Redox proteomics of the inflammatory secretome identifies a common set of redoxins and other glutathionylated proteins released in inflammation, influenza virus infection and oxidative stress.

Protein cysteines can form transient disulfides with glutathione (GSH), resulting in the production of glutathionylated proteins, and this process is regarded as a mechanism by which the redox state of the cell can regulate protein function. Most studies on redox regulation of immunity have focused on intracellular proteins. In this study we have used redox proteomics to identify those proteins released in glutathionylated form by macrophages stimulated with lipopolysaccharide (LPS) after pre-loading the cells with biotinylated GSH. Of the several proteins identified in the redox secretome, we have selected a number for validation. Proteomic analysis indicated that LPS stimulated the release of peroxiredoxin (PRDX) 1, PRDX2, vimentin (VIM), profilin1 (PFN1) and thioredoxin 1 (TXN1). For PRDX1 and TXN1, we were able to confirm that the released protein is glutathionylated. PRDX1, PRDX2 and TXN1 were also released by the human pulmonary epithelial cell line, A549, infected with influenza virus. The release of the proteins identified was inhibited by the anti-inflammatory glucocorticoid, dexamethasone (DEX), which also inhibited tumor necrosis factor (TNF)-α release, and by thiol antioxidants (N-butanoyl GSH derivative, GSH-C4, and N-acetylcysteine (NAC), which did not affect TNF-α production. The proteins identified could be useful as biomarkers of oxidative stress associated with inflammation, and further studies will be required to investigate if the extracellular forms of these proteins has immunoregulatory functions.

Linkage of inflammation and oxidative stress via release of glutathionylated peroxiredoxin-2, which acts as a danger signal.

The mechanism by which oxidative stress induces inflammation and vice versa is unclear but is of great importance, being apparently linked to many chronic inflammatory diseases. We show here that inflammatory stimuli induce release of oxidized peroxiredoxin-2 (PRDX2), a ubiquitous redox-active intracellular enzyme. Once released, the extracellular PRDX2 acts as a redox-dependent inflammatory mediator, triggering macrophages to produce and release TNF-α. The oxidative coupling of glutathione (GSH) to PRDX2 cysteine residues (i.e., protein glutathionylation) occurs before or during PRDX2 release, a process central to the regulation of immunity. We identified PRDX2 among the glutathionylated proteins released in vitro by LPS-stimulated macrophages using mass spectrometry proteomic methods. Consistent with being part of an inflammatory cascade, we find that PRDX2 then induces TNF-α release. Unlike classical inflammatory cytokines, PRDX2 release does not reflect LPS-mediated induction of mRNA or protein synthesis; instead, PRDX2 is constitutively present in macrophages, mainly in the reduced form, and is released in the oxidized form on LPS stimulation. Release of PRDX2 is also observed in human embryonic kidney cells treated with TNF-α. Importantly, the PRDX2 substrate thioredoxin (TRX) is also released along with PRDX2, enabling an oxidative cascade that can alter the -SH status of surface proteins and thereby facilitate activation via cytokine and Toll-like receptors. Thus, our findings suggest a model in which the release of PRDX2 and TRX from macrophages can modify the redox status of cell surface receptors and enable induction of inflammatory responses. This pathway warrants further exploration as a potential novel therapeutic target for chronic inflammatory diseases.

Measurement of mixed disulfides including glutathionylated proteins.

Mixed disulfides between protein cysteines and low-molecular-weight thiol cysteine or glutathione lead to the formation of cysteinylated proteins or glutathionylated proteins. These types of posttranslational modification are of great importance in the so-called redox regulation, by which changes in the redox state of the cell regulate a number of biochemical processes. We describe the methods for quantitatively measuring the various redox states of cellular thiols including protein cysteines and these mixed disulfides. These include spectrophotometric methods, which do not distinguish between protein-cysteine and protein-glutathione disulfides, and HPLC methods that make such distinction. Finally, we report a method for labeling proteins susceptible to glutathionylation with biotin, to allow their visualization by Western blot after electrophoretic separation, which is used to identify proteins undergoing this posttranslational modification.

Neuropathologic and biochemical changes during disease progression in liver X receptor beta-/- mice, a model of adult neuron disease.

