Unveiling Novel Kunitz- and Waprin-Type Toxins in the Micrurus mipartitus Coral Snake Venom Gland: An In Silico Transcriptome Analysis.

Kunitz-type peptide expression has been described in the venom of snakes of the Viperidae, Elapidae and Colubridae families. This work aimed to identify these peptides in the venom gland transcriptome of the coral snake Micrurus mipartitus. Transcriptomic analysis revealed a high diversity of venom-associated Kunitz serine protease inhibitor proteins (KSPIs). A total of eight copies of KSPIs were predicted and grouped into four distinctive types, including short KSPI, long KSPI, Kunitz-Waprin (Ku-WAP) proteins, and a multi-domain Kunitz-type protein. From these, one short KSPI showed high identity with Micrurus tener and Austrelaps superbus. The long KSPI group exhibited similarity within the Micrurus genus and showed homology with various elapid snakes and even with the colubrid Pantherophis guttatus. A third group suggested the presence of Kunitz domains in addition to a whey-acidic-protein-type four-disulfide core domain. Finally, the fourth group corresponded to a transcript copy with a putative 511 amino acid protein, formerly annotated as KSPI, which UniProt classified as SPINT1. In conclusion, this study showed the diversity of Kunitz-type proteins expressed in the venom gland transcriptome of M. mipartitus.

Effect of Agraz (Vaccinium meridionale Swartz) on High-Density Lipoprotein Function and Inflammation in Women with Metabolic Syndrome.

Metabolic syndrome (MetS) is associated with low-grade inflammation and high-density lipoprotein (HDL) dysfunction. Polyphenol-rich foods may improve these alterations. Agraz is a fruit rich in polyphenols (mainly anthocyanins); however, there is limited information about its effects on human health. We evaluated the effects of agraz consumption as compared to placebo on HDL function and inflammation in women with MetS. Forty volunteers (25⁻60 years) were included in this double-blind crossover study. Women consumed agraz or placebo over 4 weeks; separated by a 4-week washout period. HDL function (apoliprotein-A1; paraoxonase 1 (PON1) activity; cholesterol efflux capacity), oxidative stress (myeloperoxidase (MPO), advanced oxidation protein products) and inflammatory markers (serum cytokines/chemokines and peripheral blood mononuclear cell nuclear factor-kB) were measured after each period. Compared to placebo, agraz consumption did not significantly change any of the biomarkers measured. Interestingly, only after agraz period there were significant positive correlations between PON1 activities and cholesterol efflux. Additionally, there were significant inverse correlations between changes in inflammatory markers and HDL function markers and positive correlations with oxidative markers. Although polyphenol-rich foods have been shown to be beneficial for certain conditions; polyphenol-rich agraz fruit consumption did not impact inflammation and HDL function in the current study of women with MetS.

Acute oral toxicity from a fraction rich in phenolic compounds from the leaf extract of Swietenia macrophylla king in a murine model / Determinación de la toxicidad aguda oral de una fracción rica en compuestos fenólicos del extracto de hojas Swietenia macrophylla king en un modelo murino

Background: The mahogany tree (Swietenia macrophylla King) is widely used in traditional medicine, especially its seeds, which are used in Malaysia, Indonesia and some countries of South America. Recently an active fraction of the leaf ethanolic extract (labelled "Sm13-16,23"), showed promising results against some toxins of South American pit vipers. Objectives: In this study the aim was to evaluate the acute oral toxicity of fraction Sm13-16,23 from the leaf ethanolic extract, using Swiss Webster mice. Methods: Fraction Sm13-16,23 was administered orally in a single dose to 2000 mg/kg and 300 mg/kg, clinical follow-up for 14 days was performed and then euthanasia, necropsy and histopathology of organs were performed. Results: Overall, there were not deaths recorded during the study period. Further not signs of toxicity in doses of 300mg/kg were observed, but at doses of 2000 mg/kg, histopathological lesions in the liver, as karyomegaly and binucleation were observed. Conclusions: Fraction Sm13-16, 23 does not produce toxicity lesion at doses of 300mg/kg, indicating that the acute oral toxicity risk is low.

