Campylobacter hepaticus in the Production Environment and Stagnant Water as a Potential Source of C. hepaticus Causing Spotty Liver Disease in Free-Range Laying Hens in Georgia, United States.

Spotty liver disease (SLD) has emerged as an important cause of disease in egg-producing flocks in countries such as the United Kingdom and Australia and has emerged in the United States. The organisms implicated in SLD include Campylobacter hepaticus and, more recently, Campylobacter bilis. These organisms have been found to cause focal lesions on the livers of infected birds. Campylobacter hepaticus infection results in reduced egg production, decreased feed consumption resulting in reduced egg size, and increased mortality of highly valuable hens. In the fall of 2021, birds from two flocks (A and B) of organic pasture-raised laying hens were submitted to the Poultry Diagnostic Research Center at the University of Georgia with a history suspicious of SLD. Postmortem examination of Flock A found 5/6 hens had small multifocal lesions on the liver and were PCR positive for C. hepaticus from pooled swab analysis of samples of the liver and gall bladder. Necropsy of Flock B found 6/7 submitted birds had spotty liver lesions. In pooled bile swabs, 2/7 hens from Flock B were also PCR positive for C. hepaticus. A follow-up visit to Flock A was scheduled 5 days later, as well as a visit to a flock where SLD has not been reported (Flock C), which was used as a comparative control. Samples of the liver, spleen, cecal tonsil, ceca, blood, and gall bladder were collected from six hens per house. Additionally, feed, water nipples, and environmental water (stagnant water outside the house) were collected from the affected farm and the control farm. To detect the organism, all samples collected were subjected to direct plating on blood agar and enrichment in Preston broth with incubation under microaerophilic conditions. After multiple phases of bacterial culture purification from all samples, single bacterial cultures displaying characteristics of C. hepaticus were tested by PCR to confirm identity. From Flock A, liver, ceca, cecal tonsils, gall bladder, and environmental water were PCR positive for C. hepaticus. No positive samples were detected in Flock C. After another follow-up visit, 10 wk later, Flock A was PCR positive for C. hepaticus from gall bladder bile and feces and one environmental water sample displayed a weak positive reaction for C. hepaticus. Flock C was PCR negative for C. hepaticus. To gain more knowledge about C. hepaticus prevalence, a survey of 6 layer hens from 12 different layer hen flocks between the ages of 7 to 80 wk, raised in different housing systems, were tested for C. hepaticus. The 12 layer hen flocks were culture and PCR negative for C. hepaticus. Currently, there are no approved treatments for C. hepaticus and no vaccine is available. The results of this study suggest that C. hepaticus may be endemic in some areas of the United States, and free-range laying hens may be exposed from the environment/stagnant water in areas where they range.

Campylobacter hepaticus en el ambiente de producción avícola y en el agua estancada como fuente potencial de C. hepaticus que causante de la necrosis hepática focal en gallinas ponedoras de corral en Georgia, Estados Unidos. La necrosis hepática focal (SLD, por sus siglas en inglés) se ha convertido en una causa importante de enfermedad en las parvadas productoras de huevo en países como el Reino Unido y Australia y también ha surgido en los Estados Unidos. Los organismos implicados en necrosis hepática focal incluyen Campylobacter hepaticus y, más recientemente, Campylobacter bilis. Se ha encontrado que estos organismos causan lesiones focales en el hígado de las aves infectadas. La infección por C. hepaticus da como resultado una reducción en la producción de huevos, una disminución en el consumo de alimento, lo que resulta en una reducción del tamaño de los huevos y una mayor mortalidad de gallinas de alto valor económico. En el otoño del 2021, aves de dos lotes (A y B) de gallinas de postura criadas en pastos orgánicos se enviaron al Centro de Diagnóstico e Investigación Avícolas de la Universidad de Georgia con antecedentes sospechosos de necrosis hepática focal. En el examen post mortem de la parvada A se encontró que cinco de un total de seis gallinas tenían pequeñas lesiones multifocales en el hígado y fueron positivas mediante PCR para C. hepaticus a partir de un análisis de hisopos combinados de muestras del hígado y de la vesícula biliar. La necropsia de la parvada B encontró que seis de un total de siete aves enviadas tenían lesiones hepáticas irregulares. En muestras agrupadas de bilis, dos de un total de siete gallinas de la parvada B también fueron positivas a C. hepaticus por PCR. Se programó una visita de seguimiento a la Parvada A cinco días después, así como una visita a una parvada en la que no se había reportado la presencia de necrosis hepática focal (Parvada C), que se utilizó como control para propósitos de comparación. Se recolectaron muestras de hígado, bazo, tonsilas cecales, sacos ciegos, sangre y vesícula biliar de seis gallinas por gallinero. Además, se recolectó alimento, muestras de agua de bebederos de niple y agua ambiental (agua estancada fuera de la casa) de la granja afectada y la granja de control. Para detectar el organismo, todas las muestras recolectadas se sometieron a siembra directa en agar sangre y enriquecimiento en caldo Preston con incubación en condiciones microaerófilas. Después de varias fases de purificación del cultivo bacteriano de todas las muestras, se analizaron mediante PCR los cultivos bacterianos individuales que mostraban características de C. hepaticus para confirmar la identidad. De la parvada A, el hígado, el ciego, las tonsilas cecales, la vesícula biliar y el agua ambiental dieron positivo por PCR para C. hepaticus. No se detectaron muestras positivas en la parvada C. Después una segunda visita de seguimiento, 10 semanas después, la parvada A mostró resultado positivo por PCR para C. hepaticus en la bilis de la vesícula biliar y en las heces, y una muestra de agua ambiental mostró una reacción positiva débil para C. hepaticus . La parvada C resultó negativa mediante PCR para C. hepaticus. Para obtener más conocimiento sobre la prevalencia de C. hepaticus, se realizó un muestreo incluyendo seis gallinas de postura de 12 lotes diferentes de gallinas ponedoras entre las edades de 7 a 80 semanas, criadas en diferentes sistemas de alojamiento, para detectar C. hepaticus. Las doce parvadas de gallinas de postura fueron negativas por cultivo y mediante PCR para C. hepaticus. Actualmente, no hay tratamientos aprobados para C. hepaticus y no hay vacuna disponible. Los resultados de este estudio sugieren que C. hepaticus puede ser endémico en algunas áreas de los Estados Unidos, y las gallinas de postura bajo pastoreo pueden estar expuestas al medio ambiente o al agua estancada en las áreas donde están alojadas.

