ABSTRACT
The aim of this study was to evaluate the inhibitory activity of the commercially available essential oils of Mentha spicata (spearmint) and Eucalyptus globulus (eucalyptus) on Streptococcus mutans ATCC 25175 biofilms in vitro, emulating dental plaque conditions. The composition of the essential oils (EOs) was determined using gas chromatography coupled with mass spectrometry (GC-MS), with the main metabolites being Carvone (57.93%) and Limonene (12.91%) for Mentha spicata and 1,8-Cineole (Eucalyptol) (65.83%) for Eucalyptus globulus. The inhibitory activity was evaluated using the methods of agar-well diffusion and colorimetric microdilution. The inhibition halos were 18.3 ± 0.47 mm and 27.0 ± 0.82 mm, and the MICs were 1.8484 mg/mL and 1.9168 mg/mL for the EOs of Mentha spicata and Eucalyptus globulus, respectively. The activity against the biofilms was evaluated on a substrate of bovine enamel pieces using a basal mucin medium (BMM) in anaerobic conditions with daily sucrose exposition cycles in order to emulate oral cavity conditions. The EOs were applied in a concentration of 0.5% in a sterile saline vehicle with 1% polysorbate 20. After 72 h of cultivation, a significant reduction was observed (p < 0.001%) on the biofilm biomass, which was evaluated by its turbidity in suspension and using a count of the recoverable organisms with regards to the control. The effects of the Eos were not significantly distinct from each other. The EOs showed antimicrobial activity against both the Streptococcus mutans planktonic and biofilm cultures. Thus, EOs may have great potential for the development of pharmaceutical and sanitary products for oral health.
ABSTRACT
El patógeno Cándida albicans puede causar infecciones invasivas graves y frecuentes lesiones superficiales. Los fármacos usados en el tratamiento presentan inconvenientes y es necesario buscar alternativas. Objetivos. Determinar la actividad del aceite esencial (AE) de Thymus vulgaris y de su combinación con EDTA sobre Cándida albicans, y formular una crema con el AE suplementado con derivados terpénicos naturales. Diseño. Estudio experimental in vitro y toxicidad in vivo. Lugar. Facultad de Medicina y Facultad de Farmacia y Bioquímica, Universidad Nacional Mayor de San Marcos, Lima, Perú. Material biológico. Cepa de Cándida albicans para las pruebas in vitro y conejos para la toxicidad dérmica. Métodos. La actividad antifúngica se determinó por el método de difusión en pozo de agar; la concentración inhibitoria mínima (CIM), por el método de microdilución en caldo. La crema se formuló con el AE al 1 por ciento y otra suplementada con carvacrol, timol, citral y EDTA. La toxicidad dérmica se determinó en conejos. Principales medidas de resultados. Halos de inhibición, CIM, signos de toxicidad. Resultados. El AE a 100 mg/mL inhibió el crecimiento de Cándida albicans con halos de inhibición de 30,33 ± 0,58 mm, mientras que la adición de EDTA produjo halos de 35,33 ± 0,58 mm. La CIM para el AE y AE + EDTA fue de 8 mg/mL y 0,5 mg/mL, respectivamente. La crema con AE 1 por ciento produjo halos de inhibición de 13,33 ± 0,58 mm, mientras que la adición de EDTA, timol, carvacrol y citral aumentó el halo hasta 24,33 ± 0,58 mm. No se evidenció signos de toxicidad dérmica en conejos. Conclusiones. El AE de Thymus vulgaris presentó actividad inhibitoria sobre Cándida albicans y el EDTA incrementó dicha actividad; asimismo, el aceite esencial, EDTA, carvacrol, timol y citral formulados en una crema mostraron efecto sinérgico y sin signos de toxicidad dérmica...
