Diagnosis of the pinworm Syphacia muris in the Wistar rat Rattus norvegicus.

This study aimed to compare three qualitative parasitological methods for the diagnosis of Syphacia muris infection in 30 Wistar rats (Rattus norvegicus) infected naturally. Methods of spontaneous sedimentation (Hoffman, Pons and Janer, or HPJ) and spontaneous flotation (Willis) for faecal samples and a method of taping (Graham) were performed and compared. The Graham and Willis methods were more sensitive than the HPJ method (P< 0.05). The Graham method was able to detect S. muris eggs in 100% of the samples. Eggs were detected in 83% and 60% of the samples using the Willis and HPJ methods, respectively. Method choice is important for screening for parasites of rats kept under laboratory conditions, as accurate diagnosis helps prevent future environmental contamination and infection. We concluded that the Graham method was the most efficient of those tested in this study for detection of S. muris infection in rats. This method is also rapid, inexpensive and practical, and should be implemented as a necessary measure for infection control.

The spreading process of Ehrlichia canis in macrophages is dependent on actin cytoskeleton, calcium and iron influx and lysosomal evasion.

Ehrlichia canis is an obligate intracellular microorganism and the etiologic agent of canine monocytic ehrlichiosis. The invasion process has already been described for some bacteria in this genus, such as E. muris and E. chaffeensis, and consists of four stages: adhesion, internalisation, intracellular proliferation and intercellular spreading. However, little is known about the spreading process of E. canis. The aim of this study was to analyse the role of the actin cytoskeleton, calcium, iron and lysosomes from the host cell in the spreading of E. canis in dog macrophages in vitro. Different inhibitory drugs were used: cytochalasin D (actin polymerisation inhibitor), verapamil (calcium channel blocker) and deferoxamine (iron chelator). Our results showed a decrease in the number of bacteria in infected cells treated with all drugs when compared to controls. Lysosomes in infected cells were cytochemically labelled with acid phosphatase to allow the visualisation of phagosome-lysosome fusion and were further analysed by transmission electron microscopy. Phagosome-lysosome fusion was rarely observed in vacuoles containing viable E. canis. These data suggest that the spreading process of E. canis in vitro is dependent on cellular components analysed and lysosomal evasion.

O PROCESSO DE PROPAGAÇÃO DE Ehrlichia canis EM MACRÓFAGOS É DEPENDENTE DO CITOESQUELETO DE ACTINA E DO INFLUXO DE CÁLCIO E FERRO / THE SPREADING PROCESS OF Ehrlichia canis IN MACROPHAGES IS DEPENDENT ON ACTIN CYTOSKELETON AND IRON AND CALCIUM INFLUX

Erliquioses são enfermidades de importância médica e veterinária, causadas por α-proteobactéria Gram-negativa pertencente à ordem Rickettsiales. No Brasil, o principal agente etiológico da Erliquiose Monocítica Canina (EMC) é a Ehrlichia canis, patógeno intracelular obrigatório com tropismo para monócitos e macrófagos. Este microrganismo tem ampla distribuição mundial, mais comumente encontrada em regiões tropicais e subtropicais devido à distribuição geográfica de sua principal vetor, o carrapato Rhipicephalus sanguineus. O processo de invasão já descrito para algumas bactérias deste gênero, tais como E. muris e E. chaffeensis,  compreende quatro fases: adesão, internalização, proliferação intracelular e propagação intercelular. Entretanto, pouco se sabe sobre os mecanismos celulares envolvidos no processo de invasão nas células-alvo por parte da Ehrlichia canis. Assim, o objetivo deste estudo foi analisar o papel do citoesqueleto de actina, do cálcio e do ferro durante o processo de propaga&a

A MANUTENÇÃO DE Ehrlichia canis EM MACRÓFAGOS É DEPENDENTE DA EVASÃO LISOSSOMAL / THE MAINTENANCE OF Ehrlichia canis IN MACROPHAGES IS DEPENDENT ON LYSOSOMAL EVASION

