Avaliação imunológica dos camundongos geneticamente selecionados para diferente capacidade de produção de anticorpo

INTRODUCTION: The potentiality of the inflammatory response or the specific immune response of the individual are complex characteristics that vary continuously and have a normal distribution in a heterogeneous population, since they are under polygenic control. Aiming at the study of the genetic regulation of specific immunity, our laboratory developed strains of heterogeneous mice genetically selected for high – HIII and low – LIII ability to produce antibodies to certain antigens through the process of genetic selection bidirectional. For some genetic and immunological studies, isogenic mice must be used. Therefore, we produced isogenic trunks of these parental lines in the vivarium of the Immunogenetics laboratory of the Butantan Institute, which after the selection process were subjected to inbreeding. OBJECTIVE: Evaluate the ability to produce antibodies as well as cells – B and T lymphocytes (CD4 and CD8) after stimulating the immune system with diphtheria anatoxin, comparing isogenic trunks with parental lineages. METHODOLOGY: Isogenic mice from Stem A (High) and Stem E (Low) and heterogeneous (HIII and LIII) were immunized with diphtheria anatoxin. The primary and secondary humoral immune response was evaluated in serum by quantifying the production of anti-diphtheria IgG antibodies using the ELISA technique. For the characterization of the T and B lymphocyte cell response profile, the spleen and lymph nodes were collected and the cells were identified by surface markers (CD4, CD8, B220) and evaluated by flow cytometry. RESULTS: The results show significant increases in the concentration of antibodies produced by the groups when comparing normal serum with primary and secondary responses. The production of antibodies in the secondary response was higher in animals from the HIII and Stem A strains compared to the other groups. In the cellular response, a significant increase in T lymphocytes (CD4+and CD8+) and B lymphocytes was seen in the lymph node in the experimental HIII group compared to the other groups, however in the spleen a significantly increased T cell response was detected in the immunized animals in the LIII group. Regarding the isogenic trunks, the animals from Stem A showed an increase in CD4+ T lymphocytes when compared to the experimental Stem E in splenic cells. CONCLUSIONS: Animals selected for high antibody production capacity showed greater responses both in IgG secretion in the secondary response and in the higher frequency of T and B cells in the lymph nodes. It is important to in-depth study of the modulation mechanism of the immune response in these strains to understand the multi-specific genetic effects against certain antigens.

INTRODUÇÃO: A potencialidade da resposta inflamatória ou da resposta imune específica do indivíduo são características complexas que variam de forma contínua e têm uma distribuição normal numa população heterogênea, pois estão sob controle poligênico. Visando o estudo da regulação genética da imunidade específica nosso laboratório desenvolveu linhagens de camundongos heterogênicos geneticamente selecionadas para alta (“High” - HIII) e baixa (“Low” - LIII) capacidade de produção de anticorpos a certos antígenos através do processo de seleção genética bidirecional. Para alguns estudos genéticos e imunológicos devem ser utilizados camundongos isogênicos, assim, produzimos no Biotério do laboratório de Imunogenética do Instituto Butantan troncos isogênicos destas linhagens parentais, que após o processo seletivo foram submetidas a cruzamentos consanguíneos. OBJETIVO: Avaliar a capacidade de produção de anticorpos assim como as células – linfócitos B e T (CD4+ e CD8+) após o estímulo do sistema imune com anatoxina diftérica comparando os troncos isogênicos com as linhagens parentais. METODOLOGIA: Camundongos isogênicos (High – Tronco A e Low – Tronco E) e heterogênicos (HIII e LIII) foram imunizados com anatoxina diftérica. A resposta imune humoral primária e secundária foram avaliadas no soro pela quantificação da produção de anticorpos IgG antidiftéricos através da técnica de ELISA. Para a caracterização do perfil de resposta celular de linfócitos T e B, foram coletados o baço e linfonodos e as células foram identificadas por marcadores de superfície (CD4, CD8, B220) e avaliadas por citometria de fluxo. RESULTADOS: Os resultados mostram aumentos significativos na concentração de anticorpos produzidos pelos grupos quando comparadas o soro normal com as respostas primária e secundária. A produção de anticorpos na resposta secundária foi maior nos animais das linhagens HIII e Tronco A em relação aos outros grupos. Na resposta celular foi visualizado no linfonodo um aumento significante de linfócitos T (CD4+e CD8+) e linfócitos B no grupo HIII experimental em relação aos outros grupos, entretanto no baço a resposta significativamente aumentada das células T foi detectada nos animais imunizados do grupo LIII. Em relação aos troncos isogênicos, os animais do Tronco A apresentaram um aumento de linfócitos T CD4+ quando comparados ao Tronco E experimental nas células esplênicas. CONCLUSÕES: Os animais selecionados para alta capacidade de produção de anticorpos apresentaram respostas maiores tanto na secreção de IgG na resposta secundária como na maior frequência de células T e B nos linfonodos. Sendo importante o estudo aprofundado do mecanismo de modulação da resposta imune nessas linhagens para entendimento de efeitos genéticos multiespecíficos frente a determinados antígenos.

