Expression of BMP II by human osteoblasts cultivated on dense or porous titanium / Expressão da BMP II por osteoblastos humanos cultivados sobre titânio denso ou poroso

Objective: Modifications of titanium have been described as an important tool improving bone repair and boneimplant contact. The aim of this research was to quantified the expression of the morphogenetic bone protein II (BMP II) produced by human cells with osteoblast differentiation, after cultured over dense or porous samples of pure titanium grade II. Material and Methods: The experimental groups were: control group, dense titanium, porosity of 33.79% and porosity of 41,79% (n=36). The samples were produced by powder metallurgy technique. Mesenquimal steam cells isolated from alveolar bone of healthy donors were stimulated to differentiate, assuming an osteoblastic phenotype, by supplemented medium and plated over the samples. After 7 and 14 days, the RNA was collected to perform reverse transcriptase polymerase chain reaction (RT-PCR) in real time. Data was analysed by t-Student and ANOVA tests. The porosity, the pore morphology and interconnection were evaluated by Scanning Electron Microscopy (SEM). Results: Total porosity (obtained after apply dimensions and density formulas) and surface porosity (SEM) presented significant differencesamong the groups. For the group of total porosity of 33.79%, the superficial porosity was 32.5% (± 7.74%) and for the group of 41.79%, the superficial porosity was 37.4% (± 7.95%), significantly lower. The expression of BMP II was similar in all groups. Conclusion: The present study demonstrated that powder metallurgy has a reduced ability to standardize the porosity in the samples and that the porosity does not interfere in the cellular response of BMP II production, an important inducer of osteoblastic differentiation. (AU)

Objetivo: As modificações do titânio são descritas como importantes ferramentas na melhora do reparo ósseo no contato osso implante. O objetivo deste estudo foi quantificar a expressão da proteína óssea morfogênica II (BMP II) por células humanas com diferenciação osteoblastica, quando cultivadas sobre amostras de titânio puro grau II, denso ou poroso. Material e Métodos: Os grupos experimentais foram: controle, titânio denso, titânio de maior porosidade e titânio de menor porosidade, sendo que, as amostras foram confeccionadas pela técnica da metalurgia do pó. As células isoladas de doadores saudáveis foram plaqueadas sobre as amostras. Após 7 e 14 dias, o RNA foi extraído das células. A qualidade e integridade do RNA foram analisadas qualitativamente por eletroforese e quantitativamente por espectrofotômetro. O cDNA foi confeccionado e a foi utilizada técnica de reação em cadeia da polimerase (PCR) em tempo real. Os dados foram utilizados para quantificação relativa, e o gene constitutivo foi a BetaActina. A morfologia e a interligação dos poros foram comprovadas por Microscopia Eletrônica de Varredura (MEV). Resultados: A porosidade superficial (MEV) teve diferença significativa em relação a porosidade obtida analisando-se volume e massa das amostras. Para o grupo 3,79%, a superficial foi de 32,5% (±7,74%) e para o grupo 41,79% a porosidade superficial foi de 37,4% (±7,95%), significativamente menor. A expressão da BMP II foi semelhante em todos os grupos. Conclusão: Concluiu-se a metalurgia do pó tem reduzida capacidade de padronização da porosidade das amostras por ela confeccionas e que a porosidade não interfere na resposta celular de produção da BMP II, importante indutor de diferenciação osteoblastica.(AU)

Porous titanium and Ti-35Nb alloy: effects on gene expression of osteoblastic cells derived from human alveolar bone.

