, pH estomacal, pH duodenal, morfologia e morfometria do intestino delgado de leitões desmamados aos 15 dias de idade. Foram utilizados 180 leitões, 90 machos castrados e 90 fêmeas, com média de peso inicial de 4,78±1,19kg, distribuídos em delineamento de blocos ao acaso. Utilizaram-se cinco tratamentos: T1 - ração controle (RC); T2 - RC + 0,5 por cento de ácido fumárico; T3 - RC + 0,5 por cento de ácido fumárico + 1,0 por cento de propionato de cálcio; T4 - RC + 0,5 por cento de ácido fumárico + 1,0 por cento de ácido lático; T5 - RC + 0,5 por cento de ácido fumárico + 0,5 por cento de propionato de cálcio + 0,5 por cento de ácido lático, com seis repetições e seis animais por unidade experimental. Não houve influência (P>0,05) dos tratamentos sobre o ganho de peso diário (GPD), consumo de dieta diário (CRD) e conversão alimentar (CA). Quanto ao epitélio intestinal, não houve diferenças (P>0,05) entre tratamentos em relação à altura do epitélio do duodeno, jejuno e íleo. Não houve efeito dos tratamentos (P>0,05) sobre o pH do estômago e do jejuno. A inclusão do ácido fumárico não influenciou o desempenho dos leitões.(AU)

This assay was carried out to evaluate the effect of fumaric acid; latic acid and calcium propionate on the performance and morphological and morphometric characteristics of small intestine in weaning piglets. A total of 180 weaning piglets were used (90 males and 90 females) with 15 days of age and an initial weight of 4.78 1.1 kg, distributed in a completely randomized block designed with five treatments: T1 - Control ration (CR); T2 - CR + 0.5 percentfumaric acid; T3 - CR + 0.5 percent fumaric acid + 1.0 percent calcium propionate; T4 - CR + 0.5 percent fumaric acid +1.0 percent lactic acid; T5 - CR + 0.5 percent fumaric acid + 0.5 percent calcium propionate + 0.5 percent lactic acid , six replicates of six animals. The performance, morphological and morphometric characteristics of small intestine were evaluated. Daily weight gain, daily feed intake, weight gain: feed intake ratio was not affected by treatments. Significant differences between treatments were not observed for intestinal epithelium height of duodenum, jejunum and ileum (P>0.05). No significant differences between treatments were observed (P<0.05) for the pH of stomach and jejunum. No effect of fumaric acid on piglets performance was observed.(AU)

Ácido fumárico e sua combinação com ácido lático ou propionato de cálcio em dietas de leitões recém-desmamados / Fumaric acid associated with lactic acid or calcium propionate for weaning piglet diets

Avaliou-se o efeito da adição dos ácidos fumárico, lático e propionato de cálcio ou suas combinações sobre o desempenho, pH estomacal, pH duodenal, morfologia e morfometria do intestino delgado de leitões desmamados aos 15 dias de idade. Foram utilizados 180 leitões, 90 machos castrados e 90 fêmeas, com média de peso inicial de 4,78±1,19kg, distribuídos em delineamento de blocos ao acaso. Utilizaram-se cinco tratamentos: T1 - ração controle (RC); T2 - RC + 0,5 por cento de ácido fumárico; T3 - RC + 0,5 por cento de ácido fumárico + 1,0 por cento de propionato de cálcio; T4 - RC + 0,5 por cento de ácido fumárico + 1,0 por cento de ácido lático; T5 - RC + 0,5 por cento de ácido fumárico + 0,5 por cento de propionato de cálcio + 0,5 por cento de ácido lático, com seis repetições e seis animais por unidade experimental. Não houve influência (P>0,05) dos tratamentos sobre o ganho de peso diário (GPD), consumo de dieta diário (CRD) e conversão alimentar (CA). Quanto ao epitélio intestinal, não houve diferenças (P>0,05) entre tratamentos em relação à altura do epitélio do duodeno, jejuno e íleo. Não houve efeito dos tratamentos (P>0,05) sobre o pH do estômago e do jejuno. A inclusão do ácido fumárico não influenciou o desempenho dos leitões.

This assay was carried out to evaluate the effect of fumaric acid; latic acid and calcium propionate on the performance and morphological and morphometric characteristics of small intestine in weaning piglets. A total of 180 weaning piglets were used (90 males and 90 females) with 15 days of age and an initial weight of 4.78 1.1 kg, distributed in a completely randomized block designed with five treatments: T1 - Control ration (CR); T2 - CR + 0.5 percentfumaric acid; T3 - CR + 0.5 percent fumaric acid + 1.0 percent calcium propionate; T4 - CR + 0.5 percent fumaric acid +1.0 percent lactic acid; T5 - CR + 0.5 percent fumaric acid + 0.5 percent calcium propionate + 0.5 percent lactic acid , six replicates of six animals. The performance, morphological and morphometric characteristics of small intestine were evaluated. Daily weight gain, daily feed intake, weight gain: feed intake ratio was not affected by treatments. Significant differences between treatments were not observed for intestinal epithelium height of duodenum, jejunum and ileum (P>0.05). No significant differences between treatments were observed (P<0.05) for the pH of stomach and jejunum. No effect of fumaric acid on piglets performance was observed.

