ABSTRACT
O diagnóstico de certeza da leishmaniose cutânea depende do encontro doagente etiológico. A técnica tradicional de cultura (TTC) realizada emtubosdemanda prolongada incubação, grande volume de meio de cultivo edeamostra. A técnica de microcultura (TMC) realizada em placas de 96poçosutiliza pequeno volume de meio de cultivo e de amostra, possibilitandorealizar diversos inóculos por amostra examinada. Ocrescimento de L. (V.) braziliensis (MHOM/84/LTB300) foi realizado nasduas técnicasobjetivando determinar o número mínimo de parasitasnecessários para aproliferação. A partir de diluições seriadas de suspensãocom L. (V.) braziliensis, foram obtidos inóculos em concentrações de 1x100 até1x103 para o cultivo. Na concentração de 1x103 foi observadaproliferação0arasitária a partir de 48 horas do cultivo. Um único parasita(1x100) foisuficiente para permitir a proliferação nas duas técnicas. Noinóculo de18concentração 1x101 a TTC atingiu 1x108 parasitas, porém aproliferação foi3observada primeiramente na TMC. Na concentração de 1x103 a TMC atingiu 2x108 parasitas. Concluiu-se que a TMC é uma estratégiaque permitiu ocultivo a partir de uma única forma flagelada. Novos estudosestão sendorealizados para avaliar a viabilidade da TMC na utilização comométododiagnóstico
Subject(s)
Animals , Diagnosis , Leishmania , ParasitologyABSTRACT
Os métodos imunológicos são amplamente empregados no diagnóstico da leishmaniose visceral americana (LVA), porém apresentam problemas relacionados a reações cruzadas com outros agentes e persistência de anticorpos mesmo após o tratamento. A demonstração da presença do agente causal a partir da utilização de métodos diretos, especialmente o cultivo, embora possa ser considerado como procedimento de referência, apresenta baixa sensibilidade e demanda dias e até semanas para a sua finalização. No presente estudo objetivou-se: Avaliar a viabilidade da técnica de microcultura (TMC) para o crescimento primário de Leishmania spp; avaliar a sensibilidade da TMC em comparação à técnica tradicional de cultura (TTC) e às técnicas sorológicas utilizadas no diagnóstico da leishmaniose visceral canina (LVC), utilizando o exame direto como referência. Foram realizados: a) Cultivo de cepas de referência para observar a viabilidade da TMC e quantificação do inóculo mínimo para proliferação; b) utilização de amostras provenientes de cães do Centro de Controle de Zoonozes do município de Bauru, onde foram utilizados: sangue total para a realização do teste imunocromatográfico, soro para realização de reação de imunofluorescência indireta (RIFI) e ensaio imunoenzimático (ELISA), aspirado de baço, de linfonodo e pele, para semeadura na TMC e na TTC e para a realização de exame direto. Foram constituídos três grupos: Grupo A - Padronização das condições de cultivo com amostras de 65 animais; Grupo B - avaliação da TMC frente as demais técnicas diagnósticas utilizando amostras de 135 animais; Grupo C - cultivo de diferentes tecidos utilizando amostras de 70 animais incluídos no grupo B. No cultivo de cepas de referências, foi observada proliferação a partir do inóculo de um parasita. A TMC apresentou maior positividade que a TTC, que a RIFI e que o exame direto, este último utilizado como referência. A TMC apresentou maior concordância frente aos...
Subject(s)
Diagnosis , Leishmania/parasitology , Culture Media/analysisABSTRACT
Os métodos imunológicos são amplamente empregados no diagnóstico da leishmaniose visceral americana (LVA), porém apresentam problemas relacionados a reações cruzadas com outros agentes e persistência de anticorpos mesmo após o tratamento. A demonstração da presença do agente causal a partir da utilização de métodos diretos, especialmente o cultivo, embora possa ser considerado como procedimento de referência, apresenta baixa sensibilidade e demanda dias e até semanas para a sua finalização. No presente estudo objetivou-se: Avaliar a viabilidade da técnica de microcultura (TMC) para o crescimento primário de Leishmania spp; avaliar a sensibilidade da TMC em comparação à técnica tradicional de cultura (TTC) e às técnicas sorológicas utilizadas no diagnóstico da leishmaniose visceral canina (LVC), utilizando o exame direto como referência. Foram realizados: a) Cultivo de cepas de referência para observar a viabilidade da TMC e quantificação do inóculo mínimo para proliferação; b) utilização de amostras provenientes de cães do Centro de Controle de Zoonozes do município de Bauru, onde foram utilizados: sangue total para a realização do teste imunocromatográfico, soro para realização de reação de imunofluorescência indireta (RIFI) e ensaio imunoenzimático (ELISA), aspirado de baço, de linfonodo e pele, para semeadura na TMC e na TTC e para a realização de exame direto. Foram constituídos três grupos: Grupo A - Padronização das condições de cultivo com amostras de 65 animais; Grupo B - avaliação da TMC frente as demais técnicas diagnósticas utilizando amostras de 135 animais; Grupo C - cultivo de diferentes tecidos utilizando amostras de 70 animais incluídos no grupo B. No cultivo de cepas de referências, foi observada proliferação a partir do inóculo de um parasita. A TMC apresentou maior positividade que a TTC, que a RIFI e que o exame direto, este último utilizado como referência. A TMC apresentou maior concordância frente aos...