Prophylactic Dendritic Cell Vaccination in Experimental Breast Cancer Controls Immunity and Hepatic Metastases.

BACKGROUND/AIM: Liver metastases are among the principal mortality causes in cancer patients. Dendritic cell immunotherapies have shown promising results in some tumors by mediating immunological mechanisms that could be involved in liver metastases during primary tumor growth. The present study aimed to evaluate the impact of prophylactic dendritic cell vaccination on the liver of mice with 4T1 mouse breast carcinoma. MATERIALS AND METHODS: Adult female Balb/c mice were submitted or not to vaccination with dendritic cells before the induction of 4T1 tumor lineage. Liver tissues from mice were analyzed by flow cytometry (markers CD3, CD4, CD8, CD25, IL-10, IL-12, IL-17, TNF-α, IFN-γ, T-bet, GATA3, RORγt, and FoxP3) and hematoxylin-eosin. The dendritic cell vaccine was differentiated and matured ex vivo from the bone marrow. RESULTS: Prophylactic vaccination reduced areas of liver metastases (p=0.0049), induced an increase in the percentage of total T and cytotoxic T lymphocytes (p<0.0001), as well as FoxP3+ (p<0.0001). It also increased the levels of cytokines IL-10 and IL-17 in helper T lymphocytes (p<0.0001). CONCLUSION: The prophylactic dendritic cell vaccine changed the cell phenotype in the immune response of liver, and it was able to reduce metastases. Cytotoxic T cells and regulatory T lymphocytes were more present, likewise, the production of IL-10 and IL-7 simultaneously, demonstrating that the vaccine can induce a state of control of pro-inflammatory responses, which can provide a less favorable environment for metastatic tumor growth.

Quedas em idosos: aspectos perceptuais sobre o risco de quedas e medo de cair / Falls in elderly: perceptual aspects of fall risk and fear of falling / Caídas en ancianos: aspectos perceptuales de riesgo de caídas y temor de caídas

O envelhecimento é um processo natural e progressivo marcado por alterações musculoesqueléticas, cognitivas e perceptuais que podem levar o idoso a apresentar episódios de quedas. Este estudo teve como objetivo analisar a relação entre o número de quedas, a percepção do risco de quedas, e o medo de cair em idosos, de ambos os sexos, com idade igual ou superior a 60 anos. O estudo possui delineamento transversal e foi composto por 106 idosos (69,64 ± 8,94 anos). A percepção de quedas foi avaliada por meio do Falls Risk Awareness Questionnaire (FRAQ), e o medo de cair pela Falls Efficacy Scale - International (FES-I). Pôde-se concluir que, quanto menor for o número de medicamentos consumidos, o número de quedas e o medo de cair, maior será a percepção do risco de quedas do idoso. Além disso, também foi possível observar que, quanto maior for o consumo de medicamentos, maior será o medo de cair do idoso.

Aging is a natural and progressive process marked by musculoskeletal, cognitive and perceptual changes that can lead the elderly to present episodes of falls. This study aimed to analyze the relationship between the number of falls, the perception of the risk of falls and the fear of falling in the elderly, of both sexes, aged 60 years or over. The study has a cross-sectional design and was composed of 106 elderly people (69.64 ± 8.94 years). The perception of falls was assessed using the Falls Risk Awareness Questionnaire (FRAQ) and the fear of falling using the Falls Efficacy Scale - International (FES-I). It can be concluded that the smaller the number of drugs consumed, the number of falls and the fear of falling, the greater the perception of the risk of falls for the elderly. In addition, it was also possible to observe that the greater the consumption of medications, the greater the fear of falling for the elderly.

