Obtención de hidrolizados proteicos de leguminosas usando una proteasa recombinante de Pseudomonas aeruginosa M211 / Obtaining protein hydrolysates from leguminous using a recombinant protease from Pseudomonas aeruginosa M211

El género Pseudomonas es una fuente importante de proteasas; sin embargo, su uso está restringido en la industria alimentaria. El clonaje permite aprovechar la capacidad catalítica de estas enzimas mediante su producción en microorganismos inocuos. Por otro lado, las leguminosas son fuentes ricas en proteínas, a partir de las cuales se pueden obtener compuestos con valor agregado mediante procesos de hidrólisis enzimática. En este estudio, se produjo y caracterizó una proteasa recombinante (PT4) alcalina y termoestable de Pseudomonas aeruginosa M211, para la obtención de hidrolizados proteicos de leguminosas. Para ello, el gen de la proteasa se clonó en el vector pJET1.2/blunt utilizando E. coli DHalfa como hospedero. El análisis de la secuencia nucleotídica parcial de la proteasa indicó un 99 % de similitud con Peptidasas de la Familia M4 de Pseudomonas aeruginosa. La enzima recombinante presentó un peso molecular de 80 kDa, demostró ser activa y estable en condiciones alcalinas y termófilas con un pH y temperatura óptimos de 8 y 60 °C, respectivamente, y fue inhibida por EDTA. Además, hidrolizó proteínas de semillas de Glycine max, Phaseolus lunatus, Lupinus mutabilis y Erythrina edulis, obteniéndose fracciones peptídicas menores a 40 kDa. Esta proteasa recombinante se podría utilizar en la elaboración de hidrolizados proteicos funcionales a partir proteínas de distintas fuentes y residuos agroalimentarios.

The genus Pseudomonas is an important source of proteases; however, in the food industry the use of this bacterium is restricted. Cloning allows for the use of the proteolytic activity of Pseudomonas proteases through their production in innocuous microorganisms. Leguminous are protein-rich sources from which value-added compounds can be obtained through enzymatic hydrolysis. In this study, an alkaline and thermostable recombinant protease (PT4) from Pseudomonas aeruginosa M211 was cloned and characterized in order to obtain protein hydrolysates from leguminous. Therefore, protease gene was cloned into the pJET1.2 / blunt vector using E. coli DHalpha as a host. Analysis of protease partial nucleotide sequence showed 99% homology with Peptidases M4 Family from Pseudomonas aeruginosa. The molecular weight of the recombinant enzyme was 80 kDa, it was active and stable under alkaline and thermophilic conditions, presented an optimum pH and temperature of 8 and 60 °C, respectively, and was inhibited by EDTA. In addition, it hydrolysed Glycine max, Phaseolus lunatus, Lupinus mutabilis y Erythrina edulis proteins, obtaining peptide fractions less than 40 kDa. This recombinant protease could be used in the elaboration of functional hydrolysates using protein from different sources and agricultural waste.

Treinamento funcional versus treinamento de força tradicional: efeitos na dor muscular tardia e na aptidão funcional em idosas / Entrenamiento funcional versus entrenamiento de fuerza tradicional: efectos en el dolor muscular tardío y en la aptitud funcional en ancianas / Functional training versus traditional strength training: effects on muscle late pain and functional fitness in elderly

Objetivo: Apresentar um protocolo ensaio clínico randomizado avaliando o efeito dos treinamentos funcional e tradicional na dor, na aptidão física, na composição corporal, na saúde cardiovascular e na qualidade de vida em idosas sedentárias, como também para analisar o comportamento da dor muscular tardia ao longo das intervenções. Método: Ensaio clínico controlado, randomizado e cruzado, em indivíduos da terceira idade. As participantes serão subdivididas em três grupos distintos, a saber: grupo 1 - Treinamento funcional; grupo 2 - Treinamento tradicional; e grupo 3 - Alogamentos e praticas de relaxamento. Para análise da dor durante o periodo de intervenção, será utilizado um algômetro e a escala numérica de 11 pontos. Para avaliar a aptidão física, será utilizada a bateria Senior Fitness Test e testes complementares de força dinâmica máxima, isométrica e potência muscular. A composição corporal será avaliada por meio de bioimpedância tetrapolar. Bioquímica sanguínea será utilizada para a determinação das concentrações plasmáticas de glicose e insulina, perfil inflamatório, perfil lipídico e variáveis hemostáticas. A qualidade de vida será avaliada a partir do questionário (Whoqool-bref). Todas as variáveis serão analisadas na linha de base, após 8 e 12 semanas de acompanhamento em cada etapa. Resultados esperados: Antecipamos com este projeto uma possível alteração paradigmática nos modelos vigentes associados às orientações para exercício físico e manejo da dor muscular tardia, com a inclusão de recomendações direcionadas para a funcionalidade do indivíduo. Assim, nossa hipótese é que o Treinamento Funcional causará menor incidência de dor muscular tardia e será mais eficazes nas respostas adaptativas à aptidão funcional em idosas sedentárias

