Fertilization with follicular fluid reduces HSP70 and BAX expression on bovine in vitro embryos.

The in vivo fertilization process occurs in the presence of follicular fluid (FF). The aim of this study was to evaluate the effect of in vitro fertilization medium supplementation with 5% or 10% bovine follicular fluid (BFF) on the production of in vitro bovine embryos. FF was collected from ovarian follicles with a diameter of 8-10 mm, and cumulus-oocyte complexes (COCs) were co-incubated with sperm for 24 h in the commercial medium BotuFIV® (BotuPharma©), being distributed among the experimental groups: oocytes fertilized in a control medium; oocytes fertilized in a medium supplemented with 5% BFF; and oocytes fertilized in a medium supplemented with 10% BFF. After fertilization, the zygotes were cultured in vitro for 8 days. Embryo development was assessed through cleavage rates (day 2) and blastocyst formation rates (day 8). The relative expression of the genes OCT4, IFNT2, BAX, HSP70 and SOD2 was measured using the real-time polymerase chain reaction method. There was no difference (p > .05) among the different experimental groups in terms of cleavage rates and blastocyst formation rates. Regarding the gene expression results, only the blastocysts from oocytes fertilized with 10% BFF showed significantly lower expression of IFNT2 (p = .003) and SOD2 (p = .01) genes compared to blastocysts from oocytes fertilized in control medium alone, while there was no difference between blastocyst from oocytes fertilized in control medium and the ones from oocytes fertilized with 5% BFF. In addition to this, the blastocysts from oocytes fertilized with 5% BFF showed significantly reduced levels of expression of the heat shock protein HSP70 (p < .001) and the pro-apoptotic protein BAX (p = .015) compared to blastocysts from oocytes fertilized with control medium. This may indicate that lower supplementation of BFF to the IVF medium creates a more suitable environment for fertilization and is less stressful for the zygote.

Risk factors associated with the epidemiology of Toxoplasma gondii in cattle and buffaloes in the state of Pará, Brazil / Fatores de riscos associados à epidemiologia do Toxoplasma gondii em bovinos e bubalinos no Estado do Pará, Brasil

Toxoplasma gondii is an obligate intracellular protozoan that parasitizes several hosts worldwide, of which cats are definitive hosts. The objective of this study is to evaluate the risk factors associated with the epidemiology of T. gondii in cattle and buffaloes in the state of Pará, Brazil. A total of 2,070 bovine samples (1,749 cattle and 321 buffaloes) were evaluated in 100 rural properties distributed in 51 municipalities from all mesoregions of the state. The evaluated risk factors were animal gender, type of farm, and number of cats in the properties. The serological prevalence of T. gondii was evaluated using the indirect enzyme immunoadsorption assay (iELISA). The samples with a sample/positive (S/P) ratio ≥ 0.5 were considered positive and analyzed using the indirect immunofluorescence assay (IFA). The samples diluted at 1:64 were considered positive. The chi-square test with a level of significance of 5% and the odds ratio (OR) with a confidence interval of 95% was applied.The data were analyzed using BioEstat software version 5.0.The prevalence of T. gondii in bovines was 35.79% and 45.12% in ELISA and IFAT, respectively. The prevalence was 34.48% and 44.14% in cattle and 42.99% and 50.47% in buffaloes using ELISA and IFA, respectively. The mesoregion with the highest prevalence of infection was Marajó Island, corresponding to 42.86% (129) and 50.5% (152) in ELISA and IFA, respectively. In buffaloes, the prevalence of T. gondiiusing ELISA was higher in males (p < 0.05) in the two age groups. In contrast, the prevalence of T. gondii using IFA was higher in males in the age group 13 to 24 months (p < 0.05). The type of farm did not affect the prevalence of T. gondii in cattle (p > 0.05). However, the presence of cats strongly affected the occurrence of infection in cattle. These results demonstrate the high levels of anti-T. gondii antibodies in cattle and buffaloes in Pará and this may be a public health problem...(AU)

