Strains of Staphylococcus aureus isolated from Minas artisanal cheese from Araxá / Estirpes de Staphylococcus aureus isoladas de queijo Minas artesanal de Araxá

Thirty samples of a brand cheese commercialized in the municipality of Sacramento, MG, Brazil were analyzed for their biochemical and molecular traits to detect the phenotype and genotype of Staphylococcus aureus strains isolated from Minas artisanal cheese produced in the region of Araxá, MG, Brazil. All samples failed to comply with Law 14185 on the production process of Minas artisanal cheese, owing to high counts in coagulase-positive staphylococcus. Sixty-three colonies from 30 samples of Minas artisanal cheese were genotyped for molecular analysis. All colonies were biochemically detected as coagulase-positive staphylococcus, of which 56 (88.8%) were positive for S. aureus in molecular analyses. Results reveal the need for urgent measures by health authorities since the above mentioned cheese, produced from non-pasteurized milk, put at risk consumers health(AU)

Com o objetivo de conhecer as características fenotípicas e genotípicas das estirpes de Staphylococcus aureus isoladas de queijo Minas artesanal, produzido na região de Araxá MG, 30 amostras de uma determinada marca comercializada no município de Sacramento-MG foram analisadas bioquímica e molecularmente. Deste total, 100% estavam em desacordo com a Lei nº 14.185, que dispõe sobre o processo de produção de queijo Minas artesanal, devido à elevada contagem de estafilococos coagulase-positivos. Para a análise molecular, genotiparam-se 63 colônias oriundas das 30 amostras de queijo Minas artesanal. Todas as colônias foram caracterizadas bioquimicamente como estafilococos coagulase-positivos, e 56 (88,8%) colônias foram positivas para a espécie S. aureus nas análises moleculares. Os resultados obtidos indicam a necessidade de adoção de medidas por parte das autoridades sanitárias, uma vez que tais queijos, por serem produzidos com leite cru, não pasteurizado, colocam em risco a saúde dos consumidores(AU)

Strains of Staphylococcus aureus isolated from Minas artisanal cheese from Araxá / Estirpes de Staphylococcus aureus isoladas de queijo Minas artesanal de Araxá

Thirty samples of a brand cheese commercialized in the municipality of Sacramento, MG, Brazil were analyzed for their biochemical and molecular traits to detect the phenotype and genotype of Staphylococcus aureus strains isolated from Minas artisanal cheese produced in the region of Araxá, MG, Brazil. All samples failed to comply with Law 14185 on the production process of Minas artisanal cheese, owing to high counts in coagulase-positive staphylococcus. Sixty-three colonies from 30 samples of Minas artisanal cheese were genotyped for molecular analysis. All colonies were biochemically detected as coagulase-positive staphylococcus, of which 56 (88.8%) were positive for S. aureus in molecular analyses. Results reveal the need for urgent measures by health authorities since the above mentioned cheese, produced from non-pasteurized milk, put at risk consumers health

Com o objetivo de conhecer as características fenotípicas e genotípicas das estirpes de Staphylococcus aureus isoladas de queijo Minas artesanal, produzido na região de Araxá MG, 30 amostras de uma determinada marca comercializada no município de Sacramento-MG foram analisadas bioquímica e molecularmente. Deste total, 100% estavam em desacordo com a Lei nº 14.185, que dispõe sobre o processo de produção de queijo Minas artesanal, devido à elevada contagem de estafilococos coagulase-positivos. Para a análise molecular, genotiparam-se 63 colônias oriundas das 30 amostras de queijo Minas artesanal. Todas as colônias foram caracterizadas bioquimicamente como estafilococos coagulase-positivos, e 56 (88,8%) colônias foram positivas para a espécie S. aureus nas análises moleculares. Os resultados obtidos indicam a necessidade de adoção de medidas por parte das autoridades sanitárias, uma vez que tais queijos, por serem produzidos com leite cru, não pasteurizado, colocam em risco a saúde dos consumidores

SENSIBILIDADE DE BIOFILMES DE Staphylococcus aureus ORIUNDOS DE CASOS DE MASTITE E AMBIENTE DE ORDENHA / SENSITIVITY OF BIOFILMS OF Staphylococcus aureus FROM MASTITIS CASES AND MILKING ENVIRONMENT

