Evaluation of the brain and kidney renin-angiotensin system and oxidative stress in neonatal handled rats.

The aim of this study was to test the hypothesis that the renin-angiotensin system (RAS) components, as well as the oxidative stress system, would respond to early environmental changes. Thus, we have evaluated the effects of neonatal handling on both brain and kidney RAS and oxidative stress. Pups were divided into two groups: nonhandled and handled. The procedure consisted of handling them for 1 min/day in the first 10 days of life. On days 1, 5, and 10, animals were killed by decapitation. Blood samples were collected and the brain and kidneys were removed. Renin, AT(1), and AT(2) mRNA expression were evaluated through RT-PCR. Angiotensin II (ANG II) serum concentration was also measured. An increased ANG II concentration, brain and kidney AT(2) mRNA expression were demonstrated. The kidney mRNA AT(1) expression was decreased. There was also a kidney lipid peroxidation increase and a brain superoxide dismutase and catalase decrease. In conclusion, handling in the neonatal period induces the activation of the angiotensinergic system, as well as modulates its mRNA receptor expression. The oxidative stress balance system seems not to be involved.

Micronuclei induced by reverse transcriptase inhibitors in mononucleated and binucleated cells as assessed by the cytokinesis-block micronucleus assay.

This study evaluated the clastogenic and/or aneugenic potential of three nucleoside reverse transcriptase inhibitors (zidovudine - AZT, lamivudine - 3TC and stavudine - d4T) using the cytokinesis-block micronucleus (CBMN) assay in human lymphocyte cultures. All three inhibitors produced a positive response when tested in binucleated cells. The genotoxicity of AZT and 3TC was restricted to binucleated cells since there was no significant increase in the frequency of micronuclei in mononucleated cells. This finding indicated that AZT and 3TC caused chromosomal breakage and that their genotoxicity was related to a clastogenic action. In addition to the positive response observed with d4T in binucleated cells, this drug also increased the frequency of micronuclei in mononucleated cells, indicating clastogenic and aneugenic actions. Since the structural differences between AZT and 3TC and AZT and d4T involve the 3' position in the 2'-deoxyribonucleoside and in an unsaturated 2',3',dideoxyribose, respectively, we suggest that an unsaturated 2', 3', dideoxyribose is responsible for the clastogenic and aneugenic actions of d4T.

Micronuclei induced by reverse transcriptase inhibitors in mononucleated and binucleated cells as assessed by the cytokinesis-block micronucleus assay

This study evaluated the clastogenic and/or aneugenic potential of three nucleoside reverse transcriptase inhibitors (zidovudine - AZT, lamivudine - 3TC and stavudine - d4T) using the cytokinesis-block micronucleus (CBMN) assay in human lymphocyte cultures. All three inhibitors produced a positive response when tested in binucleated cells. The genotoxicity of AZT and 3TC was restricted to binucleated cells since there was no significant increase in the frequency of micronuclei in mononucleated cells. This finding indicated that AZT and 3TC caused chromosomal breakage and that their genotoxicity was related to a clastogenic action. In addition to the positive response observed with d4T in binucleated cells, this drug also increased the frequency of micronuclei in mononucleated cells, indicating clastogenic and aneugenic actions. Since the structural differences between AZT and 3TC and AZT and d4T involve the 3' position in the 2'-deoxyribonucleoside and in an unsaturated 2',3',dideoxyribose, respectively, we suggest that an unsaturated 2', 3', dideoxyribose is responsible for the clastogenic and aneugenic actions of d4T.

Serologic and molecular profile of anti-HBc-positive blood bank donors in an area of low endemicity for HBV.

Hepatitis B virus (HBV) infection leaves serological markers that indicate prior contact with the virus or an occult infection. The aim of this study was to determine the profile of HBV markers of individuals from a region of low HBV endemicity excluded from blood donation due to the presence of total anti-HBc antibodies but who tested negative for HBV surface antigen (HBsAg). The profile of 244 subjects exclusively anti-total hepatitis B core (anti-total HBc) reactive was determined. Markers such as anti-HBsAg, HBeAg (HBV core antigen) and anti-HBe (antibody to hepatitis Be antigen) were determined, and HB viral DNA (HBV-DNA) was identified by PCR analysis. Overall, 85.7% of the subjects had an anti-HBs (hepatitis B surface antigen antibody) titer higher than 10 IU/L; 154 samples were negative for HBeAg and 66.5% were reactive for anti-HBe. All samples were negative for HBV-DNA (n = 241). We found a significant association between the anti-HBe and anti-HBs titers (P = 0.026). Most individuals from a low endemic area for HBV have shown anti-HBs titers that confer immunity against HBV, even though they were negative for HBV-DNA. In the light of a shortage of donated blood worldwide, we suggest that special measures should be considered that would facilitate the possible use of these rejected blood units in areas of low endemicity for HBV.

