Larval excretion/secretion of dipters of Lucilia cuprina species induces death in promastigote and amastigote forms of Leishmania amazonensis.

Leishmaniasis is a neglected tropical disease that affects millions of people around the world. Larval excretion/secretion (ES) of the larvae of flies of the Calliphoridae family has microbicidal activity against Gram-positive and Gram-negative bacteria, in addition to some species of Leishmania. Our study aimed at assessing the in vitro efficacy of Lucilia cuprina larval ES against the promastigote and amastigote forms of Leishmania amazonensis, elucidating possible microbicidal mechanisms and routes of death involved. Larval ES was able to inhibit the viability of L. amazonensis at all concentrations, induce morphological and ultrastructural changes in the parasite, retraction of the cell body, roughness of the cytoplasmic membrane, leakage of intracellular content, ROS production increase, induction of membrane depolarization and mitochondrial swelling, the formation of cytoplasmic lipid droplets and phosphatidylserine exposure, thus indicating the possibility of apoptosis-like death. To verify the efficacy of larval ES on amastigote forms, we performed a phagocytic assay, measurement of total ROS and NO. Treatment using larval ES reduced the percentage of infection and the number of amastigotes per macrophage of lineage J774A.1 at all concentrations, increasing the production of ROS and TNF-α, thus indicating possible pro-inflammatory immunomodulation and oxidative damage. Therefore, treatment using larval ES is effective at inducing the death of promastigotes and amastigotes of L. amazonensis even at low concentrations.

Two new Dolichothele Mello-Leitão, 1923 species from Brazil and Bolivia (Araneae, Theraphosidae).

Two new species of Dolichothele Mello-Leitão, 1923 are described from Brazil and Bolivia, D. mottaisp. n. from Distrito Federal and the state of Goiás, Brazil, and D. camargorumsp. n. from the state of Rondônia, Brazil, and the La Paz region, Bolivia. Males of the two new species resemble Dolichothele bolivianum (Vol, 2001) in having a small subapical keel on the distal embolus and females in particular by the short spermatheca. Dolichothele bolivianum is redescribed, and its geographical distribution is herein restricted to Bolivia and the state of Mato Grosso in Brazil.

Moléculas antimicrobianas na casca do abacaxi

O abacaxi é uma fruta rica em vitaminas e minerais, além disso, a casca contém propriedades especiais, como substâncias antibacterianas e antifúngicas. Estas propriedades podem ser isoladas e, eventualmente, preservar alimentos. O objetivo deste trabalho é identificar e caracterizar moléculas antimicrobianas na casca do abacaxi. A casca de um abacaxi foi triturado em ácido trifluoroacético (TFA) a 0,1% e colocado em banho de gelo sob agitação por trinta minutos. O extrato ácido obtido foi filtrado várias vezes para remover uma maior parte sólida. Este extrato ácido foi submetido a uma pré-purificação com cartucho Sep Pak C18 e eluído em concentrações diferentes de acetonitrila (5%, 40% e 80%). Estas frações foram secas por liofilização, reconstituída em TFA a 0,05% e aplicada a uma cromatografia de fase reversa em uma coluna ODS C18 preparativa. A eluição de 5% foi realizada em um gradiente linear (0 a 20%) de ACN, a eluição de 40% foi realizada em um gradiente linear (2-60%) de ACN e a eluição de 80% foi realizada num gradiente linear (0 a 80%) de ACN durante 60 minutos em um fluxo de 8,0 mL/min. O efluente da coluna foi monitorado por absorvância a 225 nm e a atividade antimicrobiana foi determinada pelo ensaio de inibição do crescimento líquido contra Aspergillus niger, Cryptococcus neoformans, Micrococcus luteus, Escherichia coli, Candida albicans e Cladosporium herbarum. As frações que mostraram atividade foram secas por centrifugação a vácuo utilizando um Speed-Vac e depois reconstituída em ácido fórmico a ser avaliada por espectrometria de massa (Orbitrap - LC MS). Os dados foram analisados por comparação contra proteínas armazenadas na base de dados. Através das técnicas aplicadas foram encontradas 28 frações com atividade, entre elas, 2 frações apresentaram atividade contra Aspergillus niger, 3 frações apresentaram atividade contra Candida albicans, 22 frações apresentaram atividade contra Micrococcus luteus, uma fração apresentou atividade contra Escherichia coli e 5 frações mostram uma diminuição no crescimento de Cladosporium herbarum. Por meio da espectrometria de massas, foi possível identificar as semelhanças entre 3 moléculas já descritas na literatura: bromelina, jacalina e uma pequena proteína de partícula de borracha, estes 3 poderia ser a substituição de conservantes químicos em compostos antimicrobianos naturais.