Immobilization stress responses in adult rats exposed in utero to immobilization.

The present study investigated the influence of immobilization prenatal stress on adult male rats, with the same postnatal stress, on the immune parameters and its relation with plasma corticosterone (COR) and glucose levels. To study the immunity parameters, profiles of the leucocytes, size of spleen and number of the mononuclear cells of this organ were determined. Basal levels of COR and glucose were higher in prenatally stressed animals. When the adult animals were exposed to immobilization stress, COR increased but the increase was less than that for the control group, and glucose was equal in both groups. Although postnatal acute stress decreased the number of leucocytes and lymphocytes and increased the number of neutrophils, the effect was lower in prenatally stressed animals; for that reason, the ratio neutrophil/lymphocyte increased less. The number of mononuclear cells were higher in the spleen of prenatally stressed animals. This effect was probably due to retention of blood lymphocytes in the spleen. There seemed to be an alteration in the redistribution of leucocytes, both in basal conditions and under postnatal stress. The alteration of the immunological function may be partly due to an alteration in the functionality of the hypothalamic­pituitary­adrenal axis, which was hyperactive in basal conditions but appeared to suffer habituation to the same stress.

Efecto de medio condicionado de placenta humana sobre linfocitos periféricos in vitro / Effects of human placenta conditioned media on peripheric lymphocytes in vitro

En este trabajo se investiga la acción del medio condicionado de placenta humana (MCPH) sobre linfocitos periféricos in vitro. Se cultivaron leucocitos periféricos de varones, mujeres con diferente número de partos, gestantes y nulíparas, en su propio plasma sin y con MCPH al 5, 10 y 20 por ciento. Luego de 120 h de cultivo se determinó la Transformación Blástica Linfocitaria (TBL, valores ò 0,5 indican estimulación) por observación de la morfología celular. Los linfocitos de varones y mujeres nulíparas no responden a ninguna de las concentraciones de MCPH ensayadas. En mujeres que han tenido hijos, la más alta transformación blástica linfocitaria se observa con MCPH al 10 por ciento, siendo esta respuesta correlativa con el número de partos (r = 0,73). En gestantes, si bien la máxima respuesta se obtiene con MCPH al 10 por ciento, el agregado de 5 por ciento del extracto es suficiente para producir estimulación linfocitaria (TBL x = 0,54 ñ 0,05). En conclusión, MCPH al 10 por ciento sigue siendo la concentración óptima para provocar blastogénesis linfocitaria. Además, en el plasma de las mujeres gestantes existirían sustancias que potencian la acción del extracto in vitro, permitiendo TBL > 0,5 con la adición de sólo 5 por ciento de MCPH

Efecto de medio condicionado de placenta humana sobre linfocitos periféricos in vitro / Effects of human placenta conditioned media on peripheric lymphocytes in vitro

En este trabajo se investiga la acción del medio condicionado de placenta humana (MCPH) sobre linfocitos periféricos in vitro. Se cultivaron leucocitos periféricos de varones, mujeres con diferente número de partos, gestantes y nulíparas, en su propio plasma sin y con MCPH al 5, 10 y 20 por ciento. Luego de 120 h de cultivo se determinó la Transformación Blástica Linfocitaria (TBL, valores ò 0,5 indican estimulación) por observación de la morfología celular. Los linfocitos de varones y mujeres nulíparas no responden a ninguna de las concentraciones de MCPH ensayadas. En mujeres que han tenido hijos, la más alta transformación blástica linfocitaria se observa con MCPH al 10 por ciento, siendo esta respuesta correlativa con el número de partos (r = 0,73). En gestantes, si bien la máxima respuesta se obtiene con MCPH al 10 por ciento, el agregado de 5 por ciento del extracto es suficiente para producir estimulación linfocitaria (TBL x = 0,54 ñ 0,05). En conclusión, MCPH al 10 por ciento sigue siendo la concentración óptima para provocar blastogénesis linfocitaria. Además, en el plasma de las mujeres gestantes existirían sustancias que potencian la acción del extracto in vitro, permitiendo TBL > 0,5 con la adición de sólo 5 por ciento de MCPH (AU)

Influencia de las condiciones de cultivo de placenta humana sobre la producción de medios condicionados placentarios / Influence of culture conditions on the production of human placent conditioned medium

En este trabajo se propone una técnica alternativa para la obtención de medios condicionados derivados de placenta humana. Se cultivaron homogenatos placentarios en Mc Coy's 5A suplementado con suero fetla bovino al 5 por ciento y 25mM de HEPES a 37oC. Luego de seis días, los cultivos fueron sacrificados, verificándose la esterilidad y la viabilidad celular. El sobrenadante fue centrifugado a 22.000 g 30 min a 4oC y esterilizado por filtración (0,22 um), denominándolo Medio Condicionado de Placenta Humana (MCPH). Se probó la actividad de los extractos, así obtenidos, en cultivos de linfocitos periféricos de mujeres con tres hijos, con la adición de MCPH al 5 por ciento ,10 por ciento y 20 por ciento y se determinó el índice de Transformación Blástica Linfocitaria (ITBL). La máxima estimulación se observó en los cultivos linfocitarios que contenían MCPH al 10 por ciento , siendo estos valores más uniformes que losa producidos con MCPH al 10 por ciento obtenidos por otra técnica. en conclusión, con esta metodología es posible obtener medios condicionados placentarios con una actividad estimulante más uniforme, independientemente de la placenta de la cual provengan

