Influence of blood/anticoagulant ratio and storage temperature on platelet parameters using Cell Dyn Ruby® analyzer / Influência da relação sangue/anticoagulante e da temperatura de armazenamento em parâmetros plaquetários utilizando o analisador Cell Dyn Ruby®

Introduction: The pre-analytical phase directly influences the laboratory result, such as the method of collection, transport, and storage of biological samples. Therefore, the stability of the biological sample is a crucial and determinant aspect of the quality of results in a clinical laboratory. Studies show that some platelet parameters may suffer alterations in the presence of altered blood/anticoagulant ratio, with increased storage time and/or variations in storage temperature, possibly leading to unrepresentative results. This study aimed to investigate the reliability of platelet parameters regarding the effect of the anticoagulant/blood ratio and storage temperature in samples stored for up to 24 hours after collection using the Cell Dyn Ruby® equipment.Methodology: A total of 351 blood samples were evaluated under different analysis periods: 2, 5, 12, and 24 hours and storage methods: at room temperature (25 °C) and 4 °C, in addition to the analysis of anticoagulant/blood ratio. The Platelet parameters selected were: PLT (total platelet count), MPV (mean platelet volume), PDW (Platelet Distribution Width) and PCT (plateletcrit). The imprecision of the results was evaluated by the CVa (%) within the maximum allowed analytical variation, as well as by the mean difference of the results concerning the baseline sample (2 hours). Results: The total platelet count was the only parameter evaluated that showed reproducibility of results in all conditions analyzed. Regarding the other platelet parameters, it could be observed an imprecision of results emitted by Cell Dyn Ruby® after five hours of storage, both at room and refrigerated temperature. Conclusion: This study demonstrates that pre-analytical factors, such as storage temperature and storage time, can affect the variability of platelet parameters, which may produce erroneous results. Thus, the correct blood/anticoagulant ratio must be respected to avoid the late processing of the sample (AU)

Introdução: O resultado laboratorial é diretamente influenciado por etapas da fase pré-analítica, como método de coleta, transporte e armazenamento das amostras biológicas. Desta forma, a estabilidade da amostra biológica é um aspecto crucial e determinante para a qualidade dos resultados de um laboratório clínico. Estudos demonstram que alguns parâmetros plaquetários podem sofrer modificações na presença da relação sangue/anticoagulante alterada, com aumento do tempo de estocagem e/ou alterações na temperatura de armazenamento, podendo levar a resultados não representativos. Portanto, o objetivo desse estudo foi investigar a confiabilidade dos parâmetros plaquetários com relação ao efeito da relação anticoagulante/sangue e da temperatura de armazenamento, em amostras estocadas por até 24 horas após a coleta, utilizando o equipamento Cell Dyn Ruby®. Métodos: Foram avaliados 351 hemogramas, em diferentes tempos de análise: 2, 5, 12 e 24 horas e formas de estocagem: à temperatura ambiente (25°C) e à 4°C, além da relação anticoagulante/sangue. Foram selecionados os seguintes parâmetros plaquetários: PLT (contagem total de plaquetas), VPM (volume plaquetário médio), PDW (amplitude de variação do tamanho das plaquetas) e PCT (plaquetócrito). A confiabilidade dos resultados foi avaliada pelo CVa (%), dentro da variação analítica máxima permitida, assim como pela diferença de média dos resultados em relação à amostra de base (2 horas). Resultados: A contagem total de plaquetas foi o único parâmetro avaliado que apresentou reprodutibilidade de resultados em todas as condições analisadas. Em relação aos demais parâmetros plaquetários, foi observado imprecisão dos resultados emitidos pelo Cell Dyn Ruby®, a partir de 5 horas de estocagem, tanto em temperatura ambiente quanto refrigerada. Conclusão: Este estudo demonstra que fatores pré-analíticos, como a temperatura de armazenamento e o tempo de estocagem, podem afetar a variabilidade dos parâmetros plaquetários, podendo produzir resultados equivocados. Deste modo, deve-se respeitar a correta relação sangue/anticoagulante e evitar o processamento tardio da amostra (AU)

Comparison of two methodologies for CD4⁺ T lymphocytes relative counting on immune monitoring of patients with human immunodeficiency virus.

Considering that counting the percentage of CD4 T lymphocytes can add prognostic information regarding patients infected with HIV, the aim of this study was to evaluate the percentage values of CD4⁺ T lymphocytes from 81 patients determined by flow cytometry and estimated by flow cytometry in conjunction with a hematology counter. Means were compared through the Student's t-test. Pearson's correlation was determined, and the agreement between results was tested by Bland-Altman. The level of significance was P < 0.05. It was found a significantly higher mean difference between the relative values of CD4⁺ T lymphocytes to the hematologic counter (P < 0.05), for all strata studied. Positive and significant correlations (P < 0.01) were found between the strata CD4 < 200 cells/mL (r = 0.93), between 200 and 500 cells/mL (r = 0.65), and >500 cells/mL (r = 0.81). The limits of agreement were 1.0 ± 3.8% for the stratum of CD4 < 200 cells/mL, approximately 2.2 ± 13.5% for the stratum of CD4 between 200 and 500 cells/mL, and approximately 6.2 ± 20.4% for the stratum > 500 cells/mL. The differences in the percentages of CD4⁺ T lymphocytes obtained by different methodologies could lead to conflict when used in clinical decisions related to the treatment and care of people infected with HIV.