Antecedentes: El árbol de la caoba (Swietenia macrophylla King) es utilizado ampliamente en la medicina tradicional, especialmente sus semillas, que son usadas en Malasia, Indonesia y algunos países de Suramérica. Recientemente una fracción activa del extracto etanólico de las hojas (llamada "Sm13-16,23"), demostró resultados promisorios frente algunas toxinas de las víboras suramericanas. Objetivos: En este estudio se evaluó la toxicidad aguda oral de la fracción Sm13-16,23 del extracto etanólico de las hojas de S. macrophylla utilizando ratones Swiss Webster. Métodos: La fracción Sm13-16,23 se administró vía oral como dosis única a 2000 mg/kg y 300 mg/kg, se realizó seguimiento clínico de los animales durante 14 días y finalmente se les aplicó la eutanasia. Se practicó la necropsia de cada animal y se tomaron algunos órganos para su evaluación histopatológica. Resultados: No se registraron muertes durante el tiempo de estudio, ni se evidenciaron signos de toxicidad a dosis de 300mg/kg, sin embargo, a la dosis de 2000 mg/kg, se encontraron lesiones histopatológicas en el hígado; como cariomegalia y binucleación de los hepatocitos. Conclusión: La fracción Sm13-16,23 no produjo lesiones de toxicidad a dosis de 300mg/ kg, lo que indicia que el riesgo de toxicidad aguda oral es bajo.

MAINTENANCE OF RED-TAIL CORAL SNAKE (Micrurus mipartitus / Mantenimiento en cautiverio de la coral rabo de ají (Micrurus mipartitus) y evaluación en la variabilidad individual de su veneno

Red-tail coral snake (Micrurus mipartitus) is a long and thin bicolor coral snake widely distributed in Colombia and is the coral that causes the majority of accidents in the Andean region, so it is important to keep this species in captivity for anti-venom production and research. However, maintaining this species in captivity is very difficult because it refuses to feed, in addition to the high mortality rate due to maladaptation syndrome. In this study a force feeding diet, diverse substrates for maintenance and a milking technique were evaluated. Additionally, individual variability of the venom was determined by High Performance Liquid Chromatography (HPLC), Sodium Dodecyl Sulfate- Polyacrylamide Gel Electrophoresis (SDS-PAGE) and Coagulant, Anticoagulant and Hemolytic activities. The results of this study demonstrate that it was possible to increase the survival rate of this species in captivity and to determine some of the important factors in the maintenance. As to the individual variability of the venom, we found differences in number and intensity of peaks recovered by chromatography and also displayed variations in some of its biological activities.

La coral "rabo de ají" es una coral bicolor larga y delgada. Esta especie está ampliamente distribuida en Colombia y es la coral que causa el mayor número de accidentes en la región Andina, por esto es importante mantener esta especie en cautiverio con fines de producción de antivenenos e investigación. No obstante, el mantenimiento de esta especie en cautiverio es difícil, debido a que se rehúsan a alimentarse voluntariamente y a que presentan alta mortalidad por el denominado síndrome de mal adaptación. En este estudio se evaluaron varios sustratos para el mantenimiento, además de una dieta forzada y una técnica de ordeño. Adicionalmente, se evaluó la variabilidad individual del veneno a través de cromatografía liquida de alta eficiencia (HPLC), electroforesis (SDS-PAGE) y las actividades coagulante, anticoagulante y hemolítica indirecta. Los resultados de este estudio demostraron que fue posible incrementar la sobrevivencia de esta especie en cautiverio, así como determinar algunos factores importantes en su mantenimiento. A partir de la evaluación del veneno se encontraron diferencias en el número y en la intensidad de picos en la cromatografía, así como en algunas de sus actividades biológicas.

Snake venomics of Bothrops punctatus, a semiarboreal pitviper species from Antioquia, Colombia.