Objetivo: Presentar un protocolo de ensayo clínico aleatorizado evaluando el efecto de los entrenamientos funcional y tradicional en el dolor muscular, la aptitud física, en la composición corporal, en la salud cardiovascular y en la calidad de vida en mayores sedentarios, como también para analizar el comportamiento del dolor muscular tardío a lo largo de las intervenciones. Métodos: Ensayo clínico controlado, aleatorizado y cruzado, en mujeres mayores. Las participantes serán subdivididas en tres grupos distintos, a saber: grupo 1 - Entrenamiento funcional; grupo 2 - Entrenamiento tradicional; y grupo 3 - Estiramientos y prácticas de relajación. Para el análisis del dolor durante el período de intervención, se utilizará un algómetro y la escala numérica de 11 puntos. Para evaluar la aptitud física, se utilizará la batería Senior Fitness Test y pruebas complementarias de fuerza dinámica máxima, isométrica y potencia muscular. La composición corporal será evaluada por medio de bioimpedancia tetrapolar. La bioquímica sanguínea se utilizará para la determinación de las concentraciones plasmáticas de glucosa e insulina, perfil inflamatorio, perfil lipídico y variables hemostáticas. La calidad de vida se evaluará a partir del cuestionario (Whoqool-bref). Todas las variables se analizar en la línea de base, después de 8 y 12 semanas de seguimiento en cada etapa. Resultados esperados: Esperamos que este proyecto con un posible cambio de paradigma en los modelos actuales directrices para el ejercicio y la gestión de los departamentos de ultramar asociados, con la inclusión de recomendaciones dirigidas a la funcionalidad del individuo. Así, nuestra hipótesis es que el Entrenamiento Funcional causará menor incidencia de dolor muscular tardío y será más eficaz en las respuestas adaptativas a la aptitud funcional en ancianas sedentarias

Objective: To present a randomized clinical trial protocol evaluating the effect of functional and traditional training on muscle pain, physical fitness, body composition, cardiovascular health and quality of life in sedentary elderly women, as well as to analyze the behavior of late muscle pain throughout the interventions. Method: Controlled, randomized, crossover clinical trial in elderly individuals. Participants will be subdivided into three distinct groups, namely: group 1 - Functional training; group 2 - Traditional training; And group 3 - Practices and relaxation practices. To analyze the pain during the intervention period, an algometer and a numerical scale of 11 points will be used. To evaluate the physical fitness, the Senior Fitness Test and complementary tests of maximum dynamic force, isometric and muscular power will be used. The body composition will be evaluated by means of a four-pole bioimpedance. Blood chemistry will be used to determine the plasma concentrations of glucose and insulin, inflammatory profile, lipid profile and hemostatic variables. Quality of life will be assessed from the questionnaire (Whoqool-bref). All variables will be analyzed at the baseline, after 8 and 12 weeks of follow-up at each stage. Expected results: We anticipate with this project a possible paradigmatic change in the current models associated to the guidelines for physical exercise and management of late muscle pain, with the inclusion of recommendations directed to the individual's functionality. Thus, our hypothesis is that Functional Training will cause lower incidence of late muscle pain and will be more effective in the adaptive responses to functional fitness in sedentary elderly women

Migalina e poliaminas: Interferência na adesão de Escherichia coli enteropatogênica ( EPEC) em células HEP-2

As poliaminas naturais tais como espermidina, espermina e putrecina estão presentes em todos os organismos vivos e desempenham funções importantes que ainda não foram totalmente esclarecidas. Essas moléculas podem ligar-se a DNA e RNA, regulando síntese de proteínas, diferenciação celular e podem modular sinais intracelulares e respostas inflamatórias. Em certas espécies de bactérias, as poliaminas são utilizadas para a invasão na célula hospedeira, mutações nos genes de poliaminas podem modificar a interação de células hospedeiras. A adesão de Escherichia coli em células intestinais é essencial para o estabelecimento da infecção. Vários fatores de virulência estão envolvidos na adesão de EPEC típica a célula hospedeira, incluindo o Bfp. A Migalina sintética, análoga da espermidina, é uma bis-acilpoliamina N1,N8-bis (2,5- dihidroxibensoil) isolada de hemócitos da aranha Acanthoscurria gomensiana que foi descrita com atividade microbicida contra E.coli SBS363. Neste trabalho investigamos o efeito da Migalina e poliaminas na adesão de E. coli enteropatogênica (EPEC), cepas JPN15 ( Bfp-) e cepa selvagem E2348/69 à células epiteliais HEp-2. Dados iniciais mostraram que a Migalina reduziu a adesão da cepa JPN15 a células HEp-2, variando a concentração de acordo com o lote. A participação das poliaminas neste mecanismo foi comprovada através da inibição de importantes enzimas responsáveis pelo controle da biossíntese de poliaminas em células eucarióticas, que reduziram a adesão de EPEC JPN15 a células HEp-2. Isto sugere a participação das poliaminas no processo de adesão de EPEC à célula hospedeira e abre a perspectiva do uso de análogos de poliaminas como a Migalina no estudo de adesão de bactérias nas células hospedeiras.