Tests on titanium alloys that possess low elastic modulus, corrosion resistance and minimal potential toxicity are ongoing. This study aimed to evaluate the behavior of human osteoblastic cells cultured on dense and porous Titanium (Ti) samples comparing to dense and porous Ti-35 Niobium (Ti-35Nb) samples, using gene expression analysis. Scanning electronic microscopy confirmed surface porosity and pore interconnectivity and X-ray diffraction showed titanium beta-phase stabilization in Ti-35Nb alloy. There were no differences in expression of transforming growth factor-ß, integrin-ß1, alkaline phosphatase, osteopontin, macrophage colony stimulating factor, prostaglandin E synthase, and apolipoprotein E regarding the type of alloy, porosity and experimental period. The experimental period was a significant factor for the markers: bone sialoprotein II and interleukin 6, with expression increasing over time. Porosity diminished Runt-related transcription factor-2 (Runx-2) expression. Cells adhering to the Ti-35Nb alloy showed statistically similar expression to those adhering to commercially pure Ti grade II, for all the markers tested. In conclusion, the molecular mechanisms of interaction between human osteoblasts and the Ti-35Nb alloy follow the principal routes of osseointegration of commercially pure Ti grade II. Porosity impaired the route of transcription factor Runx-2.

Masticatory muscle activity evaluation by electromyography in removable partial denture users / Avaliação da atividade dos músculos da mastigação por eletromiografia em usuários de prótese parcial removível

Objectives: The aim of this study was to evaluate by electromyography the activity of the temporalis and masseter muscles in removable partial dentures (RPDs) users, before and after new RPDs installation. Material and Methods: Ten patients were selected for this study. All subjects were edentulous in the posterior mandibular region (Kennedy class I or II), fully dentate in the antagonist arch, and dental prosthesis users, which needed to be replaced. The electromyographic activity (EMG) recorded the superficial masseter and temporalis muscles, during the maximum voluntary bite force and the rest position. Maximum mouth opening was also verified. The measurements were recorded at four specific times: using the old prosthesis (T0), right after the new prosthesis installation (T1), two weeks (T2) and four weeks (T4) after installing the new prosthesis. All the RPDs were made by an experienced dentist and the same laboratory. Data were statistically analyzed by ANOVA and Tukey tests (α = 0.05). Results: EMG values had high standard deviation at the time T0. Generally, the mean values decreased after new prosthesis installation, especially after two weeks from the installation (T2). During the rest position, the left masseter and left temporalis muscles showed statistically significant gradual decrease in their activities over time. Conclusion: New prostheses have positive effect on the patient’s muscular activity. However, an adaptation period of the muscle fibers to the new prosthesis is needed

Objetivo: O objetivo deste estudo foi avaliar, através de eletromiografia, a atividade dos músculos masseter e temporal em usuários de próteses parciais removíveis (PPR), antes e depois da instalação da nova prótese. Materiais e Métodos: Dez pacientes foram selecionados para este estudo. Todos os indivíduos eram edêntulos na região mandibular posterior (Classes I e II de Kennedy), totalmente dentados no arco antagonista, e usuários de próteses removíveis, com necessidade de substituição. A atividade eletromiográfica (EMG) dos músculos masseter superficial e temporal foi verificada, durante as posições de contração máxima voluntária e repouso. A abertura bucal máxima também foi mensurada. As mensurações foram efetuadas em quatro momentos: durante a utilização da prótese antiga (T0), logo após a instalação da nova prótese (T1), duas semanas (T2) e quatro semanas (T4) após a instalação da nova prótese. Todas as próteses foram fabricadas por um único dentista com experiência e no mesmo laboratório. Os dados foram analisados estatisticamente pelos testes de ANOVA e Tukey (α = 0,05). Resultados: Os valores de EMG tiveram um alto desvio padrão no momento T0. Em geral, a atividade dos músculos mastigatórios sofreu uma diminuição após a instalação da prótese, especialmente após duas semanas da instalação (T2). Durante a posição de repouso, os músculos masseter e temporal esquerdos demonstraram um decréscimo gradual estatisticamente significativo em suas atividades ao longo do tempo. Conclusão: Novas próteses desempenham efeito positivo sobre a atividade muscular dos pacientes. Ainda, um período de adaptação das fibras musculares com a nova prótese se faz necessário.