A prevalência da mastite por Staphylococcus aureus em rebanhos leiteiros ocorre devido à sua alta infectividade associada a fatores de virulência que conferem ao micro-organismo a capacidade de se instalar no parênquima mamário. Objetivou-se avaliar o perfil de sensibilidade e resistência de estirpes de Staphylococcus aureus produtoras de biofilmes isoladas de casos de mastite bovina e ambiente de ordenha. Foram avaliadas 32 estirpes, sendo 28 isoladas de leite de vacas com mastite, duas isoladas de insufladores, uma isolada de mangueira condutora de leite e uma do leite do tanque de expansão. Após o isolamento e caracterização das estirpes como Staphylococcus aureus foram realizados testes para avaliar a capacidade de produção de biofilmes pelo teste de microplacas, e o perfil de sensibilidade e resistência de estirpes em modelo de adesão em biofilmes frente ao antimicrobiano cefalexina nas concentrações de 30mg/mL e 100mg/mL no tempo de 12 horas de contato das bactérias com o antimicrobiano. Os resultados revelaram que após a produção de biofilmes de 32 estirpes, 2 (6,25%) foram resistentes a cefalexina na concentração de 30mg e 8 (25,00%) for

SENSIBILIDADE DE BIOFILMES DE Staphylococcus aureus ORIUNDOS DE CASOS DE MASTITE E AMBIENTE DE ORDENHA / SENSITIVITY OF BIOFILMS OF Staphylococcus aureus FROM MASTITIS CASES AND MILKING ENVIRONMENT

A prevalência da mastite por Staphylococcus aureus em rebanhos leiteiros ocorre devido à sua alta infectividade associada a fatores de virulência que conferem ao micro-organismo a capacidade de se instalar no parênquima mamário. Objetivou-se avaliar o perfil de sensibilidade e resistência de estirpes de Staphylococcus aureus produtoras de biofilmes isoladas de casos de mastite bovina e ambiente de ordenha. Foram avaliadas 32 estirpes, sendo 28 isoladas de leite de vacas com mastite, duas isoladas de insufladores, uma isolada de mangueira condutora de leite e uma do leite do tanque de expansão. Após o isolamento e caracterização das estirpes como Staphylococcus aureus foram realizados testes para avaliar a capacidade de produção de biofilmes pelo teste de microplacas, e o perfil de sensibilidade e resistência de estirpes em modelo de adesão em biofilmes frente ao antimicrobiano cefalexina nas concentrações de 30mg/mL e 100mg/mL no tempo de 12 horas de contato das bactérias com o antimicrobiano. Os resultados revelaram que após a produção de biofilmes de 32 estirpes, 2 (6,25%) foram resistentes a cefalexina na concentração de 30mg e 8 (25,00%) for

Ação protetora residual, curativa e anti-esporulante de fungicidas no controle da requeima e da pinta preta da batata em condições controladas / Protective residual, curative and antiporulating action of fungicides in the control of early and late blight of potatoes under controlled conditions

A ação de fungicidas em diferentes fases do processo infeccioso da requeima (Phytophthora infestans) e da pinta preta (Alternaria solani) da batata foi estudada em condições de casa-de-vegetação e laboratório. A ação protetora e residual foi avaliada através de inoculações realizadas com os respectivos patógenos a 1, 3, 6, 9, 12 e 15 dias após a pulverização (DAP). Para avaliar a ação curativa, os fungicidas foram aplicados 1, 12, 24 e 48 horas após a inoculação (HAI) para requeima e 1, 24, 48 e 72 HAI para a pinta preta. As ações preventiva, residual e curativa foram avaliadas com base na porcentagem de área foliar afetada e a ação anti-esporulante através da contagem de esporângios e conídios. Todos os fungicidas promoveram elevada proteção contra a requeima e a pinta preta. Os fungicidas sistêmicos apresentaram redução de controle a partir dos 12 DAP, enquanto que os fungicidas translaminares e mesostêmicos a partir dos 9 DAP. Quanto à ação curativa e anti esporulante, destacaram-se principalmente os fungicidas sistêmicos aplicados até as 24 horas após a inoculação (HAI). Fungicidas translaminares e mesostêmicos foram capazes de inibir a requeima quando aplicados até 12 HAI. Os fungicidas de contato destacaram-se apenas para ação protetora.(AU)