Influencia de las condiciones de cultivo de placenta humana sobre la producción de medios condicionados placentarios / Influence of culture conditions on the production of human placent conditioned medium

En este trabajo se propone una técnica alternativa para la obtención de medios condicionados derivados de placenta humana. Se cultivaron homogenatos placentarios en Mc Coys 5A suplementado con suero fetla bovino al 5 por ciento y 25mM de HEPES a 37oC. Luego de seis días, los cultivos fueron sacrificados, verificándose la esterilidad y la viabilidad celular. El sobrenadante fue centrifugado a 22.000 g 30 min a 4oC y esterilizado por filtración (0,22 um), denominándolo Medio Condicionado de Placenta Humana (MCPH). Se probó la actividad de los extractos, así obtenidos, en cultivos de linfocitos periféricos de mujeres con tres hijos, con la adición de MCPH al 5 por ciento ,10 por ciento y 20 por ciento y se determinó el índice de Transformación Blástica Linfocitaria (ITBL). La máxima estimulación se observó en los cultivos linfocitarios que contenían MCPH al 10 por ciento , siendo estos valores más uniformes que losa producidos con MCPH al 10 por ciento obtenidos por otra técnica. en conclusión, con esta metodología es posible obtener medios condicionados placentarios con una actividad estimulante más uniforme, independientemente de la placenta de la cual provengan(AU)

Evaluacion del metodo de deteccion del factor precoz de preñez (EPF) en cerdos: importancia en el diagnostico temprano de gestacion / Evaluation of the method of early pregnancy factor detetion (EPF) in swine: significance in early pregnancy diagnosis

El Factor Precoz de Preñez (EPF) es una proteína que se detecta en el suero de las hembras gestantes, en la mayoría de los mamíferos, en el período previo a la implantación del embrión. La actividad de dicho factor se pone de manifiesto mediante la técnica de inhibición de formación de rosetas (TIR). Después de la preincubación de los linfocitos con suero de cerdas no preñadas, el valor meduo del TIR fue de 10.80 ñ 0.32 con un límite superior de 11.44 paa un intervalo de confianza de 95%. Por lo tanto, todos los valores de TIR 12 fueron definidos como indicadores de actividad EPF. En linfocitos incubados en suero de cerdas gestantes, el valor promdeio de TIR aumentó significativamente 19.98 + 1.13 (p < 0.001). El 10% de las cerdas preñdas no evidenció actividad EPF. Una sola cerda vacía dió un valor de TIR=20. Este ensayo no es cuantitativo y la gran dispersión en los valores del TIR lo convierten en un método poco adecuado para el diagnóstico precoz de preñez. Sería de interés contar con una prueba rápida y segura que permitiera el diagnóstico de la gestación de manera precoz, como así también, un manejo racional de la hembra pocos días después del servicio o de la transferencia embrionaria

Evaluacion del metodo de deteccion del factor precoz de preñez (EPF) en cerdos: importancia en el diagnostico temprano de gestacion / Evaluation of the method of early pregnancy factor detetion (EPF) in swine: significance in early pregnancy diagnosis

El Factor Precoz de Preñez (EPF) es una proteína que se detecta en el suero de las hembras gestantes, en la mayoría de los mamíferos, en el período previo a la implantación del embrión. La actividad de dicho factor se pone de manifiesto mediante la técnica de inhibición de formación de rosetas (TIR). Después de la preincubación de los linfocitos con suero de cerdas no preñadas, el valor meduo del TIR fue de 10.80 ñ 0.32 con un límite superior de 11.44 paa un intervalo de confianza de 95%. Por lo tanto, todos los valores de TIR 12 fueron definidos como indicadores de actividad EPF. En linfocitos incubados en suero de cerdas gestantes, el valor promdeio de TIR aumentó significativamente 19.98 + 1.13 (p < 0.001). El 10% de las cerdas preñdas no evidenció actividad EPF. Una sola cerda vacía dió un valor de TIR=20. Este ensayo no es cuantitativo y la gran dispersión en los valores del TIR lo convierten en un método poco adecuado para el diagnóstico precoz de preñez. Sería de interés contar con una prueba rápida y segura que permitiera el diagnóstico de la gestación de manera precoz, como así también, un manejo racional de la hembra pocos días después del servicio o de la transferencia embrionaria (AU)