Human papillomavirus prevalence in women with normal cytology and with cervical cancer in Natal, Brazil.

This study analyzed the prevalence of human papillomavirus (HPV) in cervical specimens obtained from women with normal cytology and with cervical cancer, in order to evaluate their correlation with health status and demographic characteristics, as well as sexual and reproductive activity in women treated at a cancer reference hospital in Natal, Northeast Brazil. A total of 158 women were divided into 2 groups according to their health status: group I comprised 110 women with normal cytology, and group II comprised 48 women with cervical cancer. Cervical smears were analyzed by cytological or histopathological examination for the detection of cytological alterations, and by PCR for HPV DNA detection using MY09/11 primers, followed by HPV genotyping by dot blot hybridization. Results showed overall HPV prevalence to be 24.5% in group I, with 19.1% of patients having single infection and 5.4% double infection. The HPV prevalence in group II was 85.4%, with 79.2% of patients having single and 6.2% double infection. We identified 10 different HPV genotypes, most with high oncogenic potential. HPV 16 was the most prevalent genotype in the two studied groups, followed by HPV 58 and HPV 18. High-risk HPV genital infection, chronological age, ethnicity, early onset of sexual and reproductive activities, multiple sexual partners and smoking increased the risk for cervical cancer.

Prevalence of HPV infection by cervical cytologic status in Brazil.

OBJECTIVES: To assess the prevalence of human papillomavirus (HPV) infection according to cervical cytologic status in northeastern Brazil; identify other risk factors for low- and high-grade squamous intraepithelial lesions (LSILs and HSILs); and identify the most prevalent HPV genotypes associated with the lesions. METHOD: Two cervical smears were collected from 250 women referred for cancer screening, one for cytologic examination and the other to test for the presence of HPV by PCR with genotyping by dot blot hybridization. RESULT: There were 110 healthy cervices, 82 LSILs, and 58 HSILs. The overall HPV prevalence was 48%, with higher rates for HSILs, and HPV-16 was the most prevalent type. Age, multiple sexual partners, type of HPV present, smoking, and early onset of sexual activity were risk factors for cervical lesions. CONCLUSION: Age, multiple sexual partners, and infection with HPV-16 increased the risk of having LSILs or HSILs. Early onset of sexual activity and smoking only increased the risk of having HSILs.

Human papillomavirus infection in women attended at a cervical cancer screening service in Natal, Brazil / Infecção por papilomavírus humano em mulheres atendidas em um serviço de prevenção ao câncer do colo do útero em Natal, Brasil

We analyzed cervical specimens of 202 women, aged 15 to 64 years, attended at Luis Antonio Hospital, Natal, Brazil, to determine the prevalence of HPV and identify the more frequent genotypes and risk factors for HPV infection in women attended at a cervical cancer screening service. Two specimens were collected from each patient: one for cytological examination and the other to detect HPV DNA by PCR, and typing by dot blot hybridization. A total of 54.5 percent of the sample had normal cytology and 45.5 percent had cytological alterations. HPV was detected in 24.5 percent of the cytologically normal women and in 59.8 percent of those with altered cytology. Both single and double HPV infection increased the likelihood of cytological alterations. Thirteen types of HPV were identified, most of which were high risk. HPV 16 was the most prevalent single-type infection, followed by HPV 58. The most frequent double infection was the association between HPV 56 and 57. The prevalence of HPV in cytologically normal women was greater than that reported for countries on all the continents except Africa. The inverse was observed in women with cytological alterations. The distribution of HPV types was similar to that described for the Americas, with some differences. Multiple sexual partners was the only risk factor showing an association with the presence of HPV infection.

Foram analisados espécimes cervicais de 202 mulheres, com idade variando de 15 e 64 anos, atendidas no Hospital Luis Antonio, Natal-RN, objetivando determinar a prevalência do HPV, identificar genotipos do vírus e possíveis fatores de risco para a infecção por esse patógeno, em mulheres atendidas em um serviço de rastreamento do câncer do colo do útero. De cada paciente foram coletados dois espécimes: um destinado ao exame citológico e outro para detecção do HPV por PCR, com tipagem por hibridização "dot blot". Das pacientes incluídas no estudo, 54,5 por cento apresentaram citologia normal e 45,5 por cento tinham alterações citológicas. HPV foi detectado em 24,5 por cento das mulheres com citologia normal, e em 59,8 por cento das que apresentaram citologia alterada. Tanto a infecção por um único tipo de HPV, quanto a infecção simultânea por dois tipos diferentes do vírus aumentaram a chance de ocorrência de alterações citológicas. Foram identificados treze tipos de HPV, a maioria de alto risco. Nas infecções por um único tipo, o HPV 16 foi o mais prevalente, seguido do HPV 58. Na infecção dupla a associação mais freqüente foi entre HPV 56 e 57. A prevalência do HPV nas mulheres com citologia normal foi superior a relatada para países de todos os continentes, exceto África. Nas mulheres com alterações citológicas observou-se resultado inverso. A distribuição dos tipos de HPV foi semelhante à descrita para Américas, com algumas diferenças. Dos fatores de risco analisados, o relacionamento sexual com múltiplos parceiros foi o único que apresentou associação com a presença de infecção por HPV.