The action of fungicides at different phases of the infectious process of late blight (Phytophthora infestans) and early blight (Alternaria solani) of potatoes was studied under greenhouse and laboratory conditions. Protective and residual action was evaluated through inoculations undertaken with the respective pathogens 1, 3, 6, 9, 12 and 15 days after application. To evaluate the curative action against late blight, fungicides were applied 1, 12, 24 and 48 hours after inoculation, and against early blight 1, 24, and 48 hours after inoculation. Protective, residual and curative actions were evaluated according to the percentage of the foliar area affected, while the antisporulating action was assessed through sporangia and conidia counting. All the fungicides, regardless of their mode of action, provided high protection against late and early blight. Systemic fungicides showed a reduction of control starting at 12 days after application, while translaminar and mesostemic fungicides showed this reduction starting at 9 days after application. In regard to curative and antisporulating actions, systemic fungicides applied until 24 hours after inoculation were especially outstanding. Translaminar and mesostemic fungicides could inhibit late blight when applied until 12 hours after inoculation. Contact fungicides stood out in preventive action only.(AU)

Ação protetora, residual, curativa e anti-esporulante de fungicidas no controle da requeima e da pinta preta da batata em condições controladas

The action of fungicides at different phases of the infectious process of late blight (Phy tophthora infestans) and early blight (Alternaria solani) of potatoes was studied under greenhouse and laboratory conditions. Protective and residual action was evaluated through inoculations undertaken with the respective pathogens 1, 3, 6, 9, 12 and 15 days after application. To evaluate the curative action against late blight, fungicides were applied 1, 12, 24 and 48 hours after inoculation, and against early blight 1, 24, and 48 hours after inoculation. Protective, residual and curative actions were evaluated according to the percentage of the foliar area affected, while the antisporulating action was assessed through sporangia and conidia counting. All the fungicides, regardless of their mode of action, provided high protection against late and early blight. Systemic fungicides showed a reduction of control starting at 12 days after application, while translaminar and mesostemic fungicides showed this reduction starting at 9 days after application. In regard to curative and antisporulating actions, systemic fungicides applied until 24 hours after inoculation were especially outstanding. Translaminar and mesostemic fungicides could inhibit late blight when applied until 12 hours after inoculation. Contact fungicides stood out in preventive action only.

A ação de fungicidas em diferentes fases do processo infeccioso da requeima (Phytophthora infestans) e da pinta preta (Alternaria solani) da batata foi estudada em condições de casa-de-vegetação e laboratório. A ação protetora e residual foi avaliada através de inoculações realizadas com os respectivos patógenos a 1, 3, 6, 9, 12 e 15 dias após a pulverização (DAP). Para avaliar a ação curativa, os fungicidas foram aplicados 1, 12, 24 e 48 horas após a inoculação (HAI) para requeima e 1, 24, 48 e 72 HAI para a pinta preta. As ações preventiva, residual e curativa foram avaliadas com base na porcentagem de área foliar afetada e a ação anti-esporulante através da contagem de esporângios e conídios. Todos os fungicidas promoveram elevada proteção contra a requeima e a pinta preta. Os fungicidas sistêmicos apresentaram redução de controle a partir dos 12 DAP, enquanto que os fungicidas translaminares e mesostêmicos a partir dos 9 DAP. Quanto à ação curativa e anti esporulante, destacaram-se principalmente os fungicidas sistêmicos aplicados até as 24 horas após a inoculação (HAI). Fungicidas translaminares e mesostêmicos foram capazes de inibir a requeima quando aplicados até 12 HAI. Os fungicidas de contato destacaram-se apenas para ação protetora.

