Evaluación preliminar de un método inmunocromatográfico (Directigen EZ-RSV) en la detección antigénica del virus respiratorio sincitial / Preliminary assessment of an immunochromatographic method (Directigen EZ-RSV) for antigenic detection of syncytial respiratory virus

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Comparison between indirect immunofluorescence assay and shell vial culture for detection of mumps virus from clinical samples.

We report a prospective comparison of the efficacies of an indirect immunofluorescence assay (IFA) and shell vial culture (SVC) of throat swab and urine samples from patients with mumps. Throat swab samples were used for the IFA; the urine samples and throat swabs were inoculated into vials of Vero cells. We studied 62 patients by using 62 throat swabs and 50 urine samples (50 patients with both samples). Sixty (96.7%) throat samples were positive in the SVC, and 61 (98.3%) were positive in the IFA. For the 50 patients from whom both samples were available, the IFA was positive in 50 (100%) cases, the urine sample was positive in 49 (98%) cases, and the throat swab was positive in 48 (96%) cases (P > 0.05). This comparison of throat swabs and urine samples has shown that the two clinical samples are similar in efficacy.

Evaluation of a new dot blot enzyme immunoassay (directigen flu A+B) for simultaneous and differential detection of influenza a and B virus antigens from respiratory samples.

We report a prospective evaluation of a new dot blot enzyme immunoassay (EIA) method for the direct, rapid, qualitative, simultaneous, and differential detection of the influenza A (IA) and B (IB) virus antigen in different respiratory samples. The EIA method was compared with the shell vial culture system (MDCK cell line) used with the same samples. We studied 160 samples from 93 (58.1%) pediatric patients (hospital emergency room) and from 67 (41.9%) adult patients (sentinel network). Seventy-four(46.2%) samples were considered positive; of them, 46 (62.2%) were from pediatric patients and 28 (37.8%) were from an adult group (P < 0.05), with overall positive values of 49.9% and 41.7%, respectively. All 74 (100%) of the positive samples were isolated in cell culture versus the 68.9% that were detected as positive by the new EIA method (P < 0.05). Of the 41 samples positive for the IA virus, the EIA detected 34 (82.9%) positive samples; of the 33 samples positive for the IB virus, the EIA detected 17 (51.5%) positive samples (P < 0.05). No false-positive reaction was detected with the EIA method (specificity and positive predictive value of 100%). The overall results obtained in the comparison between the new EIA and the shell vial culture had a sensibility of 82.9% and predictive negative values of 92.4% for the IA virus and 51.5% and 84.3%, respectively, for the IB virus. This evaluation shows sensitivity and specificity percentages for the new EIA method that is acceptable for routine use in IA virus detection. The results obtained were worse for IB virus detection, but this new EIA method is actually the only one with the capacity to differentiate between the two influenza viruses.

Rendimiento del método de extracción con dextrano salino en la prueba de la antigenemia pp65 frente al citomegalovirus humano / Efficiency of saline dextran extraction method in the human cytomegalovirus pp65 antigenemia assay

Fundamento. Evaluar de forma prospectiva la eficacia del método de extracción con dextrano salino en la prueba de la antigenemia pp65 (Ag-pp65) frente al citomegalovirus humano (CMV). Material y métodos. Durante un período de dos meses se han analizado las muestras de sangre procedentes de pacientes inmunodeprimidos. La extracción de los leucocitos polimorfonucleares (LPMN) se realiza con una solución de dextrano al 6 por ciento en cloruro de sodio al 0,9 por ciento. Se realizó el recuento total de leucocitos obtenidos y el porcentaje correspondiente a los LPMN. Simultáneamente se realizó el cultivo de los LPMN extraidos por el método de shell vial (CSV) en la línea MRC-5. Resultados. Las 144 muestras de sangre analizadas se han dividido en tres grupos según la positividad en la prueba de la Ag-pp65 y/o el CSV. Los pacientes con ambas pruebas positivas presentaron el menor recuento global de leucocitos y de LPMN, mostrando significación estadística con el grupo de Ag-pp65 negativa. No se han observado diferencias en el recuento global de los grupos con Ag-pp65 negativa. El porcentaje global de LPMN obtenidos fue del 87 por ciento. El valor medio de las muestras Ag-pp65 positivas fue de 48/100.000. LPMN, que sería de 51/100.000 LPMN si se corrigiera en función del porcentaje real de LPMN (p>0,05). Conclusiones. El método de extracción leucocitario con dextrano salino ha mostrado un elevado rendimiento en la mayoría de las muestras analizadas. El estado inmunológico del paciente y la presencia de infección y/o enfermedad por CMV determinan el grado de rendimiento de este método. En general no es necesario ajustar el valor de la Ag-pp65 en función del porcentaje real de LPMN obtenidos. (AU)

Evaluación de diferentes muestras clínicas y líneas celulares en el aislamiento de enterovirus en pacientes pediátricos / Evaluation of different clinical samples and cell lines in the isolation of enterovirus in pediatric patients

Fundamento: Evaluar prospectivamente la eficacia de diferentes muestras clínicas y líneas celulares en el aislamiento de Enterovirus en pacientes pediátricos. Métodos: Durante el período comprendido entre julio de 1997 y julio de 1999 se han analizado muestras procedentes de 102 lactantes (< 2 años) con un síndrome febril de etiología desconocida. Todas las muestras tras su decontaminación fueron sembradas en las líneas celulares MRC-5, Hep-2 y Vero mediante el sistema shell-vial . A los 2-3 días de incubación a 37 °C las monocapas fueron reveladas con un anticuerpo monoclonal anti-VP1, siendo las cepas posteriormente identificadas como Poliovirus, ECHO-virus y Coxsackie mediante anticuerpos específicos. Resultados: Se han estudiado 96 muestras (45 de frotis faríngeo, 28 de heces, 13 de líquido cefalorraquídeo, 5 de sangre, 4 de orina y un lavado broncoalveolar). En 48 pacientes (47 por ciento) se aisló algún Enterovirus, correspondiendo a 60 muestras (62,5 por ciento). Se aislaron Enterovirus en el 75,5 por ciento de los frotis faríngeos, el 71,4 por ciento de las heces, el 30,7 por ciento de los líquidos cefalorraquídeos, una en sangre (20 por ciento) y en el lavado broncoalveolar. En 28 pacientes se disponía de forma simultánea de un frotis faríngeo y de heces; en este grupo, el empleo simultáneo de ambas permitió el diagnóstico en 26 casos (92,8 por ciento). De los 60 Enterovirus aislados, 59 (98,3 por ciento) lo fueron en la línea MRC-5, 23 (38,3 por ciento) en la Hep-2 y 14 (23,3 por ciento) en la Vero, observándose diferencias significativas entre la MRC-5 y las restantes. De los 60 Enterovirus aislados, 30 (50 por ciento) fueron identificados como ECHO-virus, 15 (25 por ciento) como Poliovirus vacunal, 12 (20 por ciento) no pudieron ser tipificados y 3 (5 por ciento) no crecieron. La línea MRC-5 ha resultado ser significativamente superior para el aislamiento de cada uno de los diferentes tipos de Enterovirus. Conclusiones: Para la obtención del máximo rendimiento diagnóstico frente a la sospecha de infección por Enterovirus es necesario utilizar varias muestras, preferentemente las más cercanas al foco infectivo (líquido cefalorraquídeo y sangre). La línea celular MRC-5 ha resultado ser la más eficaz en el aislamiento de los Enterovirus independientemente del tipo de muestra o del género vírico. El método de shell-vial permite el aislamiento y la identificación de los Enterovirus aislados en muestras clínicas (AU)