No association between SNP309 promoter polymorphism in the MDM2 and cervical cancer in a study from northeastern Brazil.

BACKGROUND: A functional variant in the MDM2 promoter (a T/G substitution, SNP309) was found to be associated with increased expression of MDM2 gene products and at significantly earlier age onset of tumors in both hereditary Li-Fraumeni individuals and sporadic cancer patients. We tested the hypothesis that this functional variant was associated with either risk or early age diagnosis of cervical cancer in a Brazilian population. METHODS: A primer-introduced restriction analysis PCR assay was used to genotype the MDM2 SNP309 of 72 cervical carcinoma patients and 100 healthy women. RESULTS: No statistically significant association was observed between SNP309 and cervical cancer. We did not find allele or genotype frequency differences between the group of patients with cancer diagnosis at an early age (younger than 40 years old) and the group of older patients. CONCLUSIONS: Our findings suggest that SNP309 MDM2 may not be a risk factor for cervical cancer.

Análise do polimorfismo de comprimento de fragmento de restrição para MspI no íntron 6 do TP53 em pacientes com câncer do colo do útero / Analysis of the TP53 intron 6 MspI restriction fragment length polymorphism in cervical carcinoma patients

Polimorfismos do gene da proteína supressora de tumor p53 (TP53) têm sido estudados como possíveis fatores de risco para o desenvolvimento de diferentes tipos de câncer. O objetivo deste estudo foi verificar se o polimorfismo de comprimento de fragmento de restrição para MspI no íntron 6 do TP53 (nucleotídeo 13494) poderia influenciar no desenvolvimento do câncer do colo do útero na população do Rio Grande do Norte. Os resultados obtidos sugerem que o alelo A1 do MspI (ausência do sítio de restrição)não está associado a uma maior susceptibilidade ao câncer do colo do útero na população estudada.

Estudo sorológico sobre rubéola em Natal-RN / Sorological study about rubella in Natal-RN

Pesquisou-se a presença de anticorpos para o vírus da rubéola, empregando-se a técnica imunoenzimática, revelada por meio de fluorescência (ELFA). Em um total de 3.410 pacientes, os percentuais médios de imunes e susceptíveis à rubéola foram 53,7% e 46,3%, respectivamente. Considerando-se apenas as mulheres em idade reprodutiva, das 2.267 analisadas, os percentuais médios de imunes e susceptíveis foram 74,5% e 25,5%, respectivamente. Diagnosticaram-se 1.116 casos sugestivos de infecção recente pelo vírus da rubéola, com aumento gradativo de casos no período entre julho de 1999 e maio de 2000, com um pico de incidência entre agosto e outubro de 2000. Os resultados revelam que uma parcela significativa das mulheres em idade reprodutiva, residentes na região metropolitana de Natal-RN, ainda se encontra susceptível à rubéola. Mostram, ainda, um aumento dos casos recentes de infecção pelo vírus da rubéola, entre setembro de 1999 e dezembro de 2000, sugerindo a ocorrência de um surto epidêmico da doença, nesse período.

The presence of specific antibodies for rubella virus, using an enzyme linked immunosorbent fluorescent assay (ELFA) was investigated. In a total of 3410 patients, the average of immune and susceptible individuals to rubella was 53.7% and 46.3%, respectively. Considering only the women in reproductive age, out of 2267 studied betwten 1999 and 2000, the averages of immunity and susceptibility were 74.5 and 25,5%, respectively. Suggestive cases of recent infection by rubella virus was 1116, with increases of the percentages values between July 1999 and May 2000 and an incidence peak from August to October 2000. The results reveal that, a significant portion of the women in reproductive age, living in the metropolitan area of Natal-RN, are susceptible to rubella. The results also show evidences of occurrence of a rubella epidemic outbreak in the city between September 1999 and December 2000.