Ação protetora residual, curativa e anti-esporulante de fungicidas no controle da requeima e da pinta preta da batata em condições controladas / Protective residual, curative and antiporulating action of fungicides in the control of early and late blight of potatoes under controlled conditions

A ação de fungicidas em diferentes fases do processo infeccioso da requeima (Phytophthora infestans) e da pinta preta (Alternaria solani) da batata foi estudada em condições de casa-de-vegetação e laboratório. A ação protetora e residual foi avaliada através de inoculações realizadas com os respectivos patógenos a 1, 3, 6, 9, 12 e 15 dias após a pulverização (DAP). Para avaliar a ação curativa, os fungicidas foram aplicados 1, 12, 24 e 48 horas após a inoculação (HAI) para requeima e 1, 24, 48 e 72 HAI para a pinta preta. As ações preventiva, residual e curativa foram avaliadas com base na porcentagem de área foliar afetada e a ação anti-esporulante através da contagem de esporângios e conídios. Todos os fungicidas promoveram elevada proteção contra a requeima e a pinta preta. Os fungicidas sistêmicos apresentaram redução de controle a partir dos 12 DAP, enquanto que os fungicidas translaminares e mesostêmicos a partir dos 9 DAP. Quanto à ação curativa e anti esporulante, destacaram-se principalmente os fungicidas sistêmicos aplicados até as 24 horas após a inoculação (HAI). Fungicidas translaminares e mesostêmicos foram capazes de inibir a requeima quando aplicados até 12 HAI. Os fungicidas de contato destacaram-se apenas para ação protetora.

The action of fungicides at different phases of the infectious process of late blight (Phytophthora infestans) and early blight (Alternaria solani) of potatoes was studied under greenhouse and laboratory conditions. Protective and residual action was evaluated through inoculations undertaken with the respective pathogens 1, 3, 6, 9, 12 and 15 days after application. To evaluate the curative action against late blight, fungicides were applied 1, 12, 24 and 48 hours after inoculation, and against early blight 1, 24, and 48 hours after inoculation. Protective, residual and curative actions were evaluated according to the percentage of the foliar area affected, while the antisporulating action was assessed through sporangia and conidia counting. All the fungicides, regardless of their mode of action, provided high protection against late and early blight. Systemic fungicides showed a reduction of control starting at 12 days after application, while translaminar and mesostemic fungicides showed this reduction starting at 9 days after application. In regard to curative and antisporulating actions, systemic fungicides applied until 24 hours after inoculation were especially outstanding. Translaminar and mesostemic fungicides could inhibit late blight when applied until 12 hours after inoculation. Contact fungicides stood out in preventive action only.

Ação protetora, residual, curativa e anti-esporulante de fungicidas no controle da requeima e da pinta preta da batata em condições controladas

The action of fungicides at different phases of the infectious process of late blight (Phy tophthora infestans) and early blight (Alternaria solani) of potatoes was studied under greenhouse and laboratory conditions. Protective and residual action was evaluated through inoculations undertaken with the respective pathogens 1, 3, 6, 9, 12 and 15 days after application. To evaluate the curative action against late blight, fungicides were applied 1, 12, 24 and 48 hours after inoculation, and against early blight 1, 24, and 48 hours after inoculation. Protective, residual and curative actions were evaluated according to the percentage of the foliar area affected, while the antisporulating action was assessed through sporangia and conidia counting. All the fungicides, regardless of their mode of action, provided high protection against late and early blight. Systemic fungicides showed a reduction of control starting at 12 days after application, while translaminar and mesostemic fungicides showed this reduction starting at 9 days after application. In regard to curative and antisporulating actions, systemic fungicides applied until 24 hours after inoculation were especially outstanding. Translaminar and mesostemic fungicides could inhibit late blight when applied until 12 hours after inoculation. Contact fungicides stood out in preventive action only.

