Photodynamic fungicidal efficacy of hypericin and dimethyl methylene blue against azole-resistant Candida albicans strains.

Antimicrobial photodynamic therapy (aPDT) is an emerging alternative to treat infections based on the use of photosensitisers (PSs) and visible light. To investigate the fungicidal effect of PDT against azole-resistant Candida albicans strains using two PSs with a different mechanism of action, hypericin (HYP) and 1,9-dimethyl methylene blue (DMMB), comparing their efficacy and the reactive oxygen species (ROS) species involved in their cytotoxicity. Azole-resistant and the azole-susceptible C. albicans strains were used. Solutions of 0.5 and 4 McFarland inoculum of each Candida strain were treated with different concentrations of each PS, and exposed to two light-emitting diode light fluences (18 and 37 J cm⁻²). Mechanistic insight was gained using several ROS quenchers. The minimal fungicidal concentration of HYP for ≥3 log10 CFU reduction (0.5 McFarland) was 0.62 µmol l⁻¹ for most strains, whereas for DMMB it ranged between 1.25 and 2.5 µmol l⁻¹. Increasing the fluence to 37 J cm⁻² allowed to reduce the DMMB concentration. Higher concentrations of both PSs were required to reach a 6 log10 reduction (4 McFarland). H2O2 was the main phototoxic species involved in the fungicidal effect of HYP-aPDT whereas ¹O2 was more important for DMMB-based treatments. aPDT with either HYP or DMMB is effective in killing of C. albicans strains independent of their azole resistance pattern. HYP was more efficient at low fungal concentration and DMMB at higher concentrations.

Fe de errores de “Implicación de la alteración en la regulación de la ciclooxigenasa-2 sobre la formación de miofibroblastos en la fibrogénesis pulmonar” / No disponible

Introducción: Se ha descrito la existencia de una disminución en la expresión de ciclooxigenasa 2 (COX-2) y de prostaglandina-E2 (PGE-2) en la fibrogénesis pulmonar. La PGE-2 es un mediador antifibrótico. Los miofibroblastos desempeñan un importante papel en la fibrogénesis. Los miofibroblastos pueden formarse a partir de fibroblastos (transición fibroblasto-miofibroblasto) y de células epiteliales (transición epitelio-mesenquimal). El objetivo es estudiar la expresión de COX-2 y la síntesis de PGE2 en la inducción de la formación de miofibroblastos.Métodos: Mediante biopsia pulmonar se obtuvieron fibroblastos normales de sujetos con neumotórax (n=5) y fibroblastos de pacientes con fibrosis pulmonar idiopática (FPI) (n=5). Para el estudio de la función epitelial se utilizaron células epiteliales inmortales A549. Se realizó inmunohistoquímica (IHC) y Western blot para la determinación de COX-2 y α-SMA (marcador de miofibroblastos). Mediante ELISA se estudio la síntesis de PGE2. La proliferación celular se valoró mediante la incorporación nuclear de un análogo de nucleósido.Resultados: Los fibroblastos de la FPI presentan mayores niveles de ß-SMA comparados con los fibroblastos control. Ambos presentan una expresión indetectable de COX-2. Después de la estimulación con interleucina 1ß (IL-1ß), los fibroblastos control expresan mayores niveles de COX-2 que los fibroblastos fibróticos. Los miofibroblastos detectados mediante IHC no expresaron COX-2. Los fibroblastos tratados con TGF-ß1 expresan α-SMA, en forma, dosis y tiempo dependiente, tanto en fibroblastos fibróticos como en controles. A549 tratadas con TGF-ß1 cambian su fenotipo, expresando fibras de estrés relacionadas con la formación de miofibroblastos (α-SMA+). Los miofibroblastos obtenidos de tratar fibroblatos o A549 con TGF-ß1 muestran un descenso de los niveles de COX-2 y PGE-2 tras estimulación con IL-1ß. No hubo variaciones en la proliferación celular(AU)

Conclusiones: Los miofibroblastos se caracterizan por una alteración en la regulación de la expresión de COX-2 y en la síntesis de PGE-2, tanto en los transformados a partir de fibroblastos como de células epiteliales(AU)