ABSTRACT
Cryptosporidiosis is a waterborne disease, has as aggravating the difficulty of preventing environmental contamination and lack of effective therapeutic measures. With marked importance to the cattle, causes inflammation and intestinal villous atrophy resulting in loss of absorptive surface. This study aimed to perform molecular characterization of Cryptosporidium spp. in calves in the city of Formiga, Minas Gerais. A total of 300 faeces samples from Holstein calves, Nelore and indefinite breed, both healthy, were evaluated by negative contrast staining technique of malachite green and through the reaction of nested PCR for amplification of DNA fragments of the 18S subunit of the RNA gene ribosomal. Occurrence of 5.33 % ( 16/300 ) for malachite green and 4.66 % ( 14/300 ) by PCR was observed, whereas no correlation was found between positive and variables studied. Through molecular characterization were identified Cryptosporidium andersoni and Cryptosporidium ryanae species. In conclusion, we observed a low incidence of infection and elimination of Cryptosporidium spp. oocysts, the absence of clinical signs in animals, strong agreement between the results obtained by the two techniques. Beyond, with the molecular characterization ( nested PCR ), species of C. andersoni and C. ryanae were diagnosed in age groups not present in the literature. These two species of Cryptosporidium
A criptosporidiose, é a enfermidade de veiculação hídrica, possui como agravante a dificuldade de prevenção da contaminação ambiental e ausência de medidas terapêuticas eficazes. Com acentuada importância na bovinocultura, ocasiona inflamação e atrofia das vilosidades intestinais resultando em perda da superfície de absorção. Este estudo teve como objetivo realizar a caracterização molecular da infecção por Cryptosporidium spp. em bezerros do Município de Formiga, Minas Gerais. Um total de 300 amostras de fezes de bezerros holandeses, Nelore e sem raça definida saudáveis foram avaliadas pela técnica de coloração contraste negativo de verde malaquita e por meio da reação de Nested-PCR para amplificação de fragmentos de DNA da subunidade 18S do gene do RNA ribossômico. Ocorrência de 5,33% (16/300) pelo verde malaquita e 4,66% (14/300), pela PCR foi observada, sendo que nenhuma correlação foi verificada entre a positividade e as variáveis estudadas. Por meio da caracterização molecular foram identificadas as espécies Cryptosporidium andersoni e Cryptosporidium ryanae. Como conclusão, observou-se baixa ocorrência da infecção e eliminação de oocistos por Cryptosporidium spp, ausência de sinais clínicos nos animais, houve forte concordância entre os resultados obtidos por meio das duas técnicas utilizadas e pela caracterização molecular (Nested-PCR) foram diagnosticadas as espécies C
ABSTRACT
Cryptosporidiosis is a waterborne disease, has as aggravating the difficulty of preventing environmental contamination and lack of effective therapeutic measures. With marked importance to the cattle, causes inflammation and intestinal villous atrophy resulting in loss of absorptive surface. This study aimed to perform molecular characterization of Cryptosporidium spp. in calves in the city of Formiga, Minas Gerais. A total of 300 faeces samples from Holstein calves, Nelore and indefinite breed, both healthy, were evaluated by negative contrast staining technique of malachite green and through the reaction of nested PCR for amplification of DNA fragments of the 18S subunit of the RNA gene ribosomal. Occurrence of 5.33 % ( 16/300 ) for malachite green and 4.66 % ( 14/300 ) by PCR was observed, whereas no correlation was found between positive and variables studied. Through molecular characterization were identified Cryptosporidium andersoni and Cryptosporidium ryanae species. In conclusion, we observed a low incidence of infection and elimination of Cryptosporidium spp. oocysts, the absence of clinical signs in animals, strong agreement between the results obtained by the two techniques. Beyond, with the molecular characterization ( nested PCR ), species of C. andersoni and C. ryanae were diagnosed in age groups not present in the literature. These two species of Cryptosporidium
A criptosporidiose, é a enfermidade de veiculação hídrica, possui como agravante a dificuldade de prevenção da contaminação ambiental e ausência de medidas terapêuticas eficazes. Com acentuada importância na bovinocultura, ocasiona inflamação e atrofia das vilosidades intestinais resultando em perda da superfície de absorção. Este estudo teve como objetivo realizar a caracterização molecular da infecção por Cryptosporidium spp. em bezerros do Município de Formiga, Minas Gerais. Um total de 300 amostras de fezes de bezerros holandeses, Nelore e sem raça definida saudáveis foram avaliadas pela técnica de coloração contraste negativo de verde malaquita e por meio da reação de Nested-PCR para amplificação de fragmentos de DNA da subunidade 18S do gene do RNA ribossômico. Ocorrência de 5,33% (16/300) pelo verde malaquita e 4,66% (14/300), pela PCR foi observada, sendo que nenhuma correlação foi verificada entre a positividade e as variáveis estudadas. Por meio da caracterização molecular foram identificadas as espécies Cryptosporidium andersoni e Cryptosporidium ryanae. Como conclusão, observou-se baixa ocorrência da infecção e eliminação de oocistos por Cryptosporidium spp, ausência de sinais clínicos nos animais, houve forte concordância entre os resultados obtidos por meio das duas técnicas utilizadas e pela caracterização molecular (Nested-PCR) foram diagnosticadas as espécies C
ABSTRACT
Nine pregnant mares were orally inoculated with sporuiated Toxoplasma gondii oocysts and three other were maintained as controls. The oocysts used were obtained by infecting susceptible cats, which received viable cysts from chronic infected mice with the Toxoplasma gondii "P" strain. The clinical signs, observed in experimentally infected mares, consisted of hyperthermia, lack of appetite, prostration, diarrhea, ocular mucous discharge and nasal serous discharge. At three clays post, inoculation leocopenia was observed. Parasitemia of Toxoplasma gondii was detected from two to 47 DPI. The humoral immune response appeared at the 10 DPI and its highest average level (1:16384) occurred after the 20 DPI.
