ABSTRACT
Despite our current knowledge of the immunology, pathology, and genetics of Anaplasma marginale, prevention in cattle is currently based on old standbys, including live attenuated vaccines, antibiotic treatment, and maintaining enzootic stability in cattle herds. In the present study, we evaluated the use of an immunostimulant complex (ISCOMATRIX) adjuvant, associated with a pool of recombinant major surface proteins (rMSP1a, rMSP1b, rMSP4 and rMSP5) to improve the humoral immune response triggered in calves mainly by IgG2. Ten calves were divided in three groups: 4 calves were inoculated with the ISCOMATRIX/rMSPs (G1); 2 calves were inoculated with ISCOMATRIX adjuvant (G2); and 4 calves received saline (G3). Three inoculations were administered at 21-day intervals. In G1, the calves showed significant increases in total IgG, IgG1 and IgG2 levels 21 days after the second inoculation, compared to the control group (p 0.05), and G1 calves remained above the cut-off value 28 days after the third inoculation (p 0.05). The post-immunized sera from calves in G1 reacted specifically for each of the rMSPs used. In conclusion, the ISCOMATRIX/rMSPs induced antigen-specific seroconversion in calves. Therefore, additional testing to explore the protection induced by rMSPs, both alone and in conjunction with proteins previously identified as subdominant epitopes, is warranted.
Apesar dos avanços da imunologia, patologia e genética deAnaplasma marginale, a prevenção em bovinos ainda é baseada nas vacinas vivas atenuadas, na terapia com antibiótico e estabilidade enzoótica dos rebanhos bovinos. No presente estudo, avaliou-se o uso de um complexo imunoestimulante (ISCOMATRIX), associado ás proteínas recombinantes de superfície (rMSP1a, rMSP1b, rMSP4 e rMSP5) para melhorar a resposta imune humoral desencadeada em bezerros, principalmente por IgG2. Dez animais foram divididos em três grupos: 4 bezerros foram inoculados com o ISCOMATRIX/rMSPs (G1), 2 bezerros foram inoculados com ISCOMATRIX adjuvante (G2) e 4 bezerros receberam salina (G3). Três doses vacinais foram administradas em intervalos de 21 dias. No G1, os bezerros apresentaram aumentos significativos nos níveis de IgG total, IgG1 e IgG2 21 dias após a segunda inoculação, em comparação com o grupo de controle (p 0,05). Nos bezerros do G1 esses níveis de anticoprpos permaneceram acima do ponto de corte 28 dias após a terceira inoculação (p 0,05). Os soros pós-imunização de bezerros do G1 reagiram especificamente com cada uma das rMSPs utilizadas. Em conclusão, o ISCOMATRIX/rMSPs induziu soroconversão antígeno-específica em bezerros. Portanto, se justifica a realização de ensaios adicionais para explorar a proteção induzida pela rMSPs, tanto sozinhas como em conjunto com novas proteínas identificadas com epitopos subdominantes.
ABSTRACT
No presente estudo, avaliou-se a resposta imune humoral e celular de um coquetel de plasmídeos recombinantes que codificam as principais proteínas de superfície (rMSP1a, rMSP1b, rMSP4, rMSP5, VirB9 e virB10) em bezerros. Dez animais foram divididos em três grupos: quatro bezerros foram inoculados com os plasmídeos / rMSPs (G1); 2 bezerros foram inoculados com vetor vazio (G2), e quatro bezerros receberam salina (G3). Três inoculações foram efetuadas em intervalos de 21 dias. No G1, os bezerros apresentaram aumentos significativos nos níveis de IgG total 21 dias após a segunda inoculação, em comparação com o grupo controle (p 0,05 %) e os bezerros do G1 permaneceram com DO acima do ponto de corte 28 dias após a terceira inoculação (p 0,05 %). Os soros pós-imunes dos bezerros do G1 reagiram especificamente para cada uma das rMSPs usadas. Adicionalmente, IgG específicas para VirB9 e Vir B10 foram detectadas por ELISA. Em conclusão, a associação de plasmídeos recombinantes induziu soroconversão específica nos bezerros testados. Portanto, sugerese a realização de testes adicionais para avaliar a proteção induzida pelos plasmídeos recombinantes, isoladamente ou em conjunto com as proteínas já identificadas com epítopos subdominantes.