Medicamentos de Administración Parenteral: Recomendaciones de preparación, administración y estabilidad / Parenteral administration medicines: Recommendations of preparation, administration and stability

Objetivo: Elaborar unas recomendaciones de preparación de medicamentos de administración parenteral (MAP) para valorarla posibilidad de transferir su preparación, desde las unidades de enfermería en planta de hospitalización al servicio de farmacia (SF).Método: Se procede a elaborar una tabla de estabilidades delos medicamentos incluidos en la guía farmacoterapéutica del Hospital, aplicando la Guía USP (Pharmaceutical compounding Sterile Preparations) y la Guía de buenas prácticas de preparación de medicamentos en los servicios de farmacia hospitalaria. Se recopiló información sobre las MAP: método de preparación, compatibilidad, conservación, período de validez, modo de administración y tipo de envase. Los datos se obtuvieron mediante consulta de las fichas técnicas, laboratorios, revisión bibliográfica y otras bases de datos. Resultados: Tras revisar 209 fármacos se elaboró un listado de recomendaciones. Según los datos obtenidos, las MAP se prepararán de la siguiente forma: 89 serán preparadas desde el SF,62 en unidad de enfermería en planta de hospitalización pues son medicamentos que requieren administración inmediata y 58 ya van acondicionados para su administración por la industria. De los 62 fármacos que se prepararán por enfermería, en 14 de ellos las dosis siguientes se prepararán desde el SF. Por lo tanto de los 209 fármacos sólo 48 se prepararán exclusivamente en la unidad de enfermería. Conclusiones: Desde el SF se ha establecido un método normalizado de preparación, conservación, administración y período de validez de MAP. La preparación de MAP en SF ampliaría su tiempo de conservación, al tener en cuenta la estabilidad fisicoquímica, el nivel de riesgo y la vulnerabilidad del preparado a la contaminación microbiológica. La información aportada contribuirá a una disminución de errores asociados al proceso de preparación y administración de MAP

Objective: To develop recommendations for the preparation of parenteral drugs (MAP), to assess the transferability of their preparation, from nursing units in the hospital ward to the pharmacy service (SF).Method: A table of stabilities of parenteral drugs included in the pharmacotherapeutic guideline was developed using the american and spanish guidelines. Information about MAP was collected (method of preparation, support, maintenance, validity, administration specifications and packaging) by consulting product technical sheets, pharmaceutical industries, literature review and databases. Results: After reviewing 209 drugs, a list of recommendations was developed. According to the data, MAP will be prepared as follows: 89 drugs will be prepared from SF, 62 drugs at nursing units because of its immediate administration requirement and 58 are already packed for its administration by the industry. Of these 62 drugs prepared a nursing units, 14 of them will be prepared in the following doses by the SF. Therefore, 48 drugs will be prepared at nursing units from the 209 parenteral drugs reviewed. Conclusions: A standardized method of preparation, storage, administration and validity of MAP was established by the SF. The preparation of MAP in the SF extends its shelf life, by considering physicochemical stability, level of risk and product vulnerability to microbiological contamination. The information provided will contribute to a reduction of errors associated with the preparation and administration of MAP

Relationship of IL-1 and TNF-α polymorphisms with Helicobacter pylori in gastric diseases in a Brazilian population

It is well known that the risk of development of gastric cancer (GC) in Helicobacter pylori-infected patients depends on several factors. Thus, the aim of this study was to investigate the effect of proinflammatory cytokine gene polymorphisms for IL-1β, IL-1RN and TNF-α on the development of GC in a Brazilian population. A total of 202 biopsies obtained from Brazilian patients with chronic gastritis and GC were included in the study. Infection with H. pylori cagA+ was determined by the polymerase chain reaction (PCR) as previously described. IL-1β, IL-1RN and TNF-α polymorphism genotyping was performed by restriction fragment length polymorphism PCR. Associations between gene polymorphisms, clinical diseases and virulence markers were evaluated using either the χ² test or the Fisher exact test. Our results demonstrated that the IL-1β -511 C/C and IL-1β -511 C/T alleles were associated with chronic gastritis in H. pylori-positive patients (P = 0.04 and P = 0.05, respectively) and the IL-1β -511 C/C genotype was associated with GC (P = 0.03). The frequency of IL-1RN alleles from patients with chronic gastritis and GC indicated that there was no difference between the genotypes of the groups studied. Similar results were found for TNF-α -308 gene polymorphisms. Our results indicate that the IL-1β -511 C/C and C/T gene polymorphisms are associated with chronic gastritis and GC development in H. pylori-infected individuals.