Determinação do limite mínimo de detecção da técnica de pcr "semi-nested" para Neisseria meningitidis, Haemophilus influenzae e Streptococcus pneumaniae / Determination of detection minimum limit by polymerase chain reaction seminested to Neisseria meningitidis, Haemophilus influenzae and Streptococcus pneumoniae

Mundialmente, as meningites bacterianas constituem importante causa de morbimortalidade na infância, exigindo um diagnóstico rápido e preciso no manejo dos pacientes. O objetivo deste estudo foi determinar o limite mínimo de detecção da técnica de PCR “semi-nested” “in house” para os três principais agentes causadores de meningites bacterianas: Neisseria meningitidis, Haemophilus influenzae e Streptococcus pneumoniae. Diluições seriadas de cada bactéria foram submetidas à técnica de PCR “semi-nested” para detecção simultânea dos três microrganismos, pela amplificação de uma região do gene bacteriano 16S rRNA. Os produtos finais foram amplicons específicos de diferentes pesos moleculares para N. meningitidis, H. influenzae e gênero-específico para Streptococcus sp. A forma de visualização dos resultados foi através de eletroforese em gel de agarose para a detecção dos produtos da PCR. Determinou-se que o limite mínimo de detecção para Neisseria meningitidis, Haemophilus influenzae e Streptococcus pneumoniae foi respectivamente de 103, 102 e 104 UFC/mL

Comportamento da hepatite viral C nos pacientes em programa de hemodiálise do Hospital São Lucas de PUCRS / Behavior of viral hepatitis C in patients from hemodialysis program from Hospital São Lucas da PUCCRS

Objetivos: Avaliar a prevalência de anticorpos positivos para hepatite C nos pacientes em programa de hemodiálise, quanto à permanência em hemodiálise, realização transplante renal, mortalidade e influência do vírus da hepatite C sobre mortalidade entre aqueles com PCR para HCV-RNA positivo. Métodos: Foram identificados os pacientes em programa de hemodiálise no Hospital São Lucas da PUCRS em maio de 2006, analisando a sorologia positiva para hepatite C, através de anti-HCV reagente. Também foram estudados, retrospectivamente, 71 pacientes que estavam em hemodiálise no período de 2000 a 2002 e que participaram de estudo prévio a respeito de prevalência de anti-HCV positivo e/ou HCV-RNA positivo. Foi realizado o seguimento destes pacientes através de revisão de prontuário médico. Os resultados foram apresentados de forma descritiva e comparados com a literatura. Resultados: 70 pacientes estavam em programa de hemodiálise no mês de maio de 2006, entre os quais 7 (10%) tinham anticorpos positivos para hepatite C. Dos 71 pacientes que participaram do estudo entre 2000 e 2002 , 24(33,8%) permaneciam em acompanhamento no HSL-PUCRS, sendo que 12 (16,9%) em programa de hemodiálise e 12 (16,9%) realizaram transplante renal. 22 pacientes (31%) foram a óbto, sendo que as causas mais frequentes foram as cardiovasculares (36,3%). 25 pacientes (35,2%) perderam o vículo com a instituição. Entre os 71 pacientes, 15 apresentaram anticorpos para virus C e 7 tinham sorologia (anti-HCV) negativa. Entretanto, a detecção do HCV-RNA era positiva. Os restantes tinham tanto anti-HCV qunto HCV-RNA neativos. Conclusões: A prevalência atual e anticorpos positivos para hepatite C nos pacientes em hemodiálise não se alterou significaivamente em relação ao período de 2002. Não foi possível identificar influência da infecção pelo vírus da hepatite C na mortalidade e no prognóstico dos pacientes em programa de hemodiálise. A causa de óbto mais frequentemente encontrada foi a cardiovascular.

[Rhinovirus and acute bronchiolitis in young infants]. / Bronquiolite aguda por rinovírus em lactentes jovens.

OBJECTIVE: To determine the prevalence of rhinovirus infection in hospitalized young infants with acute bronchiolitis. METHODS: Hospitalized children with acute bronchiolitis admitted to the Hospital São Lucas/PUCRS between May and September 2002 were selected prospectively. Nasopharyngeal samples were assayed for respiratory syncytial virus, parainfluenza, influenza and adenovirus by immunofluorescence. For rhinovirus test a reverse transcription-polymerase chain reaction for picornavirus was used, followed by hybridization with rhinovirus specific probes. RESULTS: Forty-five patients were selected for the study. The median age of the subjects studied was 2 months. Positive samples for respiratory viruses were found in 35/45 (77.8%) subjects and 7/35 (20%) patients had dual infection. Respiratory syncytial virus was detected in 33/35 (94%) cases. Rhinovirus was detected in 6/35 patients (17%). CONCLUSIONS: Rhinovirus was the second most common agent detected in nasal secretions from young infants hospitalized with acute bronchiolitis.