In amyotrophic lateral sclerosis (ALS), there is selective degeneration of motor neurons that leads to paralysis and death. Although the etiology of ALS is unclear, its heterogeneity suggests that a combination of factors (endogenous and/or environmental) may induce progressive motor neuron stress that results in the activation of different cell death pathways. Alterations of brain cholesterol homeostasis have recently been considered as possible cofactors in many neurodegenerative disorders, including ALS. The liver X receptor beta (LXRbeta) receptor is involved in lipogenesis and cholesterol metabolism, and we previously found that adult-onset motor neuron pathology occurs in LXRbeta mice. Here, we investigated neuromuscular alterations of LXRbeta mice from ages 3 to 24 months. Increased cholesterol levels, gliosis, and inflammation preceded motor neuron loss and clinical disease onset; the mice showed progressivemotor neuron deficits starting from age 7 months. The numbers ofmotor neurons and neuromuscular junctions were decreased in 24-month-old mice, but neither paralysis nor reduced life span was observed. Moreover, other spinal neurons were also lost in these mice. These results suggest that LXRbeta may inhibit neuroinflammation and maintain cholesterol homeostasis, and that LXRbeta mice represent a potential model for investigating the role of cholesterol in ALS and other neurodegenerative disorders.

Produçäo científica publicada pelas enfermeiras de hospitais públicos e privados do município de Säo Paulo / Scientic publication from public and privates

Estudo realizado em sete hospitais públicos e seis privados do Município de Säo Paulo, relacionado à publicaçäo da produçäo científica realizada pelas enfermeiras assistenciais, no período de janeiro de 1989 a junho de 1995. Foram apontadas 486 publicaçöes, sendo 242 sob a forma de resumos, 124 em anais, 92 em periódicos nacionais e internacionais, 21 capítulos de livros e 7 livros na área de enfermagem. Aparecem também, as facilidades e dificuldades encontradas para a publicaçäo dos trabalhos científicos, manifestadas pelas enfermeiras.

Situação da pesquisa em enfermagem em hospitais do município de São Paulo / Nursing research situation in hospital in the city of São Paulo

Tendo por objetivo descrever a situação da pesquisa em enfermagem em hospitais do município de São Paulo, no período de 1989 a 1993, foi realizada uma pesquisa exploratória, descritiva, abrangendo 14 estabelecimentos sendo sete públicos e sete da rede privada. Nos públicos foram produzidas 114 pesquisas e nos privados 40, predominando as apresentadas em eventos científicos. Foram expressas as facilidades e dificuldades para a produção de pesquisa nestas instituições, bem como, a incorporação dos resultados destas na prática, principalmente quando o objetivo de estudo emerge de problemas percebidos no processo assistencial. Centros de pesquisa, parceria serviço-universidade e contratação de enfermeiras pesquisadoras foram estratégias adotadas para o desenvolvimento de pesquisas em algumas das instituições estudadas.

The objective of this study is to show nursing research situation in public and private hospitals in the city of São Paulo, form 1989 to 1993. It is an exploratory and descriptive research. The questionnaire was answered by nursing directors of 14 hospitals - 7 public and private. 114 researches were developed in public hospitals and 40 in private hospitals. The results demonstrated that the majority of studies were developed by four or more authors and most of them were presented in scientific events. The facilities and difficulties to develop research and to implement the results in nursing practice were also pointed out. Research centers, faculty-practice nursing, and admission of nurses researcher were registered ad strategies to develop research in some of these institutions.

El propósito del presente estudio es la descripción de la situación de la investigación en enfermería en los hospitales de la ciudad de São Paulo, Brasil, en el período de 1989 hasta 1993. El diseño utilizado fue exploratorio-descriptivo, abarcando 14 instituciones hospitalarias, de las cuales 7 corresponden al sector público y 7 al sector privado. En los primeros fueron realizadas 114 investigaciones y 40 en los hospitales del sector privado. Hubo predominancia de investigaciones presentadas en coloquios científicos. Las facilidades y las dificultades para la utilización de sus resultados en la atención de enfermería, en especial cuando el objeto del estudio tuvo su origen en el proceso asistencial. Para el desarrollo de la investigación en las instituciones estudiadas, fueron empleadas algunas estrategias entre ellas: centros de investigaciones, integración servicio-universidad y contratación de enfermeras investigadoras.