Análise das Alterações nas Normas do Conselho Federal de Odontologia para a Obtenção do Título de Especialista em Odontologia / Analysis of Changes in Federal Council of Dentistry's Standards for obtaining the title of Specialist in Dentistry

O progresso da Odontologia baseia-se na evolução de técnicas e materiais, no aperfeiçoamento e na titulação dos profissionais que a ela se dedicam, obtido em cursos de pós-graduação, tanto lato quanto stricto sensu. As normas para a obtenção do título de especialista em Odontologia foram alteradas pelo CFO através das Resoluções 98 e 103 de 2010, modificando a Consolidação das Normas para Procedimentos nos Conselhos de Odontologia, Resolução 63/2005. Este trabalho teve como objetivo comentar e discutir as alterações, oportunidades e consequências decorrentes da implementação dessas Resoluções em face dos preceitos contidos na Constituição Federal, Código Penal, Código Civil e Código de Ética Odontológica. Pode-se concluir que as resoluções adotadas pelo CFO a respeito do título de especialista foram oportunas, pois visaram impedir que profissionais, cujos cursos de pós-graduação não apresentem carga horária clínica compatível com a especialidade, se declarem especialistas. Entretanto, persiste a incoerência com relação aos cursos eminentemente teóricos e também quanto ao professor, mestre, doutor e até mesmo livre-docente, não podendo ser reconhecido como especialista naquilo que ele mais conhece e também ensina.

The progress of Dentistry is based on the techniques and materials evolution and on the improvement and titles of the professionals involved in it as well, which could be obtained in post-graduation courses, lato or stricto sensu. Detailed rules for obtaining the title of Dentistry Specialist were amended by the CFO through resolutions 98 and 103 of 2010, modifying the Consolidation of standards for procedures in the Councils of Dentistry, Resolution 63/2005. This study aimed to review and discuss the changes, opportunities and consequences arising from the implementation of these resolutions, in the face of the precepts contained in the Federal Constitution, Criminal Code, Civil Code and Code of Dental Ethics. It can be concluded that the resolutions adopted by the CFO about title of expert are considered appropriate, because they aim to prevent the professionals whose graduation courses do not have clinical credit hours compatible with their specialty, declare themselves specialists. However, the inconsistency still remains about theoretical courses as well as the teachers, masters, PhDs and even associate professors cannot be recognized as an expert in what they knows more and also teach.

Citotoxicidade, genotoxicidade e expressão gênica em células da polpa dental humana sensibilizadas por cimentos endodônticos / Citotoxicity, genotoxicity and gene expression in human dental pulp cells sensitized by endodontic sealers extracts

O sucesso dos tratamentos endodônticos está relacionado ao correto diagnóstico das alterações pulpares, à qualidade do preparo biomecânico e da obturação dos canais radiculares, bem como à compatibilidade entre os cimentos obturadores com os tecidos adjacentes ao canal. Atualmente a busca de bom comportamento biológico destes cimentos se faz de extrema importância. O presente estudo teve como objetivo analisar a citotoxicidade e a genotoxicidade dos extratos de três cimentos endodônticos e seus efeitos sobre a expressão dos genes BMP2, ALP, RUNX2, BGLAP, OPN e DMP1 em células da polpa dental humana. Foram utilizadas células primárias de tecidos pulpares de terceiro molar com rizogênese incompleta. Cimentos endodônticos foram depositados em placas de 24 poços e armazenados a 37°C por 6 h; cada espécime foi colocado em contato com 2,7 ml de meio de cultura (DMEM-F12) e as amostras foram incubadas por 24 h, a 37°C. Extratos originais (1:1) de cada material foram diluídos em série até 1:32 e analisados quanto a citotoxicidade pelo ensaio de MTT. Após a obtenção de uma diluição que não fosse extremamente tóxica e não interferisse demasiadamente na replicação celular (subdose), foi realizado o teste de micronúcleo para avaliação da genotoxicidade dos materiais. A expressão dos genes foi verificada por RT-PCR em tempo real, em 6, 12 e 24 h. O RNA total foi isolado e retrotranscrito. Os testes de citotoxicidade indicaram que a sobrevivência celular foi afetada pelos extratos na seguinte ordem: EndoREZ > AH Plus > RoekoSeal ≥ MTA. O EndoREZ propiciou o maior número de micronúleos no ensaio de genotoxicidade. A quantificação relativa indicou que em 24 h, o AH Plus e o EndoREZ agiram de modo similar, aumentando a expressão da OPN e reduzindo a ALP; o RoekoSeal gerou expressão da OPN decrescente com o tempo de contato, reduziu a expressão ALP e do gene RUNX2. O MTA foi o material que menos interferiu, de maneira geral, na expressão dos genes de interesse.