Herbivory among habitats on the Neotropical tree Cnidoscolus quercifolius Pohl. in a seasonally deciduous forest / Herbivoria entre habitats em uma árvore neotropical Cnidoscolus quercifolius Polh. em uma floresta estacional decidual

Our goal was to identify herbivory patterns from two insect guilds associated with Cnidoscolus quercifolius in a tropical deciduous forest in northeastern Brazil. We sampled four different habitats: (1) forest edge, (2) mesic (near to the perennial water source), (3) forest interior and (4) rupestrian fields. Habitat edge had lower leaf damage than rupestrian, mesic and forest interior habitats. Nevertheless, abundance of galls at the edge habitat was higher than at mesic, forest interior and/or rupestrian habitats. There was no difference in gall mortality by natural enemies among the four habitats sampled, demonstrating the absence of any influence of top-down controls related to abundance of galls. Trophic relationships were not related to the patterns of distribution among habitats of two insect herbivorous guilds associated with C. quercifolius. Our results demonstrated that environmental heterogeneity of dry forests can significantly alter important ecological interactions and experimental studies are needed to better understand the mechanisms responsible for differences in herbivory among habitats.

Nosso objetivo foi identificar os padrões de herbivoria de duas guildas de insetos herbívoros associadas à Cnidoscolus quercifolius, em uma floresta estacional seca do nordeste do Brasil. Foram amostrados quatro diferentes habitats: (1) borda florestal; (2) mésico (próximo a uma fonte de água perene); (3) interior florestal, e (4) rupestre. O habitat borda apresentou uma quantidade de dano foliar inferior aos habitats rupestre, mésico e interior florestal. Diferentemente, a abundância de galhas no habitat borda foi superior aos habitats mésico, interior florestal e rupestre. Não houve diferença na mortalidade de galhas por inimigos naturais entre os quatro habitats, o que revela ausência de influência de controles top-down relacionados à abundância de galhas. Relações tróficas não parecem influenciar os padrões de distribuição entre habitats das duas guildas de insetos herbívoros associadas à C. quercifolius. Nossos resultados demonstram que a heterogeneidade ambiental de florestas secas pode alterar significativamente importantes interações ecológicas e que trabalhos experimentais são necessários para uma melhor compreensão dos mecanismos responsáveis pelas diferenças nas taxas de herbivoria entre habitats.

Control metabólico de la diabetes mellitus en relación con la calidad de las historias clínicas / Metabolic control of diabetes mellitus in relation to the quality of clinical records

Objetivo. Se pretende averiguar si existe relación entre la calidad de la historia clínica (HC) de atención primaria y el control metabólico de pacientes con diabetes mellitus (DM). Diseño. Observacional, retrospectivo. Emplazamiento. Quince centros de salud del Área de Segovia. Pacientes. Un total de 315 pacientes diabéticos, seleccionados aleatoriamente entre los que tienen registro del tipo de DM, fecha y resultado de al menos una HbA1c y tratamiento en el momento de la última HbA1c. Resultados. Se mide la calidad de las HC por la media de registro, en los 13 meses anteriores a la última HbA1c, de los siguientes ítems: peso y talla, pulsos periféricos, sensibilidad, examen de los pies, creatinina, proteinuria, microalbuminuria, glucemias, fondo de ojo, ECG, consejo de dieta, tabaco y alcohol. Se recogen otras variables que pueden condicionar la HbA1c, patologías crónicas y patologías relacionadas con la DM. De los pacientes tratados con dieta o antidiabéticos orales (ADO), los de HC de calidad 49 por ciento presentan una HbA1c media de 7,40 por ciento, mientras los de HC de calidad 50 por ciento tienen una media de 6,94 por ciento (diferencia, 0,46; IC del 95 por ciento, 0,03-0,90; p = 0,038). Esta disminución no es atribuible a diferencias en edad, género, años de evolución o IMC. El riesgo de tener una HbA1c 7,5 por ciento es el doble en pacientes con HC de calidad 49 por ciento, que en los de HC de calidad 50 por ciento (OR, 2,06; IC del 95 por ciento, 1,14-3,72). En los tratados con insulina, no se ha demostrado asociación entre calidad de HC y HbA1c. Conclusiones. El seguimiento de las recomendaciones de actuación clínica se asocia a mejor control metabólico en diabéticos tratados con dieta-ADO. Esta asociación no se ha comprobado en los tratados con insulina (AU)