ABSTRACT
An excreted iron superoxide dismutase of pI 3.75 and a molecular mass of approximately 25 kDa was partially purified by QAE Sephadex ion-exchange chromatography from the in vitro culture of Leishmania (Leishmania) infantum. This enzyme was detected by enzyme-linked immunosorbent assay and Western blot of anti-L. infantum antibodies in dog serum. For the determination of the sensitivity and specificity of this protein, the results using the complete-parasite antigen fraction were taken as references. For this, 39 sera were assayed in dogs from different Spanish provinces. By Western blot, at a dilution of 1:250, 82% of the sera were positive when superoxide dismutase excreted was used as the antigen, against 56.4% positivity when the complete parasite was used as the antigen. These findings support the results of a previous study, indicating that the superoxide dismutase excreted can be useful in diagnosing L. (L.) infantum.
Subject(s)
Antibodies, Protozoan/blood , Antigens, Protozoan , Dog Diseases/diagnosis , Leishmania infantum/immunology , Leishmaniasis, Visceral/veterinary , Superoxide Dismutase , Animals , Antigens, Protozoan/immunology , Antigens, Protozoan/metabolism , Blotting, Western , Dogs , Enzyme-Linked Immunosorbent Assay , Female , Leishmania infantum/enzymology , Leishmaniasis, Visceral/diagnosis , Leishmaniasis, Visceral/parasitology , Mice , Mice, Inbred BALB C , Superoxide Dismutase/immunology , Superoxide Dismutase/isolation & purification , Superoxide Dismutase/metabolismABSTRACT
Se elaboró extractos de antígenos solubles de Lishmania (leishmanina) a partir de formas promastigotes de Leishmania (Viannia) peruviana y Leishmania (Viannia) braziliensis. Los antígenos fueron evaluados respecto a su sensibilidad, especificidad y efectos colaterales. Los ensayos se llevaron a cabo en una área de transmisión de la "uta" (leishmaniasis andina), en un área de transmisión de la "espundia" (leishmaniasis selvática), y en pacientes atendidos en Lima. El antígeno de Leishmania (Viannia) peruviana, 25 ug/ml, resultó adecuado para la detección de la reacción de hipersensibilidad cutánea tardía en pacientes con lesiones cutáneas y/o cutáneo-mucosas activas, encontrando una sensibilidad promedio de 95,9. La misma sensibilidad, pero con reacciones más intensas (potentes) fue observada con el antígeno homólogo de 30 ug/ml. Los antígenos de Leishmania (Viannia) braziliensis de 25 y 30 ug/ml mostraron similar sensibilidad y potencia a las dosis equivalentes de Leishmania (Viannia) peruviana. La sensibilidad y la potencia de la reacción se incrementaron mínimamente con el incremento en la concentración de proteínas. No se observaron efectos colaterales como vesiculación y ulceración en el sitio de inoculación. Los antígenos demostraron ser altamente específicos. La especificidad en el grupo control alcanzó el 100,0, mientras que en el grupo control endémico fue 95,7