El envejecimiento es un proceso natural y progresivo marcado por cambios musculoesqueléticos, cognitivos y perceptivos que pueden llevar a los ancianos a presentar episodios de caídas. Este estudio tuvo como objetivo analizar la relación entre el número de caídas, la percepción del riesgo de caídas y el miedo a las caídas en los ancianos, de ambos sexos, de 60 años o más. El estudio tiene un diseño transversal y estuvo compuesto por 106 personas de edad avanzada (69,64 ± 8,94 años). La percepción de caídas se evaluó mediante el Cuestionario de conciencia de riesgo de caídas (FRAQ) y el miedo a caerse utilizando la Escala de eficacia de caídas - Internacional (FES-I). Se puede concluir que cuanto menor sea la cantidad de medicamentos consumidos, la cantidad de caídas y el miedo a las caídas, mayor será la percepción del riesgo de caídas para los ancianos. Además, también fue posible observar que cuanto mayor es el consumo de medicamentos, mayor es el miedo a enamorarse de los ancianos.

Practice of physical activities is related to fine motor skills in elderly / Prática de atividades físicas estão relacionadas a motricidade fina de idosos

Objective: Evaluating the fine motor skills (M1) degree in a group of independent elders, checking its possible association with the weekly practice of physical activities. Methods: 139 independent elders of both genders, aged 60 and older, who responded to a survey about their weekly practice of physical activities and then, later on were subjected to M1 tests according to EMTI, which final scores determine each individual's M1. The elderly were categorized into two groups: 60­70 years­old and above 70 years­old. Results: the female gender was predominant in the sample. Most of the elders (46.56%) showed a M¹ Mean Normal, followed by Inferior levels (29.50%) and Superior levels (23.74%). About 6.5% of the elders do not practice any physical activity, 5% practice it once a week, 53% twice a week and 35.5% more than two times per week. It could be observed that those practicing physical activity at least three times a week have better score on the M1 test (Mann­Whitney Test; p = 0.039). On the other hand, the group older than 70 years had a worse performance (Mann­Whitney Test, p = 0.001). Conclusion: The M1 Normal Medium was the score achieved with the highest percentage in the two age groups analyzed, being the group older than 70 years the one that presented worse performance. In addition, sedentary elderly or those who report having physical activity only once a week also had the worst test results.

Objetivo: Avaliar o grau de Motricidade fina (M1) de um grupo de idosos independentes verificando a possível associação com a frequência semanal de atividade física. Métodos: 139 idosos independentes, de ambos os gêneros, com idade igual ou superior a 60 anos, que responderam um questionário relacionado a sua frequência semanal de atividade física, e, posteriormente, realizaram testes de M1 de acordo com a EMTI, cuja pontuação final determina a M1 de cada um. Os idosos foram categorizados em dois grupos: 60 a 70 anos e acima de 70 anos. Resultados: O gênero feminino foi predominante (88%) na amostra. A maioria dos idosos (46,56%) apresentaram M1 Normal Médio, seguido de níveis inferiores (29,50%) e superiores (23,74%). Em torno de 6,5% dos idosos da amostra não realizam atividade física, 5% praticam uma vez por semana, 53% duas vezes por semana e 35,5% acima de duas vezes. Foi observado que aqueles que praticam atividade física no mínimo três vezes por semana obtêm melhores pontos pelo teste de M1 (Teste Mann­Whitney; p = 0,039), já o grupo acima de 70 anos teve pior desempenho (Teste Mann­Whitney; p = 0,001). Conclusão: A M1 Normal Médio foi a classificação alcançada com maior percentual nos dois grupos etários analisados, sendo no grupo acima de 70 anos aquele que apresentou pior desempenho. Além disso, idosos sedentários ou que afirmam realizar atividade física apenas uma vez por semana também tiveram os piores resultados nos testes.

Uterus Didelphys with Obstructed Hemivagina and Ipsilateral Renal Agenesis (OHVIRA Syndrome).

This paper aimed to report a series of 19 cases of uterus didelphys associated with obstructed hemivagina and ipsilateral renal agenesis. This retrospective descriptive observational study included the medical records of 19 patients seen at the Endocrinology Gynecology Sector of the Obstetrics and Gynecology Department of the Federal University of Paraná, and focused on clinical data, complementary exams, patient management, and follow-up. From the 229 patients with genital anomalies seen between 1984 and 2009, 19 (8.3%) were diagnosed with uterus didelphys with vaginal septum and renal agenesis. The patients had a median age of ±16.3 years. Eight subjects (42.6 %) reported abdominal pain; two of them (0.1%) had pelvic masses and seven (36.8%) had dysmenorrhea. Blood retention was confirmed by ultrasound and/ or magnetic resonance imaging of the pelvis, which revealed the existence of a duplicated uterus of the didelphys type with a cystic mass containing old blood obliterating the hemivagina. Urinary tract examination revealed the existence of ipsilateral renal agenesis. Unusual manifestations such as associated infection and rupture of the vaginal septum during sexual intercourse were also reported. The prevalence of uterus didelphys associated with obstructed hemivagina and ipsilateral renal agenesis was 8.3% in a series of 229 genital anomalies. The observance of clinical features is essential for the early identification of the syndrome and the adequate management of the patients.