The success of endodontic therapy is related to the correct pulp and periapical alterations diagnosis; to the good biomechanical instrumentation and to the root canal sealing quality; to the compatibility between the endodontic sealers and the root canal surrounding tissues as well. Nowadays, the seeking for a sealer with good biological behavior is extremely important. The aim of this study was to analyze the cytotoxicity and the genotoxicity of three endodontic sealers and their effects on the expression of the genes BMP-2, ALP, RUNX2, BGLAP, SPP1 and DMP1 in human dental pulp cells. Primary cells from the 5th passage obtained from pulp tissue of third molar with incomplete rizogenesis were used in this study. Endodontic sealers were placed in 24 well plates and stored at 37°C for 6 hours. After that, each specimen was covered with 2.7 ml of cell culture media (DMEM-F12) and incubated afterwards at 37°C for 24 h. Original extracts (1:1) of each material were serially diluted up to 1:32 and the citotoxicity was analyzed by MTT assay. After obtaining extracts subdose, non very toxic or non interfering on cell replication, genotoxicity was evaluated by micronucleus test. The gene expression was accessed by Real Time RT-PCR, after extracts exposure of 6, 12 and 24 h. Total RNA was isolate and retrotranscribed. The citotoxicity test has showed that cell survival was affected in the following order: EndoREZ > AH Plus > Roeko Seal ≥ MTA. EndoREZ has caused the highest score in micronucleus assay. Relative quantification indicated that at 24 h, AH Plus and EndoREZ increased OPN and reduced ALP; RoekoSeal has caused decreasing OPN expression over time, and has also reduced ALP and RUNX2 expressions. In general, MTA has less interfered at genes expressions.

Citotoxicidade, genotoxicidade e expressão gênica em células da polpa dental humana sensibilizadas por cimentos endodônticos / Citotoxicity, genotoxicity and gene expression in human dental pulp cells sensitized by endodontic sealers extracts

O sucesso dos tratamentos endodônticos está relacionado ao correto diagnóstico das alterações pulpares, à qualidade do preparo biomecânico e da obturação dos canais radiculares, bem como à compatibilidade entre os cimentos obturadores com os tecidos adjacentes ao canal. Atualmente a busca de bom comportamento biológico destes cimentos se faz de extrema importância. O presente estudo teve como objetivo analisar a citotoxicidade e a genotoxicidade dos extratos de três cimentos endodônticos e seus efeitos sobre a expressão dos genes BMP2, ALP, RUNX2, BGLAP, OPN e DMP1 em células da polpa dental humana. Foram utilizadas células primárias de tecidos pulpares de terceiro molar com rizogênese incompleta. Cimentos endodônticos foram depositados em placas de 24 poços e armazenados a 37°C por 6 h; cada espécime foi colocado em contato com 2,7 ml de meio de cultura (DMEM-F12) e as amostras foram incubadas por 24 h, a 37°C. Extratos originais (1:1) de cada material foram diluídos em série até 1:32 e analisados quanto a citotoxicidade pelo ensaio de MTT. Após a obtenção de uma diluição que não fosse extremamente tóxica e não interferisse demasiadamente na replicação celular (subdose), foi realizado o teste de micronúcleo para avaliação da genotoxicidade dos materiais. A expressão dos genes foi verificada por RT-PCR em tempo real, em 6, 12 e 24 h. O RNA total foi isolado e retrotranscrito. Os testes de citotoxicidade indicaram que a sobrevivência celular foi afetada pelos extratos na seguinte ordem: EndoREZ > AH Plus > RoekoSeal ≥ MTA. O EndoREZ propiciou o maior número de micronúleos no ensaio de genotoxicidade. A quantificação relativa indicou que em 24 h, o AH Plus e o EndoREZ agiram de modo similar, aumentando a expressão da OPN e reduzindo a ALP; o RoekoSeal gerou expressão da OPN decrescente com o tempo de contato, reduziu a expressão ALP e do gene RUNX2. O MTA foi o material que menos interferiu, de maneira geral, na expressão dos genes de interesse

