Proteolytic behavior of isolated Pseudomonas spp. from refrigerated raw milk in different concentrations and storage temperatures / Comportamento proteolítico de Pseudomonas spp. isoladas de leite cru refrigerado em diferentes concentrações e temperaturas de estocagem

The objective of the work was to evaluate the multiplication capacity and proteolytic activity of different Pseudomonas spp. cell counts inoculated in milk and storaged under different temperature. Strains isolated from refrigerated raw milk (RRM) were confirmed at genus level by Polymerase Chain Reaction (PCR). The Pseudomonas spp. was cultured in cephalothin-sodium fusidate-cetrimide (CFC) agar-base (30?C for 48 h) until it reached 2 log and 6 log CFU mL-1. Three of eight strains confirmed as Pseudomonas spp were inoculated in sterile reconstituted whole milk powder and incubated at 2C, 4C, and 8C for 96 h. Primary proteolysis indices was determined by the Kjeldahl method. When taking into account the effect of storage time in Pseudomonas spp. population, it was found that the initial population (2 log CFU mL-1) showed significant difference in growth rates only from 0 h to 24 h, keeping at the same levels along 96 h. When a higher initial population was incubated (6 log CFU mL-1), it was not observed a significant difference for times tested. Related to the effect of storage time in proteolysis index, it was not observed a significant difference in samples inoculated with 2 and 6 log CFU mL-1 Pseudomonas spp. When we analyzed the influence of storage temperature on the bacterial multiplication, there was a significant difference in the Pseudomonas spp. population...

O objetivo deste trabalho foi avaliar a capacidade de multiplicação e a atividade proteolítica de diferentes populações de Pseudomonas spp. inoculadas em leite e estocadas em diferentes temperaturas. Cepas isoladas de leite cru refrigerado (LCR) tiveram o gênero confirmado pela Reação em Cadeia da Polimerase (PCR). Pseudomonas spp. foram isoladas em ágar pseudomonas adicionado de cephalothin-sodium fusidate-cetrimide (30?C por 48 h) até atingir as populações de 2 log e 6 log UFC mL-1. Três de oito cepas confirmadas como Pseudomonas spp. foram inoculadas em leite em pó integral reconstituído esterilizado e incubadas a 2C, 4C e 8C por 96 h. O índice de proteólise primária foi determinado pelo método de Kjeldahl. Considerando o efeito do tempo de estocagem na multiplicação de Pseudomonas spp., observou-se que nas baixas populações iniciais (2 log CFU mL-1) houve diferença significativa na multiplicação bacteriana apenas de 0 h para 24 h, mantendo-se estável ao longo das 96 horas de estocagem. Quando uma população inicial mais alta (6 log UFC mL-1) foi estocada, não observou-se diferença significativa entre o tempo zero e os demais testados. Em relação ao efeito do tempo de estocagem no índice de proteólise, não foi encontrada diferença significativa neste índice, nas amostras com inóculo inicial de 2 e 6 log UFC mL-1 de Pseudomonas spp. Quando foi analisado o efeito da...

Proteolytic behavior of isolated Pseudomonas spp. from refrigerated raw milk in different concentrations and storage temperatures / Comportamento proteolítico de Pseudomonas spp. isoladas de leite cru refrigerado em diferentes concentrações e temperaturas de estocagem