O Toxoplasma gondii é um protozoário intracelular obrigatório de ocorrência mundial e se encontra parasitando uma grande diversidade de hospedeiros, sendo os gatos de fundamental importância para o ciclo de vida do parasita. O presente estudo teve como objetivo avaliar os fatores de riscos associados a epidemiologia do Toxoplasma gondii em bovinos e bubalinos no Estado do Pará, Brasil. Foram avaliadas 2.070 amostras de bovídeos, sendo 1.749 bovinos e 321 bubalinos, em 100 propriedades rurais distribuídas em 51 municípios, envolvendo todas as mesorregiões do Estado. Os fatores de risco avaliados foram sexo, exploração pecuária e número de gatos existentes nas propriedades. A prevalência sorológica de Toxoplasma gondii foi avaliada pelo Ensaio de Imunoadsorção Enzimático Indireto (iELISA), considerando-se positivas as amostras que obtiveram razão S/P (sample/positive) ≥ 0,5, bem como, submetidas a Reação de Imuno fluorescência Indireta (RIFI), sendo positivas as amostras regentes na diluição 1:64. Foi aplicado o teste do Qui-quadrado com 5% de significância e empregado cálculo da razão de chances (OR), com um intervalo de confiança de 95%. Todos os resultados foram tratados estatis¬ticamente pelo software BioEstat 5.0. A prevalência de T. gondii nos bovídeos foi de 35,79% e 45,12% no ELISA e RIFI, respectivamente. Em bovinos a prevalência foi de 34,48% e 44,14% e em bubalinos de 42,99% e 50,47% no ELISA e RIFI, respectivamente. A mesorregião com maior prevalência foi a do Marajó com42,86% (129) e 50,5% (152) no ELISA e RIFI respectivamente. Em relação aos bubalinos a prevalência de T. gondii foi mais elevada em macho (P < 0,05) nas duas faixas etárias avaliadas pelo ELISA. Já pelo RIFI a prevalência foi maior em machos somente na faixa etária de 13 a 24 meses (P < 0,05) não tendo influência do sexo nos bovinos. O tipo de exploração também não influenciou a prevalência de T. gondii em bovídeos (P > 0,05), porém a presença de gatos teve grande significância na...(AU)

Risk factors associated with the epidemiology of Toxoplasma gondii in cattle and buffaloes in the state of Pará, Brazil / Fatores de riscos associados à epidemiologia do Toxoplasma gondii em bovinos e bubalinos no Estado do Pará, Brasil

Toxoplasma gondii is an obligate intracellular protozoan that parasitizes several hosts worldwide, of which cats are definitive hosts. The objective of this study is to evaluate the risk factors associated with the epidemiology of T. gondii in cattle and buffaloes in the state of Pará, Brazil. A total of 2,070 bovine samples (1,749 cattle and 321 buffaloes) were evaluated in 100 rural properties distributed in 51 municipalities from all mesoregions of the state. The evaluated risk factors were animal gender, type of farm, and number of cats in the properties. The serological prevalence of T. gondii was evaluated using the indirect enzyme immunoadsorption assay (iELISA). The samples with a sample/positive (S/P) ratio ≥ 0.5 were considered positive and analyzed using the indirect immunofluorescence assay (IFA). The samples diluted at 1:64 were considered positive. The chi-square test with a level of significance of 5% and the odds ratio (OR) with a confidence interval of 95% was applied.The data were analyzed using BioEstat software version 5.0.The prevalence of T. gondii in bovines was 35.79% and 45.12% in ELISA and IFAT, respectively. The prevalence was 34.48% and 44.14% in cattle and 42.99% and 50.47% in buffaloes using ELISA and IFA, respectively. The mesoregion with the highest prevalence of infection was Marajó Island, corresponding to 42.86% (129) and 50.5% (152) in ELISA and IFA, respectively. In buffaloes, the prevalence of T. gondiiusing ELISA was higher in males (p 0.05). However, the presence of cats strongly affected the occurrence of infection in cattle. These results demonstrate the high levels of anti-T. gondii antibodies in cattle and buffaloes in Pará and this may be a public health problem...

O Toxoplasma gondii é um protozoário intracelular obrigatório de ocorrência mundial e se encontra parasitando uma grande diversidade de hospedeiros, sendo os gatos de fundamental importância para o ciclo de vida do parasita. O presente estudo teve como objetivo avaliar os fatores de riscos associados a epidemiologia do Toxoplasma gondii em bovinos e bubalinos no Estado do Pará, Brasil. Foram avaliadas 2.070 amostras de bovídeos, sendo 1.749 bovinos e 321 bubalinos, em 100 propriedades rurais distribuídas em 51 municípios, envolvendo todas as mesorregiões do Estado. Os fatores de risco avaliados foram sexo, exploração pecuária e número de gatos existentes nas propriedades. A prevalência sorológica de Toxoplasma gondii foi avaliada pelo Ensaio de Imunoadsorção Enzimático Indireto (iELISA), considerando-se positivas as amostras que obtiveram razão S/P (sample/positive) ≥ 0,5, bem como, submetidas a Reação de Imuno fluorescência Indireta (RIFI), sendo positivas as amostras regentes na diluição 1:64. Foi aplicado o teste do Qui-quadrado com 5% de significância e empregado cálculo da razão de chances (OR), com um intervalo de confiança de 95%. Todos os resultados foram tratados estatis¬ticamente pelo software BioEstat 5.0. A prevalência de T. gondii nos bovídeos foi de 35,79% e 45,12% no ELISA e RIFI, respectivamente. Em bovinos a prevalência foi de 34,48% e 44,14% e em bubalinos de 42,99% e 50,47% no ELISA e RIFI, respectivamente. A mesorregião com maior prevalência foi a do Marajó com42,86% (129) e 50,5% (152) no ELISA e RIFI respectivamente. Em relação aos bubalinos a prevalência de T. gondii foi mais elevada em macho (P 0,05), porém a presença de gatos teve grande significância na...