Bronquiolite aguda por rinovírus em lactentes jovens / Rhinovirus and acute bronchiolitis in young infants

OBJETIVO: Determinar a prevalência de infecção por rinovírus em lactentes menores de 6 meses hospitalizados por bronquiolite aguda. MÉTODOS: Foram selecionados de forma prospectiva lactentes hospitalizados com diagnóstico de bronquiolite aguda, no Hospital São Lucas da Pontifícia Universidade Católica do Rio Grande do Sul, no período entre maio e setembro de 2002. Foi pesquisada a presença de vírus respiratórios no aspirado nasofaríngeo (ANF), através de imunofluorescência direta para vírus sincicial respiratório, parainfluenza, influenza e adenovírus. Para detecção do rinovírus, foi utilizada a reação de transcrição reversa, seguida de reação em cadeia da polimerase, específicas para picornavírus, seguidas de hibridização com sonda específica para rinovírus. RESULTADOS: Foram selecionados 45 lactentes hospitalizados com diagnóstico de bronquiolite aguda. A mediana da idade dos pacientes selecionados foi de 2 meses. Foram encontradas amostras positivas para vírus respiratórios em 35/45 (77,8 por cento) casos. Foi detectado mais de um vírus em 7/35 (20 por cento) amostras. Das amostras positivas, o vírus sincicial respiratório foi detectado em 33/35 (94 por cento) casos. O rinovírus foi detectado em 6/35 casos (17 por cento). CONCLUSÕES: O rinovírus foi o segundo agente mais freqüentemente detectado em secreção nasal de lactentes jovens hospitalizados por bronquiolite aguda.

Angiotensin converting enzyme ( ACE ) DD genotype: relationship with venous thrombosis

O troemboembolismo venoso (TEV) é uma doenca multifatorial associada com fatores de risco adquiridos e hereditários. Vários polimorfismos, tais como fator V de Leiden, mutacão G20210A da protrombina e as deficiências de proteína C, proteína S e anti-trombina são considerados fatores de risco para TEV. A enzima conversora da angiotensina (ECA) afeta a hemostasia diminuindo a fibrinólise. O polimorfismo no gene da ECA, caracterizado pela insercão/delecão de um fragmento de 287 pb no intron16, está relacionado a variacões nos níveis séricos da enzima. O genótipo DD foi associado com aumento de risco para TEV. Este estudo examinou a freqüência dos alelos I e D e a sua associacão com trombose venosa em um grupo de indivíduos do Sul do Brasil. Foram analisados 71 pacientes com trombose venosa profunda e/ou tromboembolismo pulmonar e 71 indivíduos sem história de trombose. A genotipagem foi realizada através da reacão em cadeia da polimerase. As freqüências do alelo D e do genótipo DD foram, respectivamente, 51,4% e 22,5% para os pacientes, e 64,7% e 45,0% para os controles. A razão de chance (odds ratio = OR) para a hipótese dominante (genótipos DD+ID versus genótipo II) foi 0,75 (IC 95%; 0,29-1,93) e a OR para a hipótese recessiva (genótipo DD versus genótipos ID+II) foi 0,35 (IC 95%; 0,16-0,78). Concluindo, nossos resultados sugerem que o genótipo DD não representa um fator de risco para TEV e pode exercer um efeito protetor para trombose venosa.

Análise da prevalência do papilomavírus humano em relação ao grau da lesão cervical / Analysis of human papillomavirus prevalence in relation to the grade of cervical lesion

O objetivo deste estudo é demonstrar a prevalência do papilomavírus humano em pacientes com câncer cervical (CA), lesão escamosa intra-epitelial de alto grau (HSIL), lesão escamosa intraepitelial de baixo grau (LSIL) e em pacientes com citologia e histologia cervicais normais (Normal). Foram arroladas no estudo pacientes referidas à nossa instituição para realizarem exame colposcópico. As pacientes deste estudo foram submetidas à coleta de amostras cervicais para exames citológicos, pesquisa de HPV (PCR) e histologia. 142 pacientes encaminhadas a nossa instituição para avaliação de anormalidades cervicais se submeteram à colposcopia com biópsia, teste do HPV e citologia. O HPV foi detectado através de PCR em 82% das amostras com CA (18/22), em 83% das amostras com HSIL (39/47), em 40% de LSIL (6/15) e em 10% das amostras normais (6/58). Nossos resultados mostraram uma relação significativa entre a presença do HPV e o grau da lesão cervical (p < 0,05), concordando com os dados da literatura. A importância do conhecimento da prevalência do HPV em pacientes com LSIL e normais pode residir no cuidado mais apurado que estas possam necessitar no seguimento, com colposcopia, citologia e rastreamento para o HPV.

O papilomavírus humano nas lesões pré-malignas e malignas da cérvice uterina: aspectos imunológicos e moleculares / The human papillomavirus in premalignant and malignant lesions of the uterine cervix: immunologic and molecular aspects

Objetivos: Salientar a importância do conhecimento sobre a infecção pelo papilomavírus humano (HPV)na cérvice uterina. Revisar os aspectos imunológicos e moleculares da interação HPV e células do colo uterino. Métodos: Foi realizada revisão bibliográfica através do Public Medline e consulta a livros texto sobre o asssunto. Conclusão: O HPV provoca alterações na cérvice uterina, através da interação com proteína do hospedeiro, que levam ao desenvolvimento de lesões pré-malignas e malignas. A infecção viral é um aspecto essencial para este processo de transformação, todavia não é único. A resposta imunológica do hospedeiro pode influenciar na progressão da infecção pelo HPV