Factors associated with sporadic verotoxigenic Escherichia coli infection in children with diarrhea from the Central Eastern Area of Argentina.

Verotoxigenic Escherichia coli (VTEC) are one of the most important emerging foodborne pathogens and the principal cause of hemolytic uremic syndrome (HUS). This entity has been recognized worldwide as a priority issue in the field of zoonoses and public health, and Argentina is the country with the highest incidence of HUS in children less than 5 years of age.The lack of specific treatment, combined with the high morbidity rate of VTEC infection, makes prevention the main tool for reducing the incidence of HUS. The current work aimed at assessing the factors associated with sporadic VTEC infection in children with acute diarrhea from the Central Eastern area of Argentina where the incidence rate of HUS in children under 5 is the highest worldwide. A univariate analysis was performed to identify potential factors associated with VTEC infection by calculating odds ratios (OR) with 95% confidence intervals (CI). Then, a multivariate logistic regression model was performed. Interaction and association between significant factors were checked. "Recent consumption of food prepared outside home" (OR: 2.4, 95% CI 1.05-5.7) and "recent vegetables consumption" (OR=0.4; 0.2-0.8) were identified as independent factors associated with VTEC infection. We believe that the data obtained from this study further the current knowledge about the epidemiology of VTEC infection in Argentina and could be considered when planning strategies for the prevention of the disease.

Role and clinical course of verotoxigenic Escherichia coli infections in childhood acute diarrhoea in Argentina.

The aim of this study was to investigate the role and clinical course of verotoxigenic Escherichia coli (VTEC) infections in children with acute diarrhoea from Argentina, the country with the highest worldwide incidence of haemolytic uraemic syndrome (HUS). To accomplish this objective, 437 samples from children up to 6 years old with acute diarrhoea were collected and processed. More than 60 % of the children studied presented watery or mucous diarrhoea without blood, and in 25.2 % of the cases the samples contained blood. In a first screening, a multiplex PCR was performed to detect the presence of the vt(1), vt(2), eae, ehxA and saa virulence genes. The strains were then isolated and analysed to characterize their serotypes, virulence genes, antibiotic susceptibility profiles and verotoxin (VT) production. Forty-four of the 437 samples (10.1 %) were positive for VTEC virulence genes. VTEC-infected patients presented different types of diarrhoea (27.3 % belonged to the non-bloody type). Several serotypes and virulence genotypes were found. Isolates belonged to the serotypes O157 : H7, O145 : H(-), O26 : H11, O121 : H19, O111 : H2 and O118 : H2. HUS developed in 16 (36.4 %) patients positive for VTEC virulence genes. All of the VTEC isolates produced a cytopathic effect on Vero cell monolayers, confirming the ability to express VT. Despite most strains being sensitive to all of the antimicrobials studied, a positive association between clinical progression to HUS and antibiotic therapy was observed for the total number of patients studied, as well as for the VTEC(+) group. In conclusion, the data obtained in this study increase our knowledge of the role and clinical course of VTEC infection in childhood acute diarrhoea beyond bloody diarrhoea, and might be considered for the prevention, diagnosis and management of this disease. It is possible that the optimal approach for VTEC diagnosis could be using multiplex PCR to search for the presence of the vt(1), vt(2), eae and ehxA genes.

Desarrollo de un ensayo de dot-blot para la detección de adhesinas en Escherichia coli enterotoxigéna / Dot-blot immunoenzymatic reaction to detec adhesins from enteropathogenic Escherichia coli

Un método de detección de adhesinas K99, K88 y F41 de Escherichia coli enterotoxigénica ha sido desarrollado sobre membranas de nitrocelulosa, basado en la reacción inmunoenzimática de dot-blot. Suspensiones estandarizadas de este microorganismo, portando distintos tipos de adhesinas fueron sembrados en el papel y enfrentados a anticuerpos-sonda de especificidad probada y posteriormente a un conjugado peoxidasa-antianticuerpo. La prueba mostró ser de alta sensibilidad y específica del tipo de adhesina, pudiendo emplearse como ensayo diagnóstico en la detección de esos factores de virulencia

Desarrollo de un ensayo de dot-blot para la detección de adhesinas en Escherichia coli enterotoxigéna / Dot-blot immunoenzymatic reaction to detec adhesins from enteropathogenic Escherichia coli

Un método de detección de adhesinas K99, K88 y F41 de Escherichia coli enterotoxigénica ha sido desarrollado sobre membranas de nitrocelulosa, basado en la reacción inmunoenzimática de dot-blot. Suspensiones estandarizadas de este microorganismo, portando distintos tipos de adhesinas fueron sembrados en el papel y enfrentados a anticuerpos-sonda de especificidad probada y posteriormente a un conjugado peoxidasa-antianticuerpo. La prueba mostró ser de alta sensibilidad y específica del tipo de adhesina, pudiendo emplearse como ensayo diagnóstico en la detección de esos factores de virulencia

Relación entre la evolución del ciclo vital de Trichinella spiralis y la detección de respuesta inmune / Relationship between the course of vital cycle of Trichinella spirallis and the detection of immune response