Ehrlichia canis é o agente etiológico de Erliquiose Monocítica Canina (EMC), uma das mais importantes doenças infecciosas de cães no Brasil. Bactérias intracelulares obrigatórias de monócitos e macrófagos, como E. canis, desenvolvem diversos mecanismos celulares para assegurar a sua evasão das defesas do hospedeiro, que envolvem distintas adaptações para sobrevivência nos compartimentos intracelulares. No entanto, estudos sobre essas estratégias ainda são escassos. Dessa forma, o presente estudo teve como objetivo investigar se a E. canis possui a capacidade de evitar a fusão de lisossomos às inclusões citoplasmáticas, o que favoreceria sua multiplicação. A fusão de lisossomos com endossomos contendo E. canis foi investigada utilizando cultivo celular de histiócitos caninos (DH82) infectados com a cepa São Paulo de E. canis, em uma momento no qual 50% das células estavam parasitadas. Para esse fim as células infectadas foram marcadas citoquimicamente para fosfatase ácida, uma enzima presente nos compartimentos fusionados a lisossomos. Após o processo de inclusão em

A MANUTENÇÃO DE Ehrlichia canis EM MACRÓFAGOS É DEPENDENTE DA EVASÃO LISOSSOMAL / THE MAINTENANCE OF Ehrlichia canis IN MACROPHAGES IS DEPENDENT ON LYSOSOMAL EVASION

Ehrlichia canis é o agente etiológico de Erliquiose Monocítica Canina (EMC), uma das mais importantes doenças infecciosas de cães no Brasil. Bactérias intracelulares obrigatórias de monócitos e macrófagos, como E. canis, desenvolvem diversos mecanismos celulares para assegurar a sua evasão das defesas do hospedeiro, que envolvem distintas adaptações para sobrevivência nos compartimentos intracelulares. No entanto, estudos sobre essas estratégias ainda são escassos. Dessa forma, o presente estudo teve como objetivo investigar se a E. canis possui a capacidade de evitar a fusão de lisossomos às inclusões citoplasmáticas, o que favoreceria sua multiplicação. A fusão de lisossomos com endossomos contendo E. canis foi investigada utilizando cultivo celular de histiócitos caninos (DH82) infectados com a cepa São Paulo de E. canis, em uma momento no qual 50% das células estavam parasitadas. Para esse fim as células infectadas foram marcadas citoquimicamente para fosfatase ácida, uma enzima presente nos compartimentos fusionados a lisossomos. Após o processo de inclusão em

O PROCESSO DE PROPAGAÇÃO DE Ehrlichia canis EM MACRÓFAGOS É DEPENDENTE DO CITOESQUELETO DE ACTINA E DO INFLUXO DE CÁLCIO E FERRO / THE SPREADING PROCESS OF Ehrlichia canis IN MACROPHAGES IS DEPENDENT ON ACTIN CYTOSKELETON AND IRON AND CALCIUM INFLUX

Erliquioses são enfermidades de importância médica e veterinária, causadas por α-proteobactéria Gram-negativa pertencente à ordem Rickettsiales. No Brasil, o principal agente etiológico da Erliquiose Monocítica Canina (EMC) é a Ehrlichia canis, patógeno intracelular obrigatório com tropismo para monócitos e macrófagos. Este microrganismo tem ampla distribuição mundial, mais comumente encontrada em regiões tropicais e subtropicais devido à distribuição geográfica de sua principal vetor, o carrapato Rhipicephalus sanguineus. O processo de invasão já descrito para algumas bactérias deste gênero, tais como E. muris e E. chaffeensis,  compreende quatro fases: adesão, internalização, proliferação intracelular e propagação intercelular. Entretanto, pouco se sabe sobre os mecanismos celulares envolvidos no processo de invasão nas células-alvo por parte da Ehrlichia canis. Assim, o objetivo deste estudo foi analisar o papel do citoesqueleto de actina, do cálcio e do ferro durante o processo de propaga&a

Transfer, viability and colonisation of Campylobacter jejuni in the chicken vitellus and in embryos.

1. The objective of this study was to evaluate the ability of Campylobacter jejuni to penetrate and colonise eggs from specific-pathogen-free (SPF) and heavy breeder hens, and to determine its effects on the viability of SPF embryos. 2. We detected C. jejuni in 10% of breeder hens and 20% of SPF eggs, which demonstrates the ability of the bacteria to go through the pores of eggs and contaminate the vitellus after 3 h of contact. These results indicate that there is a risk of contamination under commercial production conditions, where, after oviposition, there is contact between the egg and organic material such as faeces and blood. 3. We observed that in 80% of SPF eggs analysed, C. jejuni survived the 21-d incubation period. This positive result suggests that this microorganism was also responsible for early embryonic mortality. 4. The ability of C. jejuni to penetrate the eggs in this study suggests that serious problems may occur under natural field conditions, which may cause significant problems for producers.