In the present study, we evaluated a cocktail of recombinant plasmids encoding the major surface proteins (rMSP1a, rMSP1b, rMSP4, rMSP5, VirB9 and VirB10) to improve the humoral and cellular immune response triggered in calves. Ten calves were divided in three groups: Four calves were inoculated with the plasmids/rMSPs (G1); 2 calves were inoculated with empty vector (G2); and 4 calves received saline (G3). Three inoculations were administered at 21-day intervals. In G1, the calves showed significant increases in total IgG level 21 days after the second inoculation, compared to the control group (p 0,05%), and G1 calves remained above the cut-off value 28 days after the third inoculation (p 0,05%). The post-immunized sera from calves in G1 reacted specifically for each of the rMSPs used. Additionally, ELISA detected specific IgG for VirB9 and VirB10. In conclusion, the cocktail of recombinant plasmids induced antigen-specific seroconversion in calves. Therefore, additional testing to explore the protection induced by recombinant plasmids, alone or in conjunction with proteins previously identified as subdominant epitopes, is warranted.
ABSTRACT
No presente estudo, avaliou-se a resposta imune humoral e celular de um coquetel de plasmídeos recombinantes que codificam as principais proteínas de superfície (rMSP1a, rMSP1b, rMSP4, rMSP5, VirB9 e virB10) em bezerros. Dez animais foram divididos em três grupos: quatro bezerros foram inoculados com os plasmídeos / rMSPs (G1); 2 bezerros foram inoculados com vetor vazio (G2), e quatro bezerros receberam salina (G3). Três inoculações foram efetuadas em intervalos de 21 dias. No G1, os bezerros apresentaram aumentos significativos nos níveis de IgG total 21 dias após a segunda inoculação, em comparação com o grupo controle (p 0,05 %) e os bezerros do G1 permaneceram com DO acima do ponto de corte 28 dias após a terceira inoculação (p 0,05 %). Os soros pós-imunes dos bezerros do G1 reagiram especificamente para cada uma das rMSPs usadas. Adicionalmente, IgG específicas para VirB9 e Vir B10 foram detectadas por ELISA. Em conclusão, a associação de plasmídeos recombinantes induziu soroconversão específica nos bezerros testados. Portanto, sugerese a realização de testes adicionais para avaliar a proteção induzida pelos plasmídeos recombinantes, isoladamente ou em conjunto com as proteínas já identificadas com epítopos subdominantes.
In the present study, we evaluated a cocktail of recombinant plasmids encoding the major surface proteins (rMSP1a, rMSP1b, rMSP4, rMSP5, VirB9 and VirB10) to improve the humoral and cellular immune response triggered in calves. Ten calves were divided in three groups: Four calves were inoculated with the plasmids/rMSPs (G1); 2 calves were inoculated with empty vector (G2); and 4 calves received saline (G3). Three inoculations were administered at 21-day intervals. In G1, the calves showed significant increases in total IgG level 21 days after the second inoculation, compared to the control group (p 0,05%), and G1 calves remained above the cut-off value 28 days after the third inoculation (p 0,05%). The post-immunized sera from calves in G1 reacted specifically for each of the rMSPs used. Additionally, ELISA detected specific IgG for VirB9 and VirB10. In conclusion, the cocktail of recombinant plasmids induced antigen-specific seroconversion in calves. Therefore, additional testing to explore the protection induced by recombinant plasmids, alone or in conjunction with proteins previously identified as subdominant epitopes, is warranted.