Ácido fumárico e sua combinação com os ácidos butírico ou fórmico em dietas de leitões recém desmamados / Fumaric, butyric and formic acid combinations in feed formulation for recently weaned piglets

Avaliaram-se o desempenho e as características morfológicas e morfométricas do intestino delgado de 210 leitões, desmamados aos 15 dias de idade, com peso médio inicial 4,04±0,66kg, em dois períodos experimentais (15-30 e 15-36 dias de idade). O delineamento experimental foi em blocos ao acaso, com sete tratamentos (T1: ração-controle sem adição de acidificante; T2: ração-controle + 0,5 por cento de ácido fumárico; T3: ração-controle + 1,0 por cento de ácido fumárico; T4: ração-controle + 0,5 por cento de ácido fumárico +0,1 por cento de ácido butírico; T5: ração-controle + 0,5 por cento de ácido fumárico + 0,5 por cento de ácido fórmico; T6: ração-controle + 1,0 por cento de ácido fumárico + 0,1 por cento de ácido butírico e T7: ração-controle + 1,0 por cento de ácido fumárico +0,5 por cento de ácido fórmico), cinco repetições e seis animais por unidade experimental. O peso dos leitões aos 30 dias de idade não foi influenciado pelos tratamentos, mas houve efeito significativo de tratamento sobre ganho de peso e consumo alimentar diário no período de 15-30 dias de idade, com maior desempenho para os leitões alimentados com dietas suplementadas com ácido fumárico. Não houve efeito significativo dos tratamentos sobre o peso médio aos 36 dias, o ganho de peso, o consumo diário e a conversão alimentar dos leitões de 15 a 36 dias de idade. Houve diferença entre tratamentos para a altura do epitélio do duodeno, porém não houve diferença em relação à do jejuno e à do íleo. As eletromicrografias do duodeno dos leitões alimentados com as diferentes dietas experimentais revelaram vilosidades com características normais(AU)

Performance, morphological and morphometric characteristics of the small intestine of 210 recently weaned piglets, averaging 4.04 ± 0.66 kg, during two periods ( from 15 to 30 days of age and from 15 to 36 days of age) were evaluated in a randomized block experimental design with seven treatments, T1: control diet (CD); T2: CD + 0.5 percent fumaric acid; T3: CD + 1.0 percent fumaric acid; T4: CD + 0.5 percent fumaric acid + 0.1 percent butyric acid; T5: CD + 0.5 percent fumaric acid + 0.5 percent formic acid; T6: CD + 1,0 percent fumaric acid + 0.1 percent butyric acid and T7: CD + 1.0 percent fumaric acid + 0.5 percent formic acid, five replicates and six piglets per experimental unit. No effects of treatment (P<0.05) on body weight at 30 days of age was observed but significant differences between treatments were observed for daily weight gain and feed consumption from 15 to 30 days of age. Piglets fed supplemented acid fumaric diets had higher performance during this period. No significant effects of treatments on body weight at 36 days of age, daily weight gain, daily feed intake and feed conversion were observed (P>0.05) from 16 to 36 days of age. Significant differences (P<0.05) between treatments for duodenal epithelium height were observed, but not for jejunum and ileum epithelium heights. Normal villus patterns were observed in the electromicrographs of duodenum from piglets fed all different diets(AU)

Ácido fumárico e sua combinação com os ácidos butírico ou fórmico em dietas de leitões recém desmamados / Fumaric, butyric and formic acid combinations in feed formulation for recently weaned piglets

Avaliaram-se o desempenho e as características morfológicas e morfométricas do intestino delgado de 210 leitões, desmamados aos 15 dias de idade, com peso médio inicial 4,04±0,66kg, em dois períodos experimentais (15-30 e 15-36 dias de idade). O delineamento experimental foi em blocos ao acaso, com sete tratamentos (T1: ração-controle sem adição de acidificante; T2: ração-controle + 0,5 por cento de ácido fumárico; T3: ração-controle + 1,0 por cento de ácido fumárico; T4: ração-controle + 0,5 por cento de ácido fumárico +0,1 por cento de ácido butírico; T5: ração-controle + 0,5 por cento de ácido fumárico + 0,5 por cento de ácido fórmico; T6: ração-controle + 1,0 por cento de ácido fumárico + 0,1 por cento de ácido butírico e T7: ração-controle + 1,0 por cento de ácido fumárico +0,5 por cento de ácido fórmico), cinco repetições e seis animais por unidade experimental. O peso dos leitões aos 30 dias de idade não foi influenciado pelos tratamentos, mas houve efeito significativo de tratamento sobre ganho de peso e consumo alimentar diário no período de 15-30 dias de idade, com maior desempenho para os leitões alimentados com dietas suplementadas com ácido fumárico. Não houve efeito significativo dos tratamentos sobre o peso médio aos 36 dias, o ganho de peso, o consumo diário e a conversão alimentar dos leitões de 15 a 36 dias de idade. Houve diferença entre tratamentos para a altura do epitélio do duodeno, porém não houve diferença em relação à do jejuno e à do íleo. As eletromicrografias do duodeno dos leitões alimentados com as diferentes dietas experimentais revelaram vilosidades com características normais