Un lote de ratas albinas Winster de ambos sexos, fue infestado por vía oral con 1.200-1.500 larvas de Trichinella spiralis. Dos animales fueron sangrados a blanco semanalmente procesando sus sueros en forma individual por técnicas de precipitación en tubos capilares, hemaglutinación pasiva, precipitación en medio gelosado y aglutinación, en la búsqueda de anticuerpos específicos a lo largo de 54 semanas, siendo un extracto salino crudo y pequeños fragmentos de larvas, los antígenos empleados. Paralelamente, se hicieron seguimientos de la localización de larvas en músculo estriado y su enquistamiento. La respuesta celular se siguió durante todo el plan de experimentación, por medio de ensayos de blastogénesis de linfocitos de ratas infestadas, mostrando ser muy débil al tiempo de la migración larval. De las pruebas serológicas efectuadas, la precipitación en tubos capilares y aglutinación mostraron ser más precoces en la detección de anticuerpos circulantes, aunque la hemaglutinación es la más sensible. La distinta especificidad de los anticuerpos participantes en estas reacciones tal vez justifiquen esas diferencias. Tanto la respuesta humoral como la celular parecen llegar tardíamente para oponerse a la masiva invasión larval (AU)

Relación entre la evolución del ciclo vital de Trichinella spiralis y la detección de respuesta inmune / Relationship between the course of vital cycle of Trichinella spirallis and the detection of immune response

Un lote de ratas albinas Winster de ambos sexos, fue infestado por vía oral con 1.200-1.500 larvas de Trichinella spiralis. Dos animales fueron sangrados a blanco semanalmente procesando sus sueros en forma individual por técnicas de precipitación en tubos capilares, hemaglutinación pasiva, precipitación en medio gelosado y aglutinación, en la búsqueda de anticuerpos específicos a lo largo de 54 semanas, siendo un extracto salino crudo y pequeños fragmentos de larvas, los antígenos empleados. Paralelamente, se hicieron seguimientos de la localización de larvas en músculo estriado y su enquistamiento. La respuesta celular se siguió durante todo el plan de experimentación, por medio de ensayos de blastogénesis de linfocitos de ratas infestadas, mostrando ser muy débil al tiempo de la migración larval. De las pruebas serológicas efectuadas, la precipitación en tubos capilares y aglutinación mostraron ser más precoces en la detección de anticuerpos circulantes, aunque la hemaglutinación es la más sensible. La distinta especificidad de los anticuerpos participantes en estas reacciones tal vez justifiquen esas diferencias. Tanto la respuesta humoral como la celular parecen llegar tardíamente para oponerse a la masiva invasión larval

Detección suero bovino de anticuerpos no aglutinantes dirigidos hacia antígenos acultos de Brucella abortus cepa 19 / Detection in bovine serun of non-agglutinating antibodies to occult antigenos of Brucella abortus strain 19

Bovinos hembras de raza Hereford, inoculados con Brucella obortus cepa 19 en fase lisa, elaboraron anticuerpos no aglutinantes que se unieron específicamente a la cepa rugosa 45/20. Los sueros de estos animales, adsorbidos con B. abortus cepa 19 hasta eliminación de los anticuerpos dirigidos contra antígenos de superfície de la cepa lisa, mostraron contener una población no aglutinante de anticuerpos que se unieron a la cepa rugosa 45/20, siendo detectados mediante reacción de Cooms hasta un límite de 1,5 ug. Al margens de los anticuerpos incompletos producidos hacia antígenos externos de cepas lisas de B. abortus, se pone en evidencia este tipo de anticuerpos, con especificidad por antígenos más profundos que también estarían presentes en la superficie de la cepa rugosa. Estos anticuerpos, cuya participación en la depuración sanguínea y degradación del agente etiológico de la brucelosis bovina sería poco significativa, están siendo estudiados minuciosamente con el objeto de establecer la importancia que pudieran tener en el diagnóstico y pronóstico de brucelosis (AU)

Detección suero bovino de anticuerpos no aglutinantes dirigidos hacia antígenos acultos de Brucella abortus cepa 19 / Detection in bovine serun of non-agglutinating antibodies to occult antigenos of Brucella abortus strain 19

Bovinos hembras de raza Hereford, inoculados con Brucella obortus cepa 19 en fase lisa, elaboraron anticuerpos no aglutinantes que se unieron específicamente a la cepa rugosa 45/20. Los sueros de estos animales, adsorbidos con B. abortus cepa 19 hasta eliminación de los anticuerpos dirigidos contra antígenos de superfície de la cepa lisa, mostraron contener una población no aglutinante de anticuerpos que se unieron a la cepa rugosa 45/20, siendo detectados mediante reacción de Cooms hasta un límite de 1,5 ug. Al margens de los anticuerpos incompletos producidos hacia antígenos externos de cepas lisas de B. abortus, se pone en evidencia este tipo de anticuerpos, con especificidad por antígenos más profundos que también estarían presentes en la superficie de la cepa rugosa. Estos anticuerpos, cuya participación en la depuración sanguínea y degradación del agente etiológico de la brucelosis bovina sería poco significativa, están siendo estudiados minuciosamente con el objeto de establecer la importancia que pudieran tener en el diagnóstico y pronóstico de brucelosis