Estudio de la estabilidad genética del sistema de expresión de la proteína E del virus dengue 4 en la levadura metilotrófica Pichia pastoris / Study of the genetical stability of the system of expression of protein E of dengue virus 4 in methyltrophic yeast Pichia pastoris

Se realizó el análisis de la estabilidad plasmídica de la levadura metilotrófica Pichia pastoris que expresa la proteína recombinante E del virus dengue 4. Para ello se estimó el número de generaciones desde el proceso de crecimiento en placa petri hasta la propagación en zaranda, así como el proceso de fermentación. Además se determinó en las colonias seleccionadas el patrón de integración por Dot-Blot y secuencia nucleotídica del gen E del virus dengue 4. Este estudio permitió comprobar la conservación e integridad de la secuencia aminoacídica de la proteína E, a pesar de encontrarse cambios genéticos producidos por mecanismos moleculares de la levadura; por otra parte, formó parte del control y chequeo realizado al banco de células primario de levadura que contiene el gen de interés, actualmente utilizado en el proceso de expresión de la proteína E del virus dengue 4

Estudio de la estabilidad genética del sistema de expresión de la proteína E del virus dengue 4 en la levadura metilotrófica Pichia pastoris / Study of the genetical stability of the system of expression of protein E of dengue virus 4 in methyltrophic yeast Pichia pastoris

Se realizó el análisis de la estabilidad plasmídica de la levadura metilotrófica Pichia pastoris que expresa la proteína recombinante E del virus dengue 4. Para ello se estimó el número de generaciones desde el proceso de crecimiento en placa petri hasta la propagación en zaranda, así como el proceso de fermentación. Además se determinó en las colonias seleccionadas el patrón de integración por Dot-Blot y secuencia nucleotídica del gen E del virus dengue 4. Este estudio permitió comprobar la conservación e integridad de la secuencia aminoacídica de la proteína E, a pesar de encontrarse cambios genéticos producidos por mecanismos moleculares de la levadura; por otra parte, formó parte del control y chequeo realizado al banco de células primario de levadura que contiene el gen de interés, actualmente utilizado en el proceso de expresión de la proteína E del virus dengue 4(AU)

[Study of the genetical stability of the system of expression of protein E of dengue virus 4 in methyltrophic yeast Pichia pastoris]. / Estudio de la estabilidad genética del sistema de expresión de la proteína E del virus dengue 4 en la levadura metilotrófica Pichia pastoris.

The plasmidic stability of methyltrophic yeast Pichia pastoris expressing the recombinant protein E of dengue virus 4 was analyzed. To this end, the number of generations from the growth process in petri plaque to the propagation in zaranda was estimated, as well as the fermentation process. Besides, in the selected colonies the integration pattern was determined by Dot-Blot and neuclotide sequence of the gene E of dengue virus 4. This study allowed to prove the conservation and integrity of the aminoacid sequence of protein E, despite the genetic changes produced by molecular yeast mechanisms. On the other hand, it was also part of the control and checking of the primary bank of yeast cells that contains the gene of interest used at present in the process of expression of protein E of dengue virus 4.

Aplicacion de la técnica de reacción en cadenade la polimerasa para la detección de secuencias de Papillomavirus humano / Aplication of polymerase chain reaction to detect sequences of human Papillomavirus

Se aplicó la técnica dereacción en cadena de la polimerasa para la detección de secuencias de papillomavirus humano (PVH) mediante controles de líneas celulares de cáncer cervical y tejidos obtenidos por biopsia con diagnóstico clínico positivo a PVH. Se utilizóun juego de oligonucleótidos consenso, que son complementarios a una región altamente conservada dentro del marco de lectura abierta. El del genoma viral de los PVH que afectan la mucosa cervical. Con este juego de cebadores fue posible amplificar secuencias de ácido desoxirribonucleico (ADN) correspondientes a los PVH 6 y 11, considerados dentro del grupo de bajo riesgo y de los PVH 16, 18, 31 y33 comprendidos en el grupo de alto riesgo. El estudio de la sensibilidad de latécnica de amplificación arrojó como resultado un nivel de detección de 3,5 partículas virales por cada genoma diploide celular

Aplicación de la técnica de reacción en cadena de la polimerasa para la detección de secuencias de Papillomavirus humano / Application of polymerase chain reaction to detect sequences of human Papillomavirus

Se aplicó la técnica de reacción en cadena de la polimerasa para la detección de secuencias de papillomavirus humano (PVH) mediante controles de líneas celulares de cáncer cervical y tejidos obtenidos por biopsia con diagnóstico clínico positivo a PVH. Se utilizó un juego de oligonucleótidos consenso, que son complementarios a una región altamente conservada dentro del marco de lectura abierta. El del genoma viral de los PVH que afectan la mucosa cervical. Con este juego de cebadores fue posible amplificar secuencias de ácido desoxirribonucleico (ADN) correspondientes a los PVH 6 y 11, considerados dentro del grupo de bajo riesgo y de los PVH 16, 18, 31 y 33 comprendidos en el grupo de alto riesgo. El estudio de la sensibilidad de la técnica de amplificación arrojó como resultado un nivel de detección de 3,5 partículas virales por cada genoma diploide celular(AU)

Evaluacion de un Dot ELISA para la deteccion de antigeno de Rotavirus / Evaluation of a Dot Elisa for the detection of Rotavirus antigen

Se realizo la evaluacion de un Dot ELISA elaborado por el Centro de Ingenieria Genetica y Biotecnologia, para la deteccion de antigeno de Rotavirus. Se analizaron 100 muestras de heces fecales por esta tecnica y los resultados fueron comparados con los obtenidos con la electroforesis en gel de poliacrilamida, tecnica empleada en el diagnostico de Rotavirus. Se obtuvo una alta coincidencia, especificidad y sensibilidad entre estos

Evaluación de un Dot ELISA para la detección de antígeno de Rotavirus / Evaluation of a Dot Elisa for the detection of Rotavirus antigen

Se realizó la evaluación de un Dot ELISA elaborado por el Centro de Ingeniería Genética y Biotecnología, para la detección de antígeno de Rotavirus. Se analizaron 100 muestras de heces fecales por esta técnica y los resultados fueron comparados con los obtenidos con la electroforesis en gel de poliacrilamida, técnica empleada en el diagnóstico de Rotavirus. Se obtuvo una alta coincidencia, especificidad y sensibilidad entre éstos(AU)