A enfermagem e a pesquisa no Brasil / The nursing and research in Brazil

A enfermagem brasileira em relaçäo à pesquisa apresenta uma evoluçäo acentuada nos últimos anos, com um saldo quantitativo na última década. Os pesquisadores brasileiros localizam-se na sua maioria na categoria docente e na regiäo sudeste do Brasil. Existem oito Centros universitários de estudos em nível de pós-graduaçäo, com inúmeras áreas de concentraçäo nos cursos de mestrado. Os cursos de doutorado localizam-se todos na regiäo sudeste. Existem recursos disponíveis em agências financiadoras de pesquisas para a enfermagem, porém a demanda ainda é incipiente. A Associaçäo Brasileira de Enfermagem tem procurado implementar medidas que visam o desenvolvimento das pesquisas na área da enfermagem. (AU)

A enfermagem e a pesquisa no Brasil / The nursing and research in Brazil

A enfermagem brasileira em relaçäo à pesquisa apresenta uma evoluçäo acentuada nos últimos anos, com um saldo quantitativo na última década. Os pesquisadores brasileiros localizam-se na sua maioria na categoria docente e na regiäo sudeste do Brasil. Existem oito Centros universitários de estudos em nível de pós-graduaçäo, com inúmeras áreas de concentraçäo nos cursos de mestrado. Os cursos de doutorado localizam-se todos na regiäo sudeste. Existem recursos disponíveis em agências financiadoras de pesquisas para a enfermagem, porém a demanda ainda é incipiente. A Associaçäo Brasileira de Enfermagem tem procurado implementar medidas que visam o desenvolvimento das pesquisas na área da enfermagem.

Estresse em enfermagem: análise da atuaçäo do enfermeiro de centro cirúrgico / Operating room nursing: stress

Este estudo tem por finalidade verificar as situaçöes estressantes para os enfermeiros de Centro Cirúrgico (C.C.). A populaçäo foi constituída por 20 enfermeiros de hospitais governamentais e näo governamentais. Usou-se um formulário com itens referentes à caracterizaçäo da populaçäo e com medidas das situaçöes vividas no desempenho de seu trabalho diário. Obeserva-se que as situaçöes envolvidas na coordenaçäo das atividades de C.C. foram consideradas as mais estressantes por esse grupo de enfermeiros. Näo foram evidenciadas diferenças estatísticas entre os níveis de estresse mencionados pelos enfermeiros dos dois tipos de instituiçäo. Näo houve correlaçäo entre nível de estresse e as variáveis: tempo de formado, escolha de área, treinamento recebido e experiência anterior. Detectou-se correlaçäo significativa entre nível de estresse e tempo de serviço em C.C. e na associaçäo de duas variáveis citadas.

Centro de material: enfoque na disciplina Enfermagem em Centro Cirúrgico da Escola de Enfermagem da Universidade de Säo Paulo / Supply center: approach of nursing education in operating room of the Nursing School of Säo Paulo University (USP)

O ensino de enfermagem em Centro de Material é ministrado como parte do conteúdo programático da disciplina Enfermagem em Centro Cirúrgico da Escola de Enfermagem da Universidade de Säo Paulo e visa despertar o interesse do aluno para a importância dessa unidade no contexto hospitalar. Consideramos que a formaçäo do enfermeiro näo pode prescindir do conhecimento dessa unidade, uma vez que, na nossa realidade, o "staff" dessa área é composto pela equipe de enfermagem e que as atividades aí desenvolvidas iräo refletir diretamente na qualidade de assistência prestada ao cliente e no controle da infecçäo hospitalar. Este trabalho foi realizado com a finalidade de verificar, junto aos alunos do sexto semestre do curso de graduaçäo de Säo Paulo, que já cursaram a disciplina Enfermagem em Centro Cirúrgico, a validade da estratégia de ensino e o conteúdo teórico-prático utilizados no processo ensino-aprendizagem na unidade de Centro de Material

Estudo retrospectivo da pesquisa de enfermagem em centro cirúrgico / Retrospective study of nursing research in operating room

Estudo retrospectivo sobre as pesquisas realizadas em enfermagem em centros cirúrgicos no Brasil - 1976-1985. O mesmo classifica as pesquisas por áreas, tais como: assistencial, administrativa e educacional. A pesquisa foi feita baseada nas fontes de informaçäo em enfermagem a nível nacional. Objetiva avaliar tendênciass, evoluçäo histórica e características das mesmas. Os resultados säo apresentados em tabelas que pontam porcentagens daquela realidade. Concluiram que é grande o número de pesquisas desenvolvidas por docentes em enfermagem. Recomendam que, para haver um desenvolvimento técnico-científico adequado, as escolas teriam que propiciar pesquisas na área educacional visando uma melhoria da assistência de enfermagem

Os problemas dos pacientes detectados pela enfermeira durante a recepçäo no centro cirúrgico / The patient problems found by the nurse during the admission in the operating room