Candida albicans may cause severe invasive infections and frequently superficial lesions. Drugs used in treatment present drawbacks and search of alternatives becomes necessary. Objectives: To determine the activity of Thymus vulgaris essential oil (EO) alone and combined with EDTA on Candida albicans, and formulate a cream with EO supplemented with natural terpenes. Design: In vitro experimental and in vivo toxicity study. Setting: Faculty of Medicine and Faculty of Pharmacy, Universidad Nacional Mayor de San Marcos, Lima, Peru. Biological material:Candida albicans strain for in vitro study and rabbits for dermal toxicity tests. Methods:Antifungal activity was determined by agar well diffusion method, and minimum inhibitory concentration (MIC) by broth microdilution method. A cream was formulated with EO 1 per cent and another supplemented with carvacrol, thymol, citral and EDTA. Dermal toxicity in rabbits was determined. Main outcome measures: Inhibition halos, MIC, signs of toxicity. Results: EO at 100 mg/mL inhibited Candida albicans growth with 30.33 ± 0.58 mm inhibition halos; adding EDTA produced 35.33 ± 0.58 mm halos. MIC for EO and EO + EDTA was respectively 8 mg/mL and 0.5 mg/mL. EO 1 per cent cream originated 13.33 ± 0.58 mm inhibition halos, and addition of EDTA, thymol, carvacrol and citral increased halos to 24.33 ± 0.58 mm. No signs of dermal toxicity in rabbits were observed. Conclusions:Thymus vulgaris EO showed inhibitory activity against Candida albicans and EDTA increased this activity; essential oil, EDTA, carvacrol, thymol and citral formulated in cream also showed synergistic effect without evidence of dermal toxicity...
Subject(s)
Animals , Rabbits , Antifungal Agents , Candida albicans , Plant Creams , Animal Experimentation , Plants, Medicinal , Thymus Plant , Thymol/therapeutic use , Clinical TrialABSTRACT
Se determinó la actividad antifúngica in vitro de los extractos metanólicos, etanólicos e hidroalcohólicos de Hypericum laricifolium (partes aéreas), Ilex guayusa Loes (hojas), Juglans neotropica Diels (corteza), Piper lineatum (hojas), Piper spp. (hojas), Psidium guajava (hojas), Cassia reticulata Wild (planta entera) y Terminalia catappa (hojas); recolectadas en los departamentos de Amazonas y Cajamarca. La actividad antifúngica se evaluó mediante el método de difusión en agar frente a Candida albicans ATCC 10231, Aspergillus niger ATCC 16404 y Microsporum canis cepa clínica y la Concentración Mínima Inhibitoria (CMI) por el método de microdilución colorimétrico, utilizando como controles ketoconazol y fluconazol. Todos los extractos presentaron actividad antifúngica importante frente a C. albicans y M. canis, y ninguno tuvo actividad frente a A. niger. Las condiciones de laboratorio para determinar la concentración mínima inhibitoria (CMI) de C. albicans mediante el método de microdilución colorimétrico fueron: temperatura de incubación de 37°C, tiempo de incubación de 24 h, inóculo final 0,5-2,5 x 103 ufc/mL y 0,05 mg de resazurina por pozo; y, para M. canis fueron temperatura de incubación de 37°C, tiempo de incubación de 4 días, inóculo final de 1,2 6 x 104 ufc/mL y 0,05 mg de resazurina por pozo. Mediante microdilución se determinó que 19 (79%), 18 (75%) y 24 (100 %) de los extractos investigados presentaron CMIs ≤ 1000 µg/mL, frente a Candida albicans ATCC 10231, Candida albicans cepa clínica y Microsporum canis, respectivamente. Los extractos con la mayor actividad antifúngica fueron los de Juglans neotropica Diels, Psidium guajava y Terminalia catappa; con CMIs < 100 µg/mL. El método de microdilución colorimétrico usando resazurina demostró ser útil para el screening antifúngico de extractos de plantas.
