Energy-dependent accumulation of norfloxacin and porin expression in clinical isolates of Klebsiella pneumoniae and relationship to extended-spectrum beta-lactamase production.

The relationships between porin deficiency, active efflux of fluoroquinolones, and extended-spectrum beta-lactamase (ESBL) production were determined for 53 clinical isolates of Klebsiella pneumoniae. Thirty-two ESBL-positive strains (including 22 strains expressing porins and 10 strains lacking porins) and 21 ESBL-negative strains were evaluated. Active efflux of norfloxacin was defined as a >/=50% increase in the accumulation of norfloxacin in the presence of carbonyl cyanide m-chlorophenylhydrazone (CCCP) in comparison with the corresponding basal value in the absence of CCCP. The quinolone resistance-determining regions of both gyrA and parC from 13 strains, representing all isolates with different porin profiles and with or without active efflux, were determined. Porin loss was significantly more common among ESBL-positive strains (10 of 32 [31.2%]) than among ESBL-negative strains (0 of 2 [0%]) (P < 0.01). Active efflux was observed in 7 of 10 (70%) strains lacking porins and in 4 of 43 (9.3%) strains producing porins (P < 0.001). The 11 strains showing active efflux corresponded to 3 of 21 (14.3%) ESBL-negative strains and 8 of 32 (25.5%) ESBL-positive strains (P > 0.05). Basal values of norfloxacin accumulation were higher in strains lacking active efflux than in those that had this mechanism (P < 0.05). In the absence of topoisomerase changes, the contribution of either porin loss or active efflux to fluoroquinolone resistance in K. pneumoniae was negligible. It is concluded that among K. pneumoniae strains of clinical origin, porin loss was observed only in those producing ESBL, and that a significant number of porin-deficient strains also expressed active efflux of norfloxacin. In terms of fluoroquinolone resistance, both mechanisms are significant only in the presence of topoisomerase modifications.

Actividad de cuatro fluoroquinolonas frente a cepas de Pseudomonas aeruginosa con diferente patrón de sensibilidad a Ceftazidima e Imipenem / The activity of four fluoroquinolones against strains of Pseudomonas aeruginosa with a different sensitivity pattern to ceftazidime and imipenem

FUNDAMENTO. Evaluar la actividad de cuatro fluoroquinolonas (ciprofloxacino, clinafloxacino, norfloxacino y pefloxacino) frente cepas clínicas de Pseudomas aeruginosa con diferentes patrones de sensibilidad a ceftazidima e imipenem. MATERIAL Y MÉTODOS. Se estudiaron 156 cepas de P. aeruginosa aisladas en el Hospital Universitario Virgen Macarena de Sevilla en los años 1998 y 1999. La actividad in vitro de cuatro fluoroquinolonas se determinó mediante microdilución en caldo Mueller Hinton suplementado con cationes siguiendo las recomendaciones del NCCLS. RESULTADOS. Para el total de cepas evaluadas, los valores de concentración mínima inhibitoria (CMI)90 de clinafloxacino (4 mg/l) fueron significativamente inferiores a los de ciprofloxacino (64 mg/l). Para las 76 cepas resistentes a ciprofloxacino, las CMI90 de clinafloxacino y ciprofloxacino fueron de 16 y > 128 mg/l respectivamente. Clinafloxacino fue más activa que ciprofloxacino, norfloxacino y pefloxacino, con independencia del patrón de sensibilidad o resistencia a ceftazidima e imipenem. CONCLUSIÓN. Clinafloxacino fue más activa in vitro que ciprofloxacino frente a P. aeruginosa (AU)

Actividad de ocho fluoroquinolonas frente a biocapas de Escherichia coli y Pseudomonas aeruginosa sobre sondas urinarias de látex siliconizado / The activity of eight fluoroquinolones versus biolayers of Escherichia coli and Pseudomonas aeruginosa in siliconized latex urinary catheters

Fundamentos: Estudiar la actividad in vitro de ocho fluoroquinolonas sobre biocapas de Escherichia coli y Pseudomonas aeruginosa formadas sobre sondas urinarias de látex siliconizado. Material y métodos: Se estudiaron las fluoroquinolonas norfloxacino, ciprofloxacino, ofloxacino, levofloxacino, clinafloxacino, esparfloxacino, trovafloxacino y moxifloxacino, frente a dos cepas de E. coli (CBR-3 y CBR-4) y dos cepas de P. aeruginosa (HUS-3 y PBR-2). Se determinaron los valores de concentración mínima inhibitoria (CMI) y concentración mínima bactericida (CMB) de bacterias en suspensión, siguiendo las recomendaciones del NCCLS, y de biocapas de 6 y 24 h formadas sobre sondas urinarias de látex siliconizado. Para determinar los valores de CMI y CMB de las biocapas se utilizaron como inóculo segmentos de sondas urinarias, sobre los que se habían formado biocapas de 6 o 24 h respectivamente. Resultados: Los valores de CMI de ciprofloxacino frente a biocapas de 24 h de E. coli y P. aeruginosa fueron iguales a los de las bacterias en suspensión. Para el resto de fluoroquinolonas estudiadas, los valores de CMI frente a las biocapas bacterianas fueron dos o más veces mayores a los obtenidos frente a bacterias en suspensión, excepto ofloxacino y E. coli CBR-4, trovafloxacino y E. coli CBR-3, y levofloxacino y trovafloxacino frente a P. aeruginosa PBR-2, en estos casos los valores de CMI fueron iguales en bacterias adheridas y en suspensión. Para todas las fluoroquinolonas evaluadas, los valores de CMB frente a las biocapas de E. coli y P. aeruginosa fueron de 8 a > 4.096 veces los obtenidos para bacterias en suspensión. Conclusiones: Las biocapas bacterianas de E. coli y P. aeruginosa sobre látex siliconizado son más resistentes a la actividad bactericida de las fluoroquinolonas evaluadas que las bacterias en suspensión (AU)