The objective of the work was to evaluate the multiplication capacity and proteolytic activity of different Pseudomonas spp. cell counts inoculated in milk and storaged under different temperature. Strains isolated from refrigerated raw milk (RRM) were confirmed at genus level by Polymerase Chain Reaction (PCR). The Pseudomonas spp. was cultured in cephalothin-sodium fusidate-cetrimide (CFC) agar-base (30?C for 48 h) until it reached 2 log and 6 log CFU mL-1. Three of eight strains confirmed as Pseudomonas spp were inoculated in sterile reconstituted whole milk powder and incubated at 2C, 4C, and 8C for 96 h. Primary proteolysis indices was determined by the Kjeldahl method. When taking into account the effect of storage time in Pseudomonas spp. population, it was found that the initial population (2 log CFU mL-1) showed significant difference in growth rates only from 0 h to 24 h, keeping at the same levels along 96 h. When a higher initial population was incubated (6 log CFU mL-1), it was not observed a significant difference for times tested. Related to the effect of storage time in proteolysis index, it was not observed a significant difference in samples inoculated with 2 and 6 log CFU mL-1 Pseudomonas spp. When we analyzed the influence of storage temperature on the bacterial multiplication, there was a significant difference in the Pseudomonas spp. population...(AU)

O objetivo deste trabalho foi avaliar a capacidade de multiplicação e a atividade proteolítica de diferentes populações de Pseudomonas spp. inoculadas em leite e estocadas em diferentes temperaturas. Cepas isoladas de leite cru refrigerado (LCR) tiveram o gênero confirmado pela Reação em Cadeia da Polimerase (PCR). Pseudomonas spp. foram isoladas em ágar pseudomonas adicionado de cephalothin-sodium fusidate-cetrimide (30?C por 48 h) até atingir as populações de 2 log e 6 log UFC mL-1. Três de oito cepas confirmadas como Pseudomonas spp. foram inoculadas em leite em pó integral reconstituído esterilizado e incubadas a 2C, 4C e 8C por 96 h. O índice de proteólise primária foi determinado pelo método de Kjeldahl. Considerando o efeito do tempo de estocagem na multiplicação de Pseudomonas spp., observou-se que nas baixas populações iniciais (2 log CFU mL-1) houve diferença significativa na multiplicação bacteriana apenas de 0 h para 24 h, mantendo-se estável ao longo das 96 horas de estocagem. Quando uma população inicial mais alta (6 log UFC mL-1) foi estocada, não observou-se diferença significativa entre o tempo zero e os demais testados. Em relação ao efeito do tempo de estocagem no índice de proteólise, não foi encontrada diferença significativa neste índice, nas amostras com inóculo inicial de 2 e 6 log UFC mL-1 de Pseudomonas spp. Quando foi analisado o efeito da...(AU)

Molecular cloning of α RYR hotspot region 1 from broiler chicken

Samples of Pectoralis major m. were collected, and an RT-PCR analysis of the a-Ryanodine receptor (a RYR) from chicken mRNA hotspot region spanning aminoacid residues 386 to 540, numbered according to the turkey sequence, revealed two classes of transcripts. The sequences of the first class were similar to turkey and human with 97 percent and 74 percent of identity, respectively, and included all transcripts with substitutions in the nucleotide sequence. The second class was characterized by the deletion of nucleotides, leading to a premature stop codon and coding for a truncated and nonfunctional protein. These results are to date the first report related to the sequencing of the chicken αRYR hotspot region 1, which will possibility serve as a guide for further studies regarding a solution in the poultry production chain related to the problem of pale, soft and exudative (PSE) meat.

Amostras do músculo Pectoralis major foram coletadas e uma RT-PCR foi conduzida para avaliar a sequência do mRNA do αRYR, região compreendida entre os resíduos de aminoácido 386-540, numerado de acordo com a sequência de perus. Os resultados revelaram duas classes de transcritos. O primeiro teve 97 por cento e 74 por cento de identidade com as sequências de αRyR e RyR1 de perus e humanos, respectivamente, e incluiu todos os transcritos com substituições de nucleotídeos. A segunda classe de transcritos foi caracterizada pela deleção de bases que levaram a um stop códon prematuro e a uma proteína truncada não-funcional. Esses resultados são até o momento, o primeiro relato de sequenciamento do αRYR, região hotspot1 de frangos e podem servir como guia para estudos futuros na tentativa de se encontrar uma solução para os problemas na cadeia de produção de frangos relacionados com as carnes PSE (pálida, flácida e exsudativa).