Doença celíaca e infertilidade / Celiac disease and infertility

Doença celíaca ou enteropatia por sensibilidade ao glúten é uma doença crônica condicionada pelo desenvolvimento de uma hipersensibilidade ao glúten. É associada a uma ampla gama de manifestações clínicas existindo, simultaneamente, má digestão e um déficit na absorção de muitos nutrientes e vitaminas. Diversos estudos têm mostrado, também, uma maior prevalência desta com quadros de infertilidade, aparentemente sem uma causa definida. Este é o motivo da presente revisão.

Celiac disease or gluten-sensitive enteropathy is a chronic illness characterized by the development of hypersensitivity to gluten. It is associated with a vast array of clinical manifestations, such as the occurrence of digestive problems and poor absorption of nutrients and vitamins. Several studies have also linked it to cases of infertility, apparently, without a known cause. This link is the motivation of the following review.

Histerectomia total versushisterectomia supracervical / Total hysterectomy versus supracervical hysterectomy

A histerectomia é um dos procedimentos cirúrgicos mais frequentemente executados na atualidade. Ela é direcionada ao tratamento de diversas doenças. Além disso, é procedimento de baixa morbidade, com resultados confiáveis, sendo considerada segura. O diagnóstico responsável pela maioria das histerectomias, tanto no Brasil, quanto no resto do mundo, é o sangramento uterino secundário à leiomiomatose uterina. Todavia, mais de 95% das doenças que requerem histerectomia não necessitam, a priori, da remoção da cérvice, por serem condições benignas. Por outro lado, outras morbidades exigem sua remoção; todavia, essas condições respondem por menos de 2% das indicações de histerectomia. A presente revisão direciona-se a abordar os aspectos atinentes à manutenção ou remoção da cérvice uterina em uma histerectomia, reconhecendo as indicações absolutas e relativas que exigem a remoção da cérvice uterina, bem como discutir de forma clara e prática suas controvérsias. Desse modo, o médico assistente poderá orientar suas pacientes quanto à escolha do melhor procedimento cirúrgico, seja a histerectomia total ou a subtotal

Hysterectomy is one of the most frequent surgical procedures. It is employed in the treatment of several disorders. Furthermore, it is considered safe, having a low mortality rate, and reliable results. The main diagnosis for this procedure is secondary uterine bleeding by uterine leiomyomas. Over 95% of the diseases treatable by hysterectomy do not require cervix removal, as they are benign conditions. On the other hand, some diseases do need cervix removal, but these add up to only 2% or less of all clinical indications for hysterectomy. The aim of this review is to address important aspects of both maintenance and removal of the uterine cervix by hysterectomy, to acknowledge its relative and absolute indications and to discuss its controversies clearly and practically. Thus, the assistant physician will be able to counsel their patients on their choices of surgical procedure: either total or supracervical hysterectomy

Neoplasias em gônadas disgenéticas / Neoplasms in dysgenetic gonadal

Conceitualmente, as gônadas disgenéticas são gônadas que não sofreram uma completa diferenciação. Em vista disso, constituem parte de uma ampla gama de entidades clínicas possuidoras de fenótipos e de genótipos diversos. Seus cariótipos contêm o cromossomo Y ou seus fragmentos, ou raramente não os contêm. Essas alterações geram maior risco para a ocorrência de neoplasias nessas gônadas. Na sequência deste estudo apresentamos as neoplasias mais comumente associadas aos diversos tipos de disgenesias gonadais. A neoplasia mais comum é o gonadoblastoma e outros como os disgerminomas e os tumores do seio endodérmico também podem estar associados. A detecção dessas anormalidades de modo precoce é o que nos motivou para a presente revisão