Produção in vitro de embrião (PIVE) na espécie bubalina / In vitro embryo production of water buffalo (Bubalus bubalis)

Nos últimos anos a biotécnica de produção in vitro de embrião (PIVE) em bubalino passou porimportantes modificações, possibilitando a sua aplicação ao nível comercial. Entretanto, a taxa de produção deembrião por doadora ainda é muito baixa, refletindo diretamente no custo da prenhez, o qual é cerca de 3-4 vezesmais elevado que aquele observado em bovino zebuíno. Essa baixa taxa de embrião ocorre em função de váriosfatores, dentre os mais importantes podemos citar os fatores intrínsecos relacionados aos animais, como a baixaquantidade e qualidade dos oócitos obtidos por doadora; mas também a fatores extrínsecos, como a falta demeios de cultivo específicos para o oócito/embrião da espécie, as deficiências nas condições de manejo(nutricional e sanitário). Portanto, para a aplicação comercial mais abrangente, é necessário baixar o custo daprenhez, bem como, disponibilizar animais de comprovada produtividade (teste de progênie) para utilização emprogramas de PIVE e que do ponto de vista custo / benefício compense a utilização dessa técnica.(AU)

In recent years, the biotechnology of in vitro embryo production (IVP) in buffalo has undergone a greatimprovement, allowing its application at the commercial level. However, the rate of embryo production perdonor is still very low, reflecting directly on the cost of pregnancy that is about 3-4 times higher than zebu cattle.This low embryo rate occurs due to several factors. Among the most important are the intrinsic factors related tothe animals such as the low quantity and quality of the oocytes obtained by the donor, but also to extrinsicfactors such as the lack of specific culture media for the oocyte/embryo, and deficiencies in the managementconditions, that could be nutritional or sanitary. Therefore, for the expansion in commercial application, it isnecessary to reduce the cost of pregnancy, as well as to provide animals of proven productivity (progeny test) foruse in PIVE programs and that from the cost / benefit point of view compensate the use of a high cost techniquesuch as PIVE.(AU)

Produção in vitro de embrião (PIVE) na espécie bubalina / In vitro embryo production of water buffalo (Bubalus bubalis)

Nos últimos anos a biotécnica de produção in vitro de embrião (PIVE) em bubalino passou porimportantes modificações, possibilitando a sua aplicação ao nível comercial. Entretanto, a taxa de produção deembrião por doadora ainda é muito baixa, refletindo diretamente no custo da prenhez, o qual é cerca de 3-4 vezesmais elevado que aquele observado em bovino zebuíno. Essa baixa taxa de embrião ocorre em função de váriosfatores, dentre os mais importantes podemos citar os fatores intrínsecos relacionados aos animais, como a baixaquantidade e qualidade dos oócitos obtidos por doadora; mas também a fatores extrínsecos, como a falta demeios de cultivo específicos para o oócito/embrião da espécie, as deficiências nas condições de manejo(nutricional e sanitário). Portanto, para a aplicação comercial mais abrangente, é necessário baixar o custo daprenhez, bem como, disponibilizar animais de comprovada produtividade (teste de progênie) para utilização emprogramas de PIVE e que do ponto de vista custo / benefício compense a utilização dessa técnica.

In recent years, the biotechnology of in vitro embryo production (IVP) in buffalo has undergone a greatimprovement, allowing its application at the commercial level. However, the rate of embryo production perdonor is still very low, reflecting directly on the cost of pregnancy that is about 3-4 times higher than zebu cattle.This low embryo rate occurs due to several factors. Among the most important are the intrinsic factors related tothe animals such as the low quantity and quality of the oocytes obtained by the donor, but also to extrinsicfactors such as the lack of specific culture media for the oocyte/embryo, and deficiencies in the managementconditions, that could be nutritional or sanitary. Therefore, for the expansion in commercial application, it isnecessary to reduce the cost of pregnancy, as well as to provide animals of proven productivity (progeny test) foruse in PIVE programs and that from the cost / benefit point of view compensate the use of a high cost techniquesuch as PIVE.