The success of endodontic therapy is related to the correct pulp and periapical alterations diagnosis; to the good biomechanical instrumentation and to the root canal sealing quality; to the compatibility between the endodontic sealers and the root canal surrounding tissues as well. Nowadays, the seeking for a sealer with good biological behavior is extremely important. The aim of this study was to analyze the cytotoxicity and the genotoxicity of three endodontic sealers and their effects on the expression of the genes BMP-2, ALP, RUNX2, BGLAP, SPP1 and DMP1 in human dental pulp cells. Primary cells from the 5th passage obtained from pulp tissue of third molar with incomplete rizogenesis were used in this study. Endodontic sealers were placed in 24 well plates and stored at 37°C for 6 hours. After that, each specimen was covered with 2.7 ml of cell culture media (DMEM-F12) and incubated afterwards at 37°C for 24 h. Original extracts (1:1) of each material were serially diluted up to 1:32 and the citotoxicity was analyzed by MTT assay. After obtaining extracts subdose, non very toxic or non interfering on cell replication, genotoxicity was evaluated by micronucleus test. The gene expression was accessed by Real Time RT-PCR, after extracts exposure of 6, 12 and 24 h. Total RNA was isolate and retrotranscribed. The citotoxicity test has showed that cell survival was affected in the following order: EndoREZ > AH Plus > Roeko Seal ≥ MTA. EndoREZ has caused the highest score in micronucleus assay. Relative quantification indicated that at 24 h, AH Plus and EndoREZ increased OPN and reduced ALP; RoekoSeal has caused decreasing OPN expression over time, and has also reduced ALP and RUNX2 expressions. In general, MTA has less interfered at genes expressions

Comparison between wound healing in induced diabetic and nondiabetic rats after low-level laser therapy.

OBJECTIVE: The aim of this work was to compare the effect of low-level laser therapy (LLLT) on the wound healing process in nondiabetic and diabetic rats. BACKGROUND DATA: Among the clinical symptoms caused by diabetes mellitus, a delay in wound healing is a potential risk for patients. It is suggested that LLLT can improve wound healing. METHODS: The tissue used for this study was extracted from animals suffering from diabetes, which was induced by Streptozotocin, and from nondiabetic rats. Animals were assembled into two groups of 25 rats each (treated and control) and further subdivided into two groups: diabetic (n = 15) and nondiabetic (n = 10). A full-thickness skin wound was made on the dorsum area, with a round 8-mm holepunch. The treated group was irradiated by a HeNe laser at 632.8 nm, with the following parameters: 15 mW, exposition time of 17 sec, 0.025 cm2 irradiated area, and energy density of 10 J/cm2. Square full-thickness skin samples (18 mm each side, including both injured and noninjured tissues) were obtained at 4, 7, and 15 days after surgery and analyzed by qualitative and quantitative histological methods. RESULTS: Quantitative histopathological analysis confirmed the results of the qualitative analysis through histological microscope slides. When comparing tissue components (inflammatory cells, vessels and fibroblast/area), we found that treated animals had a less intense inflammatory process than controls. CONCLUSION: Results obtained by both qualitative and quantitative analyses suggested that irradiation of rats with HeNe (632.8 nm), at the tested dose, promoted efficient wound healing in both nondiabetic and diabetic rats as, compared to the control group.