By definition, dysgenetic gonads are those that did not undergo a complete differentiation. They make up a vast array of clinical entities, having different phenotypes and genotypes. Their kariotypes contain the Y chromosome or fragments of it, and, in rare cases, do not contain it. Such alterations generate greater potential for the occurrence of neoplasms in such gonads. This study presents neoplasms which are most commonly associated with several types of gonadal dysgenesis. The most common neoplasia is gonadoblastoma and others like disgerminoma or yolk sac tumors may be associated. The early detection of such potential is the reason for this review

Hormônio luteinizante e reprodução assistida / Assisted reproduction and luteinizing hormone

Com os avanços no conhecimento da fisiologia da foliculogênese, vários medicamentos e protocolos estão sendo desenvolvidos com o intuito de promover uma hiperestimulação ovariana controlada eficaz e segura. O uso do hormônio folículo-estimulante (FSH) recombinante nos esquemas de indução de ovulação já está bem definido e respaldado na literatura. Mais recentemente, vários estudos observaram que o hormônio luteinizante(LH) parece ter papel fundamental na maturação folicular tardia, otimizando os resultados dos esquemas de indução em determinados grupos de pacientes. Ainda não há um consenso para sua utilização rotineira e as conclusões são muitas vezes conflitantes. Este artigo visa abordar de forma objetiva o papel do LH nas técnicas de reprodução assistida, fazendo uma ampla revisão da literatura.

As folliculogenesis phisiology, several medicinal products and protocols have been developed to promote an effective and safe controlled ovarian hyperstimulation . The use of recombinant follicle-stimulating hormone (FSH) in schemes of ovulation stimulation is well defined and established in literature. More recently, several studies pointed out that luteinizing hormone seems to play a fundamental role in final stages of follicular maturation, optimizing results of induction schemes in certain groups of patients. There is no consensus about its routine use, and conclusions are often conflicting. This article aims to describe objectively the LH’s role in assisted reproduction techniques, thus offering a comprehensive review of the literature.

Estado atual do tratamento das malformações genitais / Up-to-date on treatment of mullerian anomalies

As malformações genitais, felizmente pouco freqüentes, são assunto de pouco conhecimento na prática clínica, e por isso, muitas vezes mal conduzidas, prejudicando a qualidade de vida e o futuro reprodutivo das mulheres portadoras. Geralmente, o diagnóstico é tardio, vindo a ocorrer apenas na idade reprodutiva, quando se atenta pela ausência de menstruação, ou por dificuldade de se iniciar a relação sexual, ou ainda, por quadros de infertilidade ou abortamentos de repetição. Muitas destas anomalias podem ser tratadas, proporcionando a estas mulheres uma vida sexual saudável, como nos casos de agenesias vaginais, casos de anomalias obstrutivas, com criptomenorréia, casos de anomalias uterinas, com gestações exitosas após correção cirúrgica. Devido à grande variedade de malformações, várias tentativas de classificá-las foram improdutivas, ou por serem simples demais ou muito complexas, dificultando seu entendimento e a escolha do tratamento. Para eliminar estas dificuldades, a Sociedade Americana de Fertilidade elaborou em 1988 uma classificação que separa as anomalias em grupos com as mesmas manifestações clínicas, o mesmo prognóstico reprodutivo e o mesmo tratamento.

Influência do desenvolvimento etário e da suplementação com vitamina E (acetato de DL-alfa-tocoferol) no metabolismo oxidativo dos neutrófilos de bovinos da raça Holandesa (Bos taurus) / Influence of age and vitamin E supplementation (DL-alpha-tocopherol acetate) on neutrophil oxidative metabolism in Holstein friesan (Bos taurus)

O presente trabalho teve por objetivo analisar a influência do desenvolvimento etário e da suplementação com acetato de DL-alfa-tocoferol sobre o metabolismo oxidativo de neutrófilos, em bovinos da raça holandesa, no período do nascimento até os 150 dias de idade. Foram utilizados 20 bezerros divididos em dois grupos de dez animais. Os animais do grupo Tratamento receberam 2000UI de acetato de DL-alfa-tocoferol, por via intramuscular, ao nascimento, aos 15, 30, 60, 90 e 120 dias de idade, sendo o outro o grupo Controle, que não recebeu qualquer suplementação. Em ambos os grupos, o metabolismo oxidativo dos neutrófilos demonstrou pouca atividade durante os primeiros 60 dias de vida, sendo indicativo da ineficiência deste importante mecanismo bactericida. Não foi observado efeito significativo da administração do acetato de DL-alfa-tocoferol sobre o metabolismo oxidativo de neutrófilos.