Subject(s)
Plants, Medicinal , Plant Extracts , Antifungal Agents , Peru , PhytochemicalsABSTRACT
El presente trabajo tiene por finalidad demostrar la actividad demostrar la actividad antimicótica in vitro y la eludación de algunos de los metabolitos del aceite esencial de Minthostchys mollis (muña) proveniente del distrito de Huacrapuquio (2700 msnm), Provincia de Tarma. El aceite esencial de las hojas de Minthostachys mollis obtenido por el método de destilación por arraste de vapor de aguas, fue sometido a análisis físico-quimico y elucidación de composición química mediante cromatografía de gases (CG), se determinó los siguientes monotepenos: Pulegona, Limoneno, Mentona y Mirceno. Mediante el método de agar en difusión, se deteminó la actividad antimicótica, frente a las cepas de Candida albicans y por el método de dilución en tubo la inhibición del crecimiento fúngico de Trichophytun tonsurans, Trichophytun mentagophytus, Microsporun canis. Los diámetros de la prueba de difusión en agar de Candida albicans fueron de 30 mm al 100 por ciento del aceite esencial de muña y 35 mm al 50 por ciento del aceite esencial de muña. El crecimiento de Trichophytun tonsurans, Trichophytun mentagophytus, icrosporun canis, fue inhibido por el aceite esencial de muña, probablemente por la acción de los monoterpenos.
The objective of this paper es to demonstrate the in vitro antimycotic activity and elucidation of Huacrapuquio(2700 m. altitude) in the province of tarma. The essential oil of the leaves of Minthostachys mollis (muña) has been extracted by hydrodistillation method. This was subjecte to Physical-Chemical analysis, gas Chomatography (GC) to determine the chemical composition and then determinig that fungicidal and fungistatic activity to be due to the following Monotepenes: Pulegone, Limoneno, Menthne and also Myrcene. the antimycotic activity for Candida albicans was determined by the Agar-well diffusion assay and the method of dilution in tubes, the inhibition of growth of Trichophytun tonsurans, Trichophytun mentagophytus, Microsporun canis. For the dittusion in Agar tes the diameters wee as follows 30 mm for the 100 percent concentration o the essential muña oil and 35 mm for the 50 percent concentation od the same oil. The essential oil of muña inhibited growth off Trichophytun tonsurans, Trichophytun mentagophytus, Microsporun canis, probably by monoterpenes pharacological action.
Subject(s)
Antifungal Agents , Chromatography, Gas , Lamiaceae , Lamiaceae/chemistry , Plants, MedicinalABSTRACT
El presente trabajo investigo la actividad antifúngica in vitro de doce extractos etanolicos correspondientes a diez plantas medicinales peruanas; Annona cherimolia Mill.(hojas), Annona muricata L.(corteza y hojas), Bidens pilosa L.(partes aéreas), Hypericum laricifolium L.(partes aéreas), Juglans neotropica Diels(corteza), Piper spp. (hojas), Plantago major L.(hojas), Psidium guajava L.(hojas), Schinus molle L.(corteza y hojas) y Spartium junceum L. (planta entera). Las especies fueron recolectadas en el departamento de Amazonas, excepto Schinus molle L. (Apurímac) y Annona muricata L. (Lima). La actividad antifúngica se evaluo mediante los métodos de difusión en agar y dilución en agar para la determinación de la concentración mínima inhibitoria (CMI). Los microorganismos de prueba utilizados fueron las levaduras Candida albicans ATCC 10231 y Candida albicans cepa clínica, así como, el hongo filamentoso Aspergillus niger ATCC 16404; las cepas fueron proporcionadas por la Cátedra de Microbiología de la Facultad de Farmacia y Bioquímica de la Universidad Nacional Mayor de San Marcos. De doce extractos investigados, seis presentaron actividad antifúngica consistente con un diámetro de halos de inhibición #18mm (Prueba de Difusión en agar) frente a Candida albicans ATCC 10231. Ningún extracto mostró actividad consistente frente a la cepa clínica de Candida albicans y Aspergillus niger ATCC 16404. La CMI de los extractos que presentaron actividad consistente frente a Candida albicans ATCC 10231, fue de 250 µg/mL para Hypericum laricifolium L., Juglans neotropica Diels, Psidium guajava L. y Schinus molle L. (un extracto de corteza y uno de hojas) y de 500µg/mL para Piper spp. No se determino la CMI de los extractos (Juglans neotropica Diels y Psidium guajava L.) que presentaron halos frente al Aspergillus niger ATCC 16404 por considerarlos sin actividad significante (<18mm.). Los antifúngicos Nistatina y Fluconazol fueron incluidos en el estudio como controles positivos.