Este estudo teve por objetivo verificar os problemas do paciente detectados na Ficha Pré-Operatória de Enfermagem, durante a sua recepçäo nesta unidade. Pela análise dos dados registrados neste instrumento, verificou-se que os 168 pacientes apresentaram quantitativamente 699 problemas e qualitativamente 41. A enfermeira do centro cirúrgico ao receber o paciente nesta unidade e de posse dos dados da Ficha Pré-Operatória de Enfermagem, registrados pela enfermeira da unidade de internaçäo, tem subsídios para avaliar o paciente, planejar e implementar os cuidados individualizados no período transoperatório

Atividades das enfermeiras de Centro de Material e suas expectativas quanto ao ensino de enfermagem nesta áarea, em nível de graduação

O estudo mostra as atividades das enfermeiras responsáveis por seis centros de materiais da Grande São Paulo e suas expectativas em relação ao ensino de enfermagem nesta área, em nível de graduação. O instrumento utilizado para a coleta foi o questionário.

[Nursing concept - an attempt of phenomenological approach]. / CONCEITO DE ENFERMAGEM ­ UMA TENTATIVA DE ABORDAGEM FENOMENOLÓGICA.

The authors present a brief literature review about the phenomenological approach in nursing research. This issue is an attempt in phenomenological analysis of the concept of nursing. The answers to the question "what is nursing?", made by 251 nurses, were grouped in categories and compared with HENDERSON'S and HORTA's nursing concepts.

Instrumento de comunicaçäo de enfermagem: estudo da implantaçäo de um modelo de comunicaçäo escrita entre as equipes de enfermagem das unidades cirúrgicas e do centro cirúrgico / Nursing communication tool: a study to introduce a written model for communication between nursing staff

Estudo da implantaçäo de um Instrumento de comunicaçäo de enfermagem que propicie a continuidade de assistência ao paciente cirúrgico, nos períodos pré, trans e pós-operatório. O Instrumento de Comunicaçäo compreende duas partes: Ficha Pré-operatório de Enfermagem e Ficha Transoperatória de Enfermagem. O instrumento foi aplicado, pelas equipes de enfermagem das unidades cirúrgicas e do centro cirúrgico, a 327 pacientes submetidos a tratamento cirúrgico, internados em três unidades cirúrgicas gerais e três especializadas, em um hospital geral. Pela análise dos resultados apresentados, verificou-se que a freqüência de preenchimento dos itens propostos na Ficha Pré-operatória de Enfermagem obteve percentual acima de 83%, superior ao estabelecido neste estudo (70%). O percentual de preenchimento dos itens da Ficha Transoperatória de enfermagem foi acima de 85%,exceto o dos itens pulso e pressäo arterial, que se apresenta abaixo de 70%. A freqüência de preenchimento dos itens das Fichas Pré-operatórias e Transoperatória de Enfermagem foi analisada separadamente, em relaçäo a cada uma das seis unidades cirúrgicas de internaçäo. A variaçäo do percentual quanto a freqüência de preenchimento dos itens propostos foi de 83% a 100% nas seis unidades cirúrgicas, o que permite inferir que o Instrumento de Comunicaçäo de Enfermagem é possível de aplicaçäo, tanto aos pacientes submetidos a cirurgias gerais como a especializadas

[Nursing communication tool. A study to introduce a written model for communication between nursing staff of the surgical units and the operating rooms]. / INSTRUMENTO DE COMUNICAÇÃO DE ENFERMAGEM. Estudo da implantação de um modelo de comunicação escrita entre as equipes de enfermagem das unidades cirúrgicas e do centro cirúrgico.

A study to introduce a nursing communication toot to make easier the continuity of nursing care of the surgical patient in the pre, per and postoperative periods. The communication tool consists in two parts: preoperative and peroperative notes form. This tool was aplied to 327 patients undergoing surgical treatment who were interned in three general surgical units and in three specialized units in a general hospital. The application of the tool was made by nursing staff of the surgical units and the operating room of the hospital. It was verified, by the analysis of results, that the frequency of the filling-in items on the preoperative form was higher than 83%, above the 70% established in this present study. The percentage of items registered on the peroperative form was above 85%, excepting pulse rate and blood pressure that showed less than 70%. The frequency of the filling-in of the items on the two forms, preoperative and peroperative, was analyzed separately for each six surgical units. The percentual variation of the filling-in was between 83 and 100% which makes possible the inference that this nursing communication tool is certainly applicable to patients undergoing general specialized surgery.