A ação de fungicidas em diferentes fases do processo infeccioso da requeima (Phytophthora infestans) e da pinta preta (Alternaria solani) da batata foi estudada em condições de casa-de-vegetação e laboratório. A ação protetora e residual foi avaliada através de inoculações realizadas com os respectivos patógenos a 1, 3, 6, 9, 12 e 15 dias após a pulverização (DAP). Para avaliar a ação curativa, os fungicidas foram aplicados 1, 12, 24 e 48 horas após a inoculação (HAI) para requeima e 1, 24, 48 e 72 HAI para a pinta preta. As ações preventiva, residual e curativa foram avaliadas com base na porcentagem de área foliar afetada e a ação anti-esporulante através da contagem de esporângios e conídios. Todos os fungicidas promoveram elevada proteção contra a requeima e a pinta preta. Os fungicidas sistêmicos apresentaram redução de controle a partir dos 12 DAP, enquanto que os fungicidas translaminares e mesostêmicos a partir dos 9 DAP. Quanto à ação curativa e anti esporulante, destacaram-se principalmente os fungicidas sistêmicos aplicados até as 24 horas após a inoculação (HAI). Fungicidas translaminares e mesostêmicos foram capazes de inibir a requeima quando aplicados até 12 HAI. Os fungicidas de contato destacaram-se apenas para ação protetora.

Estudo epidemiológico das Aeromonas spp, através de REP e ERIC-PCR, em abatedouro bovino / Epidemiological study of Aeromonas spp using REP and ERIC-PCR in bovine abattoir

O gênero Aeromonas compreende espécies consideradas importantes patógenos para os seres humanos, sendo que a principal ação patogênica delas corresponde às gastroenterites. Tendo em vista sua importância como patógeno de origem alimentar, a ocorrência de Aeromonas spp. foi estudada em carcaças bovinas e ambiente do abatedouro em uma indústria do Estado de São Paulo, com o intuito de definir a possível origem comum dessas bactérias no ambiente do frigorífico através de métodos moleculares. Foram colhidas 15 amostras de 19 pontos, totalizando 285 unidades. As amostras foram colhidas dos seguintes pontos: pele seca e úmida, superfície muscular das carcaças durante a toalete e das carcaças resfriadas, mãos dos funcionários antes e durante o trabalho na sala de abate e câmara de resfriamento, facas, parede e piso da câmara de resfriamento, água (clorada, não clorada e residuária da lavagem das carcaças), carne, conteúdo intestinal e ambiente da sala de abate. Foi realizada a caracterização do gênero e os isolados foram analisados pelas técnicas de REP (Repetitive Extragenic Palindromic) e ERIC (Enterobacterial Repetitive Intergenic Consensus)-PCR. Foi encontrada similaridade ? 99% somente entre um isolado de superfície muscular de uma carcaça resfriada com um isolado de mão. As técnicas moleculares não possibilitaram a identificação precisa da origem das bactérias na indústria, mas possibilitaram inferir que os manipuladores podem atuar como disseminadores delas no ambiente de abate.

The genus Aeromonas comprises important human pathogens and the gastroenteritises are the most common infections attributed to these microorganisms. Considering their importance as foodborne pathogens, the occurrence of Aeromonas spp. was studied on bovine carcasses and in the environment of an abattoir in State of São Paulo, Brazil, with the aim of defining the possible origin of these bacteria in the abattoir environment using molecular methods. Fifteen samples from 19 points were collected, totaling 285 units. The collecting points were: dry and wet skin, muscle surface of the carcasses during trimming process and refrigerated carcasses, operatives' hands from the slaughter room before and during the work and from refrigerated rooms, knives, wall and floor from refrigerated room, water (chlorinated, nonchlorinated and from carcass washing), meat, intestinal content and slaughter room environment. Characterization of the genus was performed and the isolates were analyzed with REP (Repetitive Extragenic Palindromic) and ERIC-PCR (Enterobacterial Repetitive Intergenic Consensus PCR) techniques. A similarity of ? 99% was found only between one isolate from the muscle surface of one refrigerated carcass with one isolate from a hand. The molecular techniques did not enable the precise identification of the bacteria's origin within the industry, but they permitted the inference that the operatives can spread Aeromonas in the slaughter environment.