Nove éguas gestantes foram inoculadas, via oral, com oocistos esporulados de T. gondii, e três outras foram mantidas como controles. Os oocistos utilizados foram obtidos de fezes de gatos experimentalmente infectados com cistos oriundos de camundongos cronicamente infectados com a "cepa P". Os sinais clínicos observados nas éguas experimentalmente infectadas foram hipertermia, perda de apetite, prostração, diarréia, secreção ocular mucosa e corrimento nasal seroso. No 3e 18 dias após inoculação detectou-se leucopenia e aumento dos níveis séricos de aspartato aminotransferase, respectivamente. Parasitemia foi detectada entre os dias 2 e 47 após inoculação. A resposta imunitária humoral iniciou-se por volta do 10 DPI e os maiores títulos (1:16384) ocorreram após o 20 DPI.
ABSTRACT
Frangos de corte, criados em gaiolas, foram inoculados,respectivamente, por via oral/intratraqueal e ocular,com diferentes doses de oocistos de Cryptosporídiumbaileyi e vírus vacinal da doença de Newcastle, para análisede lesões macro e microscópicas e para avaliação dainfluência do parasito na imunidade das aves, adotandocomq modelo a doença de Newcastle. Foram empregadas128 aves, distribuídas em oito tratamentos e quatrorepetições com quatro aves por parcela. Aos dez dias deidade procedeu-se à inoculação dos animais, via oral/intratraqueal, com 103 , 105 e 107 oocistos, seguida davacinação,no 14º dia de vida, com a amostra LaSota, dovírus da doença de Newcastle (VDN). Para análise daresposta imune, foram utilizados os resultados dos títulosde anticorpos inibidores da hemaglutinação (HI), composterior desafio frente a uma estirpe velogênicaviscerotrópica, do VDN, aos 43 dias de vida das aves. Foitambém realizada a análise de lesões macro e microscópicasna traquéia e bursa de Fabricius das aves aos 42dias de vidà.. Os grupos inoculados com o C. baileyiapresentaram, na bursa de Fabricius, lesões caracterizadaspor leve hiperemia e exsudato caseoso preenchendoà luz desse órgão atrofia leve e infiltração de linfócitose plasmócitos na lâmina própria. Na traquéia dos gruposinoculados com o parasito, via intratraqueal, havia a presençade muco e leve hiperemia, hiperplasia epitelial e
ABSTRACT
Nine pregnant mares were orally inoculated with sporuiated Toxoplasma gondii oocysts and three other were maintained as controls. The oocysts used were obtained by infecting susceptible cats, which received viable cysts from chronic infected mice with the Toxoplasma gondii "P" strain. The clinical signs, observed in experimentally infected mares, consisted of hyperthermia, lack of appetite, prostration, diarrhea, ocular mucous discharge and nasal serous discharge. At three clays post, inoculation leocopenia was observed. Parasitemia of Toxoplasma gondii was detected from two to 47 DPI. The humoral immune response appeared at the 10 DPI and its highest average level (1:16384) occurred after the 20 DPI.
Nove éguas gestantes foram inoculadas, via oral, com oocistos esporulados de T. gondii, e três outras foram mantidas como controles. Os oocistos utilizados foram obtidos de fezes de gatos experimentalmente infectados com cistos oriundos de camundongos cronicamente infectados com a "cepa P". Os sinais clínicos observados nas éguas experimentalmente infectadas foram hipertermia, perda de apetite, prostração, diarréia, secreção ocular mucosa e corrimento nasal seroso. No 3e 18 dias após inoculação detectou-se leucopenia e aumento dos níveis séricos de aspartato aminotransferase, respectivamente. Parasitemia foi detectada entre os dias 2 e 47 após inoculação. A resposta imunitária humoral iniciou-se por volta do 10 DPI e os maiores títulos (1:16384) ocorreram após o 20 DPI.
ABSTRACT
Frangos de corte, criados em gaiolas, foram inoculados,respectivamente, por via oral/intratraqueal e ocular,com diferentes doses de oocistos de Cryptosporídiumbaileyi e vírus vacinal da doença de Newcastle, para análisede lesões macro e microscópicas e para avaliação dainfluência do parasito na imunidade das aves, adotandocomq modelo a doença de Newcastle. Foram empregadas128 aves, distribuídas em oito tratamentos e quatrorepetições com quatro aves por parcela. Aos dez dias deidade procedeu-se à inoculação dos animais, via oral/intratraqueal, com 103 , 105 e 107 oocistos, seguida davacinação,no 14º dia de vida, com a amostra LaSota, dovírus da doença de Newcastle (VDN). Para análise daresposta imune, foram utilizados os resultados dos títulosde anticorpos inibidores da hemaglutinação (HI), composterior desafio frente a uma estirpe velogênicaviscerotrópica, do VDN, aos 43 dias de vida das aves. Foitambém realizada a análise de lesões macro e microscópicasna traquéia e bursa de Fabricius das aves aos 42dias de vidà.. Os grupos inoculados com o C. baileyiapresentaram, na bursa de Fabricius, lesões caracterizadaspor leve hiperemia e exsudato caseoso preenchendoà luz desse órgão atrofia leve e infiltração de linfócitose plasmócitos na lâmina própria. Na traquéia dos gruposinoculados com o parasito, via intratraqueal, havia a presençade muco e leve hiperemia, hiperplasia epitelial e