Comparação de três protocolos de extração de DNA a partir de tecido fixado em formol e incluído em parafina / Comparison of three DNA extraction protocols from formaldehyde-fixed and paraffin-embedded tissues

OBJETIVO: Padronizar um método alternativo para extração de DNA a partir de tecido fixado em formol e conservado em arquivos de blocos de parafina, visando à realização de estudos retrospectivos. MÉTODOS: Comparou-se a eficiência de protocolos de extração de DNA a partir de tecido parafinado, para análise por reação em cadeia de polimerase (PCR), tomando-se como parâmetro um protocolo baseado em um kit comercial. Foram feitas extrações do DNA de 60 espécimes por três métodos: o protocolo A, baseado no kit GlassMAX; o B, utilizando-se o kit GFX TM; e o C, tendo como base o método de Banerjee et al.(2). A integridade e a suficiência do DNA presente na amostra foram avaliadas pela amplificação por PCR de um segmento de 110pb do gene da beta-globina humana, com visualização por meio de eletroforese em gel de poliacrilamida, corado pela prata. Resultados: Das 60 amostras analisadas, 45 apresentaram resultado positivo na PCR quando o DNA foi extraído por qualquer um dos três protocolos. Em seis amostras, a amplificação foi positiva apenas para o DNA extraído pelos protocolos A e C. Em três amostras, o resultado foi positivo apenas para o DNA extraído pelo protocolo A, e em duas, apenas para o DNA extraído pelo protocolo C. CONCLUSÕES: O protocolo C apresentou desempenho semelhante ao do protocolo A, com as vantagens de apresentar menor custo, dispensar o uso de kit comercial, além de não utilizar solventes orgânicos, revelando-se uma alternativa viável para a obtenção de DNA a partir de tecido fixado em formol e incluído em parafina.

Análise da resposta imune apresentada por crianças vacinadas contra o sarampo / Analisis of immune response presented by measles-vaccineted children

Foram analisadas amostras de soro de 360 crianças de ambos os sexos, na faixa etária de 1 a 10 anos, que haviam recebido de uma a três doses da vacina contra sarampo, selecionadas no período de julho de 1997 a dezembro de 1998, com a finalidade de analisar o estado imune e determinar a taxa de soroconversão em resposta à vacina. O método empregado foi o ensaio imunoenzimático (ELISA), técnica do "sandwich," empregando kit comercial. Do total de crianças pesquisadas, 324 apresentaram reação positiva, revelando a presença de anticorpos da classe IgG específicos para o vírus do sarampo em níveis protetores. Dos indivíduos que apresentaram reação positiva, 175 (54,0%) eram do sexo masculino e 149 (46,0%) do sexo feminino. Quando o estado imune das crianças foi analisado em função da idade e do número de doses da vacina recebidas, observou-se que as crianças com 1 ano de idade, após terem recebido a primeira dose, apresentaram taxa de soroconversão de 72,5%, atingindo em seguida valores médios de 89,8% e 90,1%, respectivamente após receberem a segunda e terceira doses da vacina. Os resultados revelam uma taxa média de soroconversão de 90,0% nas crianças que receberam duas ou três doses da vacina contra o sarampo. Mostram ainda um percen¬tual de aproximadamente 20,0% das crianças vacinadas aos 9 meses de idade, que não responderam adequadamente à primeira dose da vacina. Revelam também que cerca de 10,0% das crianças vacinadas ainda se mostraram susceptíveis ao sarampo, mesmo após terem recebido duas ou mais doses da vacina. Novos estudos são necessários para investigar os fatores que interferem na eficiência da vacina.

Serum samples of 360 children ranging from of 1 co 10 years old were analyzed. They received at least one dose of the measles vaccine. The children were selected in the period from July 1997 from December 1998, with the finality of analyze the immune conditions and determine the serumconversion taxes presented by those children in response to the vaccine. The utilized method was the enzime-linked immunosorbent assay (ELISA), “Sandwich” technique using commercial kits. Of this number of analyzed children, 324 presented positive reaction, showing the presence of antibodies of the IgG class specific against the measles virus in protective levels. Inside this group, 175 (54,0%) male and 149 (46,0%) was female. When the immune conditions of the examined children were analyzed in function of the age and the number of doses, children of 1 year old, after receiving the first dose of the vaccine, presented serumconversion taxes of 72,5%, reaching later overage values of 89,8% e 90,1%, respectively before receiving the second and third doses of the vaccine. These findings show a serumconversion taxe of 90,0% in children that received two or three dose of measles vaccine. They still shows that a percentage of approximately 20,0% of the vaccinated children with 9 months of age had no appropriate response to the first dose of the vaccine, maybe because the presence of maternal antibodies against measles. They still revels that 10,0% of the vaccinated children still remains susceptible to measles, even after receive two or more doses of the vaccine, suggesting the existence of other factors, besides the maternal antibodies, that decrease the efficacy of the vaccine. New studies are wanted to reveal those factors and its interaction with the vaccine.