ESTUDO EPIDEMIOLÓGICO DAS AEROMONAS SPP., ATRAVÉS DE REP E ERIC-PCR, EM ABATEDOURO BOVINO

ABSTRACT The genus Aeromonas comprises important human pathogens and the gastroenteritises are the most common infections attributed to these microorganisms. Considering their importance as foodborne pathogens, the occurrence of Aeromonas spp. was studied on bovine carcasses and in the environment of an abattoir in State of São Paulo, Brazil, with the aim of defining the possible origin of these bacteria in the abattoir environment using molecular methods. Fifteen samples from 19 points were collected, totaling 285 units. The collecting points were: dry and wet skin, muscle surface of the carcasses during trimming process and refrigerated carcasses, operatives hands from the slaughter room before and during the work and from refrigerated rooms, knives, wall and floor from refrigerated room, water (chlorinated, nonchlorinated and from carcass washing), meat, intestinal content and slaughter room environment. Characterization of the genus was performed and the isolates were analyzed with REP (Repetitive Extragenic Palindromic) and ERIC-PCR (Enterobacterial Repetitive Intergenic Consensus PCR) techniques. A similarity of ? 99% was found only between one isolate from the muscle surface of one refrigerated carcass with one isolate from a hand. The molecular techniques did not enable the precise identification of the bacterias origin within the industry, but they permitted the inference that the operatives can spread Aeromonas in the slaughter environment.

RESUMO O gênero Aeromonas compreende espécies consideradas importantes patógenos para os seres humanos, sendo que a principal ação patogênica delas corresponde às gastroenterites. Tendo em vista sua importância como patógeno de origem alimentar, a ocorrência de Aeromonas spp. foi estudada em carcaças bovinas e ambiente do abatedouro em uma indústria do Estado de São Paulo, com o intuito de definir a possível origem comum dessas bactérias no ambiente do frigorífico através de métodos moleculares. Foram colhidas 15 amostras de 19 pontos, totalizando 285 unidades. As amostras foram colhidas dos seguintes pontos: pele seca e úmida, superfície muscular das carcaças durante a toalete e das carcaças resfriadas, mãos dos funcionários antes e durante o trabalho na sala de abate e câmara de resfriamento, facas, parede e piso da câmara de resfriamento, água (clorada, não clorada e residuária da lavagem das carcaças), carne, conteúdo intestinal e ambiente da sala de abate. Foi realizada a caracterização do gênero e os isolados foram analisados pelas técnicas de REP (Repetitive Extragenic Palindromic) e ERIC (Enterobacterial Repetitive Intergenic Consensus)-PCR. Foi encontrada similaridade ? 99% somente entre um isolado de superfície muscular de uma carcaça resfriada com um isolado de mão. As técnicas moleculares não possibilitaram a identificação precisa da origem das bactérias na indústria, mas possibilitaram inferir que os manipuladores podem atuar como disseminadores delas no ambiente de abate.

EXPERIMENTAL SUBCLINICAL MASTITIS IN HOLSTEIN COWS BY INTRAMAMMARY INOCULATION OF Staphylococcus aureus (STRAIN ATCC 25923). / INDUÇÃO EXPERIMENTAL DE MASTITE SUBCLÍNICA EM VACAS DA RAÇA HOLANDESA MEDIANTE INOCULAÇÃO INTRAMAMÁRIA DE Staphylococcus aureus (ESTIRPE ATCC 25923).

Staphylococcus aureus is the major bacteria involved in cow intramammary infections and it represents an important concern to public health and to the milk production over the world. S. aureus is the most prevalent organism isolated in milk samples from infected mammary glands, in Brazil. The goal of this study was to verify the viability of the experimental model of bovine subclinical mastitis induced by S. aureus inoculation and to evaluate the clinical and laboratory results related to the infection. It were examinated 40 mammary quarters from 12 health Holstein cows, submitted to two procedures: Group 1: ten not inoculated mammary quarters; and Group 2: thirty mammary quarters inoculated with 500 CFU of S. aureus (strain ATCC 25923). This method induced subclinical mastitis in 63.3% of the inoculated mammary quarters. Total cell count was significantly higher in milk samples from group 2 obtained 72 hours after bacteria inoculation (2,432.20 x 103 cells/mL), showing tissue inflammatory response, in comparison with not inoculated quarters. Milk total protein concentrations were not influenced by inflammatory response induced by S. aureus and the values ranging from 4.26±0.61 to 4.38±0.40 g/dL, in group 1, and from 4.28±0.43 to 4.47±1.00 g/dL, in group 2. KEY-WORDS: Subclinical mastitis. Cows. Staphylococcus aureus. Experimental infection.