Performance, morphological and morphometric characteristics of the small intestine of 210 recently weaned piglets, averaging 4.04 ± 0.66 kg, during two periods ( from 15 to 30 days of age and from 15 to 36 days of age) were evaluated in a randomized block experimental design with seven treatments, T1: control diet (CD); T2: CD + 0.5 percent fumaric acid; T3: CD + 1.0 percent fumaric acid; T4: CD + 0.5 percent fumaric acid + 0.1 percent butyric acid; T5: CD + 0.5 percent fumaric acid + 0.5 percent formic acid; T6: CD + 1,0 percent fumaric acid + 0.1 percent butyric acid and T7: CD + 1.0 percent fumaric acid + 0.5 percent formic acid, five replicates and six piglets per experimental unit. No effects of treatment (P<0.05) on body weight at 30 days of age was observed but significant differences between treatments were observed for daily weight gain and feed consumption from 15 to 30 days of age. Piglets fed supplemented acid fumaric diets had higher performance during this period. No significant effects of treatments on body weight at 36 days of age, daily weight gain, daily feed intake and feed conversion were observed (P>0.05) from 16 to 36 days of age. Significant differences (P<0.05) between treatments for duodenal epithelium height were observed, but not for jejunum and ileum epithelium heights. Normal villus patterns were observed in the electromicrographs of duodenum from piglets fed all different diets

Ácido fumárico e sua combinação com os ácidos butírico ou fórmico em dietas de leitões recém desmamados

Performance, morphological and morphometric characteristics of the small intestine of 210 recently weaned piglets, averaging 4.04 ± 0.66 kg, during two periods ( from 15 to 30 days of age and from 15 to 36 days of age) were evaluated in a randomized block experimental design with seven treatments, T1: control diet (CD); T2: CD + 0.5% fumaric acid; T3: CD + 1.0% fumaric acid; T4: CD + 0.5% fumaric acid + 0.1% butyric acid; T5: CD + 0.5% fumaric acid + 0.5% formic acid; T6: CD + 1,0% fumaric acid + 0.1% butyric acid and T7: CD + 1.0% fumaric acid + 0.5% formic acid, five replicates and six piglets per experimental unit. No effects of treatment (P 0.05) on body weight at 30 days of age was observed but significant differences between treatments were observed for daily weight gain and feed consumption from 15 to 30 days of age. Piglets fed supplemented acid fumaric diets had higher performance during this period. No significant effects of treatments on body weight at 36 days of age, daily weight gain, daily feed intake and feed conversion were observed (P>0.05) from 16 to 36 days of age. Significant differences (P 0.05) between treatments for duodenal epithelium height were observed, but not for jejunum and ileum epithelium heights. Normal villus patterns were observed in the electromicrographs of duodenum from piglets fed all different diets.

Avaliaram-se o desempenho e as características morfológicas e morfométricas do intestino delgado de 210 leitões, desmamados aos 15 dias de idade, com peso médio inicial 4,04±0,66kg, em dois períodos experimentais (15-30 e 15-36 dias de idade). O delineamento experimental foi em blocos ao acaso, com sete tratamentos (T1: ração-controle sem adição de acidificante; T2: ração-controle + 0,5% de ácido fumárico; T3: ração-controle + 1,0% de ácido fumárico; T4: ração-controle + 0,5% de ácido fumárico +0,1% de ácido butírico; T5: ração-controle + 0,5% de ácido fumárico + 0,5% de ácido fórmico; T6: ração-controle + 1,0% de ácido fumárico + 0,1% de ácido butírico e T7: ração-controle + 1,0% de ácido fumárico +0,5% de ácido fórmico), cinco repetições e seis animais por unidade experimental. O peso dos leitões aos 30 dias de idade não foi influenciado pelos tratamentos, mas houve efeito significativo de tratamento sobre ganho de peso e consumo alimentar diário no período de 15-30 dias de idade, com maior desempenho para os leitões alimentados com dietas suplementadas com ácido fumárico. Não houve efeito significativo dos tratamentos sobre o peso médio aos 36 dias, o ganho de peso, o consumo diário e a conversão alimentar dos leitões de 15 a 36 dias de idade. Houve diferença entre tratamentos para a altura do epitélio do duodeno, porém não houve diferença em relação à do jejuno e à do íleo. As eletromicrografias do duodeno dos leitões alimentados com as diferentes dietas experimentais revelaram vilosidades com características normais.