ABSTRACT
In recent years, xylanases have expanded their use in many processing industries, such as pulp and paper, food and textile. Thermomyces lanuginosus IOC-4145 was able to produce a very high level of cellulase-free xylanase in shaken cultures using corncob as substrate (500 U/mL). An optimization of the medium composition in submerged fermentation was carried out aiming at a low cost medium composition for enzyme production. Statistical experiment design was employed for this purpose, pointing out corncob as the most important parameter, which affects enzyme production. Additionally, the influence of several chemicals on xylanase activity was investigated in the crude extract. A slight stimulation of the enzyme (5-15%) was achieved with NaCl and urea, both at 3 and 5 mM of concentration. On the other hand, dithiothreitol and beta-mercaptoethanol at a molarity of 5mM have caused a strong stimulation of the enzyme (40-53%). The crude xylanase displayed appreciable thermostability, retaining almost 50% of activity during 24 hours of incubation at 50ºC; about 50% of activity was present at 60ºC even after 4 hours of incubation. The enzyme also exhibited good storage stability at -20ºC without any stabilizing agent.
Nos últimos anos tem crescido o uso de xilanases em muitas indústrias, tais como polpa e papel, alimentos e têxtil. Thermomyces lanuginosus IOC-4145 foi capaz de produzir um alto nível de xilanase livre de celulase em culturas agitadas usando sabugo de milho como substrato (500 U/mL). Procedeu-se, inicialmente, à otimização da composição do meio de produção em fermentação submersa, com o intuito de alcançar uma composição de meio de produção de baixo custo para produção da enzima. Para este propósito, utilizou-se planejamento estatístico de experimentos. O sabugo de milho revelou-se como a mais importante variável que afeta a produção enzimática. Adicionalmente, a influência de vários reagentes na atividade xilanásica foi investigada no extrato bruto. Um pequeno estímulo na atividade enzimática (5-15%) foi observado para NaCl e uréia, ambos nas concentrações de 3 e 5 mM. Por outro lado, ditiotreitol e beta-mercaptoetanol 5mM causaram um grande estímulo na atividade xilanásica (40-53%). A xilanase produzida apresentou apreciável termoestabilidade, retendo quase 50% da atividade inicial durante 24 horas de incubação a 50ºC e, aproximadamente, 50% da atividade foram mantidos a 60ºC, mesmo após 4 horas de incubação. A enzima também exibiu boa estabilidade à estocagem a -20ºC na ausência de qualquer agente estabilizante.