Erysipelothrix rhusiopathiae Infection Associated with Swollen Head Syndrome in a Broiler Breeder Flock in North Georgia.

An unusual case of swollen head syndrome in a 55-wk-old broiler breeder flock was identified in north Georgia in the summer of 2019. The presenting complaint was elevated mortality and visibly swollen heads. Necropsy of affected birds on the farm primarily revealed signs of bacterial septicemia, with few large scab lesions near the vent area. Bacterial culture analysis identified multiple organisms, but the primary organism of interest was identified as Erysipelothrix rhusiopathiae, cultured from affected liver, lung, sinuses, and one swollen wattle of birds in the affected house. Histopathologic analysis identified gram-positive rod-shaped bacteria in the spleen and liver (consistent with bacterial septicemia) confirmed with special staining (Brown & Hopps Gram stain). These organisms were noted to be consistent with E. rhusiopathiae; E. rhusiopathiae infection in broiler breeder chickens is a rare occurrence and is primarily associated with turkeys and/or swine production systems.

Reporte de caso- Infección por Erysipelothrix rhusiopathiae asociada con el síndrome de cabeza hinchada en un pollo de engorde. En el verano del 2019, se identificó un caso inusual de síndrome de cabeza hinchada en una parvada de reproductoras de pollos de engorde de 55 semanas de edad en el norte de Georgia. Las observaciones iniciales incluyeron mortalidad elevada y cabezas visiblemente inflamadas. La necropsia de las aves afectadas en la granja reveló principalmente signos de septicemia bacteriana, con pocas lesiones costrosas grandes cerca del área de extractores de la ventilación. El análisis de cultivos bacterianos identificó múltiples organismos, pero el principal organismo de interés fue identificado como Erysipelothrix rhusiopathiae, cultivado a partir de hígado, pulmón, senos paranasales y de una barbilla inflamada de aves en la caseta afectada. El análisis histopatológico identificó bacterias grampositivas en forma de bastón en el bazo y el hígado (compatibles con septicemia bacteriana) confirmadas con tinción especial (tinción de Gram de Brown y Hopps). Se observó que estos organismos eran compatibles con E. rhusiopathiae; La infección por E. rhusiopathiae en pollos de engorde se presenta de forma esporádica y se asocia principalmente con sistemas de producción de pavos y/o cerdos.

Complete Genome Sequence of Campylobacter hepaticus RBCL71delta, Associated with Spotty Liver Disease in Organic Pasture-Raised Laying Hens in Georgia, USA.

Spotty liver disease (SLD) is as an important cause of disease in egg-producing flocks. The organisms implicated include Campylobacter hepaticus and Campylobacter bilis. Here, we report the complete genome sequence of C. hepaticus strain RBCL71delta and three additional strains, isolated from a layer flock in Georgia, USA.

Hemorrhagic Hepatopathy in Broiler Breeder Pullets: Gross and Microscopic Pathology and Factors Associated with Incidence.

