Multi-laboratory validation study of a real-time PCR method for detection of Salmonella in baby spinach.

The FDA Bacteriological Analytical Manual (BAM) Salmonella culture method takes at least 3 days for a presumptive positive result. The FDA developed a quantitative PCR (qPCR) method to detect Salmonella from 24-h preenriched cultures, using ABI 7500 PCR system. The qPCR method has been evaluated as a rapid screening method for a broad range of foods by single laboratory validation (SLV) studies. The present multi-laboratory validation (MLV) study was aimed to measure the reproducibility of this qPCR method and compare its performance with the culture method. Sixteen laboratories participated in two rounds of MLV study to analyze twenty-four blind-coded baby spinach test portions each. The first round yielded ∼84% and ∼82% positive rates across laboratories for the qPCR and culture methods, respectively, which were both outside the fractional range (25%-75%) required for fractionally inoculated test portions by the FDA's Microbiological Method Validation Guidelines. The second round yielded ∼68% and ∼67% positive rates. The relative level of detection (RLOD) for the second-round study was 0.969, suggesting that qPCR and culture methods had similar sensitivity (p > 0.05). The study demonstrated that the qPCR yields reproducible results and is sufficiently sensitive and specific for the detection of Salmonella in food.

Actividad de la aspartato aminotransferasa y la creatinkinasa y su relación con la actividad de la glutatión peroxidasa en caballos Pura Sangre Inglés, antes y después de una carrera de 1100 metros / Aspartate aminotrasnferase and creatinkinase activity and their relationship with glutathione peroxidase blood activity in Thoroughbred racehorses before and after a race of 1100 meters

Para describir los cambios en la actividad de la aspartato aminotrasferasa (AST; EC 2.6.1.1), la creatinkinasa (CK; EC 2.7.3.2) y su relación con glutatión peroxidasa (GSH-Px; EC 1.15.1.1) en caballos Pura Sangre Inglés (PSI) que corrieran 1100 metros en pista de arena, se seleccionaron 29 caballos entre 3 y 5 años de edad del Hipódromo "Los Comuneros" en el municipio de Guarne (6º17'LN-75º24'LO), Antioquia. Se tomaron 10 mL de sangre heparinizada e igual cantidad sin anticoagulante 12 horas antes de la carrera, al momento de terminarlay 12 horas después. Se determinó concentración de hemoglobina, actividad de AST, CK y GSH-Px. Los datos se analizaron mediante estadística descriptiva y las comparaciones entre grupos se realizaron mediante un ANOVA, se obtuvo la frecuencia de valores alterados para cada variable. La actividad de AST fue similar entre el reposo yposterior a la carrera (p>0.05). La actividad promedio de CK previa a la carrera fue 320±193 U/L aumentando hasta alcanzar valores de 705±528 U/L (p<0.05). La GSH-Px se encontró dentro de valores compatibles con un balance de selenio adecuado, su actividad fue similar entre el término de la carrera y el reposo posterior (p>0.05). La actividad de las enzimas AST y CK siguen siendo una herramienta diagnóstica útil para evaluar lesiones musculares en equinos. La actividad antioxidante y su relación con la actividad de las enzimas AST y CK no arrojó resultados concluyentes, ya que no hubo asociación entre dichas variables, lo que señalaría que la defensa antioxidante del músculo puede depender de otras sustancias diferentes a la GSH-Px.

Competencia inmunológica en la primera semana de vida en terneros mantenidos bajo dos sistemas de producción de leche / Immunological status during the first week of calves maintained under two different production systems

Para determinar la competencia inmunológica en la primera semana de vida en terneros en dos sistemas de producción de leche, se tomaron muestras de sangre en 14 vacas de dos hatos clasificados como lechería especializada (LE) y lechería tradicional (LT), ubicados en Caldas y Quindío, Colombia. Dos semanas antes del parto, de cada vaca se tomaron 10 mL de sangre sin anticoagulante mediante venopunción yugular, a los terneros se les tomó igual cantidad de sangre los días 1, 3 y 5 postnacimiento. Se determinó en las vacas la concentración de proteínas totales, albúmina, globulinas y glucosa, y en los terneros se determinaron las inmunoglobulinas mediante un test de turbidez, y la actividad sérica de gamma glutamil transferasa (GGT). Los resultados se presentan mediante estadística descriptiva y las comparaciones entre grupos se realizaron mediante una prueba "t" y un análisis de varianza factorial. La concentración promedio de proteínas totales fue 67±5 g/L y 70±8 y la de globulinas 33±7 g/L y 34±11 g/L para las vacas en LE y LT, respectivamente (p>0.05). En los terneros no se observaron diferencias para las variables analizadas según el sistema productivo (p>0.05). Los terneros mantenidos en LT presentaron una mayor concentración de globulinas y un aumento en la actividad de GGT al tercer día postnacimiento (p<0.05), pudiendo relacionarse con un mayor consumo de calostro. Los terneros mantenidos en el sistema LE presentaron un aumento en las unidades de turbidez (UT) (p=0.08), lo que refleja un aumento en la concentración de inmunoglobulinas G (IgG). Lo anterior indica una mejor competencia inmunológica de los terneros mantenidos en LE.