Species level identification of coagulase negative Staphylococcus spp. from buffalo using matrix-assisted laser desorption ionization-time of flight mass spectrometry and cydB real-time quantitative PCR.

Incorrect identification of Staphylococcus spp. can have serious clinical and zoonotic repercussions. Accordingly, the aim of this study was to determine if matrix-assisted laser desorption ionization-time of flight mass spectrometry (MALDI-TOF MS) and/or cydB real- time quantitative PCR (qPCR) could be used to accurately identify coagulase negative Staphylococcus spp. (CoNS) obtained from buffalo milk and milking environment samples. Seventy-five of 84 CoNS isolates could be identified to the species level (score value >1.99) using MALDI-TOF MS. However, as determined by cytochrome d ubiquinol oxidase subunit II (cydB) qPCR and by 16S RNA and cydB gene sequencing, 10S. agnetis strains were wrongly identified as S. hyicus by MALDI-TOF MS. In addition, 9 isolates identified by MALDI-TOF only to the genus level (score values between 1.70 and 1.99) could be identified to species by cydB qPCR. Our findings suggest that MALDI-TOF MS is a reliable method for rapid identification of S. chromogenes and S. epidermidis (species of interest both in human and veterinary medicine) and may be able to correctly identify other Staphylococcus spp. However, at present not all Staphylococcus spp. found in buffalo milk can be accurately identified by MALDI-TOF MS and for these organisms, the cydB qPCR developed in the current study may provide a reliable alternative method for rapid identification of CoNS species.

Avaliação da eficiência da desinfecção de teteiras e dos tetos no processo de ordenha mecânica de vacas / Efficiency of the disinfection of teatcups and teats during mechanic milking of dairy cows

O presente trabalho teve como objetivos avaliar a eficiência do processo de desinfecção de teteiras por imersão em solução desinfetante utilizando duas fontes de cloro, hipoclorito de sódio e cloro orgânico, a dinâmica de cloro residual nesses dois tipos de soluções, ao longo do processo de ordenha, e a eficiência de três métodos de desinfecção: imersão, spray e esponja na remoção de microrganismos dos tetos de vacas em lactação, utilizando o cloro como desinfetante. Foram determinados os números de coliformes totais, coliformes fecais, Staphylococcus sp e microrganismos mesófilos nas amostras colhidas das teteiras, dos tetos e da solução desinfetante. Os resultados obtidos demonstraram que a prática da desinfecção de teteiras entre vacas, utilizando-se hipoclorito de sódio ou dicloroisocianurato de sódio como fontes de cloro, na concentração em torno de 150ppm não foi eficiente na redução dos microrganismos presentes nas teteiras. A solução desinfetante a base de dicloroisocianurato de sódio apresentou maior estabilidade. Os métodos de desinfecção dos tetos proporcionaram redução nos números de microrganismos pesquisados, em todos os tratamentos utilizados, mostrando ser uma ferramenta simples para minimizar o risco de transmissão de patógenos durante a ordenha e aumentar a qualidade microbiológica do leite produzido.