Hemorrhagic hepatopathy is a syndrome reported in layer pullets resulting in mortality and lesions including hepatic, splenic, and intestinal necrosis; hepatic and splenic enlargement; hemorrhages; amyloidosis of the muscle, spleen, and liver; accumulation of noncoagulated hemorrhagic fluid in the coelom; and frequently, granulomatous myositis at bacterin injection sites. The syndrome is characterized in the literature in table egg layer pullets and is thought to be associated with the administration of bacterin vaccines, namely, frequently Salmonella enterica subsp. enterica bacterins. Hemorrhagic hepatopathy is recognized by industry veterinarians as also occurring infrequently in broiler breeder pullets in the United States. As the condition is likely due to an inflammatory process in response to bacterial lipopolysaccharide inoculation, it is important to characterize both the pathologic changes and predisposing factors for the condition in broiler breeds, which are immunologically different from table egg layer breeds. In this study, we characterize the gross and microscopic lesions observed in a series of diagnostic laboratory cases of hemorrhagic hepatopathy in broiler breeder pullets and suggest a possible pathophysiology for the condition. Additionally, we report results from a case survey of the United States broiler industry that suggest that the condition is due to a reaction to bacterin vaccination and that certain bacterin products may predispose pullet flocks to develop the condition. Although further research is indicated, these findings establish hemorrhagic hepatopathy as a pathologic condition of broiler breeder pullets and may aid in the diagnosis and prevention of the syndrome.

Artículo regular­La hepatopatía hemorrágica en pollitas reproductoras pesadas: Patología macroscópica y microscópica y factores asociados con la incidencia La hepatopatía hemorrágica es un síndrome reportado en pollitas ponedoras que resulta en mortalidad y lesiones, incluyendo necrosis hepática, esplénica e intestinal; agrandamiento hepático y esplénico; hemorragias; amiloidosis del músculo, bazo e hígado; acumulación de líquido hemorrágico no coagulado en la cavidad celómica; y con frecuencia, miositis granulomatosa en los lugares de inyección de bacterina. El síndrome se ha caracterizado en la bibliografía en pollitas ponedoras de huevo comercial y se cree que está asociado con la administración de vacunas de bacterianas, con frecuencia bacterinas de Salmonella. Los veterinarios de la industria reconocen que la hepatopatía hemorrágica también ocurre con poca frecuencia en pollitas de reproductoras pesadas en los Estados Unidos. Como es probable que esta condición se deba a un proceso inflamatorio en respuesta a la inoculación de lipopolisacáridos bacterianos, es importante caracterizar tanto los cambios patológicos como los factores predisponentes para la afección en las líneas de pollos de engorde, que son inmunológicamente diferentes de las líneas ponedoras de huevo comercial. En este estudio, se caracterizaron las lesiones macroscópicas y microscópicas observadas en una serie de casos de laboratorio de diagnóstico de hepatopatía hemorrágica en pollitas reproductoras de pollos de engorde y sugerimos una posible fisiopatología de esta condición. Además, se reportan los resultados de una encuesta de casos de la industria de pollos de engorde en los Estados Unidos que sugiere que la condición se debe a una reacción a la vacunación con bacterinas y que ciertos productos de las bacterinas pueden predisponer a las parvadas de pollitas a desarrollar la afección. Aunque se requieren más investigaciones, estos hallazgos establecen la hepatopatía hemorrágica como una condición patológica de las pollitas reproductoras pesadas y pueden ayudar en el diagnóstico y a la prevención del síndrome.

Molecular Detection of Salmonella enterica subsp. arizonae by Quantitative PCR.

Salmonella enterica subspecies arizonae (subspecies IIIa) is most frequently associated with reptiles but is also a bacterial pathogen of poultry, primarily of young turkeys where it induces septicemia, neurologic signs, and increased mortality. Arizonosis clinical cases in broiler chickens have recently been documented in the United States, driving the development of a rapid, molecular-based diagnostic for this subspecies. S. enterica subsp. arizonae is a genetically distinct subgroup of S. enterica, primarily diagnosed through culture followed by serotyping or biochemical identification, which are costly in both time and laboratory resources. Real-time/quantitative PCR offers rapid and sensitive detection of Salmonella sp. in laboratory and diagnostic samples; however, no such methodology exists to differentiate S. enterica subsp. arizonae from other Salmonella sp. In this study, we designed a quantitative PCR assay for S. enterica subsp. arizonae. The assay is able to differentiate S. enterica subsp. arizonae from other S. enterica subspecies, including S. enterica subsp. diarizonae (IIIb), and other non-Salmonella bacteria. Validation, including 56 different S. enterica subsp. arizonae serovars, demonstrated 100% sensitivity and 100% specificity. This assay provides a rapid diagnostic option for suspected cases of arizonosis in poultry.