Luteinizing hormone (LH) acts through PKA and PKC to modulate T-type calcium currents and intracellular calcium transients in mice Leydig cells.

LH increases the intracellular Ca(2+) concentration ([Ca(2+)](i)) in mice Leydig cells, in a process triggered by calcium influx through T-type Ca(2+) channels. Here we show that LH modulates both T-type Ca(2+) currents and [Ca(2+)](i) transients through the effects of PKA and PKC. LH increases the peak calcium current (at -20mV) by 40%. A similar effect is seen with PMA. The effect of LH is completely blocked by the PKA inhibitors H89 and a synthetic inhibitory peptide (IP-20), but only partially by chelerythrine (PKC inhibitor). LH and the blockers induced only minor changes in the voltage dependence of activation, inactivation or deactivation of the currents. Staurosporine (blocker of PKA and PKC) impaired the [Ca(2+)](i) changes induced by LH. A similar effect was seen with H89. Although PMA slowly increased the [Ca(2+)](i) the subsequent addition of LH still triggered the typical transients in [Ca(2+)](i). Chelerythrine also does not avoid the Ca(2+) transients, showing that blockage of PKC is not sufficient to inhibit the LH induced [Ca(2+)](i) rise. In summary, these two kinases are not only directly involved in promoting testosterone synthesis but also act on the overall calcium dynamics in Leydig cells, mostly through the activation of PKA by LH.

Presença do papilomavirus humano em lesöes malignas de mucosa oral / Presence of human papillomavirus in malignant oral lesions

O objetivo deste estudo foi investigar a prevalência do papilomavírus humano 6/11 e 16/18 em pacientes, com lesöes orais clínicamente diagnosticadas como leucoplasias, atendidas na Faculdade de Odontologia de Araraquara, UNESP, Brasil. Após a inclusäo em parafina, os cortes corados com H&E, foram selecionadas 30 biópsias e separadas em 3 grupos: lesöes sem displasia (n=10), lesöes com diferentes graus de displasia (n=10) e carcinoma espinocelular invasivo(n=10). As lesöes que apresentaram displasia epitelial foram classificadas de acordo com os critérios histopatológicos propostos por Van Der Waal. As lesöes foram investigadas para a presença de HPV por hibridizaçäo in situ com sondas biotiniladas de amplo espectro, 6/11 e 16/18. HPV 16/18 foi detectado em 20 por cento (n=2) das biópsias com displasia severa. A presença de HPV 16/18 em lesöes malignas sugere sua importância como fator de risco na carcinogênese oral

Papilomavírus humano (HPV) em lesões benignas e malignas de mucosa oral pelos métodos de imuno-histoquímica e hibridização in situ / Human papillomavirus (HPV)in benign and malignant oral lesions by immunohistochemistry and in situ hybridization methods

Quinze biópsias orais com diagnóstico histopatológico de papiloma (n=7), e carcinoma espinocelular invasivo (n=8) foram investigadas para a presença do papilomavírus humano (HPV) por imuno-histoquímica (IHQ) e hibridização in situ (HIS). As proteínas do capsídeo viral foram avaliadas por imuno-histoquímica com anticorpo policlonal e o DNA do vírus analisado por hibridização in situ com sondas biotiniladas de amplo espectro, 6/11 e 16/18. O HPV foi detectado por IHQ em 13 por cento (n=2) e, por HIS, em 60 por cento (n=9) das lesões orais. As duas biópsias positivas na IHQ também foram positivas para a presença do DNA de HPV 6/11. Além disso, o HPV 16/18 foi encontrado em 20 por cento dos carcinomas orais e em 7 por cento dos papilomas, enquanto o HPV 6/11 foi detectado em 7 por cento dos carcinomas e 26 por cento dos papilomas. Pode-se concluir deste estudo que a reação imuno-histoquímica é pouco sensível para o diagnóstico de HPV e que a presença do HPV 16/18 em lesões benignas e malignas sugere a participação deste vírus na carcinogênese oral.

Estudo comparativo de métodos utilizados para obtençäo de diferentes células em lavado nasal de voluntários residentes na cidade de Araraquara - SP / A comparative sudy of the methods used for the recovery of different cells in the nasal lavage among volunteer personal in the city of Araraquara, SP

Dentre os efeitos que a poluiçäo causa à saúde humana, a irritaçäo da mucosa exposta é o evento mais recente e também o mais óbvio. A mucosa, sob contínua agressäo de poluentes dispersos em aerossóis, apresenta processo inflamatório. Os habitantes de Araraquara, SP, estäo expostos à queima de cana-de-açúcar em quase todos os meses do ano. Este poluente é também responsável por danos à mucosa nasal. A maior dificuldade para o estudo de células em lavado nasal é a recuperaçäo celular, pois o muco as mantém firmemente aderidas, impedindo sua quantificaçäo adequada. Este estudo propöe a avaliaçäo de dois métodos para a recuperaçäo de células no lavado nasal de 26 voluntários, o método clássico modificado utilizando os mucolíticos N-acetilcisteína e ditiotreitol. O melhor método de recuperaçäo de leucócitos(P=0,038; p<0,05) e hemácias (P=0,0435, p<0,05) foi o da agitaçäo. Para células epiteliais, os dois métodos mostraram-se semelhantes em eficiência (P=0,865, p>0,005). Entretanto os mucolíticos N-acetilcisteína e ditiotreitol comprometem a arquitetura celular, dificultando sua análise morfotintorial. Em conclusäo, o método da agitaçäo mostrou-se mais eficiente para a recuperaçäo de leucócitos e hemácias em lavado nasal, enquanto para células epiteliais ambos os métodos mostraram-se eficientes.