Bothrops punctatus is an endangered, semi-arboreal pitviper species distributed in Panamá, Colombia, and Ecuador, whose venom is poorly characterized. In the present work, the protein composition of this venom was profiled using the 'snake venomics' analytical strategy. Decomplexation of the crude venom by RP-HPLC and SDS-PAGE, followed by tandem mass spectrometry of tryptic digests, showed that it consists of proteins assigned to at least nine snake toxin families. Metalloproteinases are predominant in this secretion (41.5% of the total proteins), followed by C-type lectin/lectin-like proteins (16.7%), bradykinin-potentiating peptides (10.7%), phospholipases A2 (93%), serine proteinases (5.4%), disintegrins (38%), L-amino acid oxidases (3.1%), vascular endothelial growth factors (17%), and cysteine-rich secretory proteins (1.2%). Altogether, 6.6% of the proteins were not identified. In vitro, the venom exhibited proteolytic, phospholipase A2, and L-amino acid oxidase activities, as well as angiotensin-converting enzyme (ACE)-inhibitory activity, in agreement with the obtained proteomic profile. Cytotoxic activity on murine C2C12 myoblasts was negative, suggesting that the majority of venom phospholipases A2 likely belong to the acidic type, which often lack major toxic effects. The protein composition of B. punctatus venom shows a good correlation with toxic activities here and previously reported, and adds further data in support of the wide diversity of strategies that have evolved in snake venoms to subdue prey, as increasingly being revealed by proteomic analyses.

Aspectos toxinológicos, clínicos y epidemiológicos el envenenamiento producido por el escorpión Tityus fuhrmanni Kraepelin / Toxinological, clinical, and epidemiological aspects of poisoning produced by the Titys fuhrmanni Kraepelin scorpion

Con el objetivo de determinar las características toxinológicas, clínicas y epidemiológicas del envenenamiento producido por el escorpión T. fuhrmanni, se realizó durante un año un estudio prospectivo en un sector de la ciudad de Medellín (cerro El Volador y los barrios aledaños San Germán y El Volador), en una muestra del 9,6 por ciento de las casas (180) y del 9,4 por ciento de la población del área (719 habitantes). Se incluyó también la recolección de especímenes vivos (128) y de veneno para la parte experimental. La dispersión de escorpiones para el área de estudio fue del 100 por ciento, con alta infestación domiciliaria en las viviendas del cerro y del barrio San Germán (100 por ciento y 32,3 porciento, respectivamente). Durante todo el estudio se detectaron 32 accidentes por T. fuhrmanni, 7 (21,9 por ciento) en niños, 15 en el cerro y 10 en el barrio San Germán, con tasas de ataque del 83 por ciento y del 3,9 porciento, respectivamente. Dieciocho (56,3 por ciento) accidentes ocurrieron en el interior de las viviendas, principalmente en las manos (31,3 por ciento), la cabeza y el cuello (18,8 por ciento) y durante la noche o en las primeras horas de la mañana (62,5 por ciento). El 90,6 por ciento de los casos fueron leves y el 9,4 por ciento (3 niños) tuvieron envenenamiento moderado con signos sistémicos (sudoración generalizada, dolor abdominal). No hubo casos graves y los pacientes no requirieron hospitalización. Tityus fuhrmanni produjo 0,56+/-0,27 mg de veneno por ordeño, y su DL50 (i.p.) en ratones (18-20 g) fue 79,2 ug (3,9 mg veneno/kg). Los animales presentaron sialorrea, piloerección, somnolencia, sudoración generalizada, taquipnea, cianosis, ataxia y convulsiones antes de morir. La rápida aparición (10-15 min) de los signos de envenenamiento en los ratones y su pronta desaparición (2 horas) en los sobrevivientes, permiten concluir que el veneno es de rápida absorción, distribución y eliminación

Resistencia natural a los venenos de serpientes / Natural resistance to snakesï venom

La resistencia natural de algunos animales a los venenos de serpientes se ha logrado demostar en el suero sanguíneo de mamíferos (Zarigueyas, erizos, mangostas) y de serpientes. En este artículo se presenta el estado actual del conocimiento acerca de estas proteínas que no son anticuerpos, los métodos de caracterización y los mecanismos de acción de las mismas