Chromosome structure in man and Amphibia-Anura, restriction enzymes

Cromossomos metafásicos fixados de humano e de anuros poliplóides (Odontophynus amricanus, 4n = 44) foram tratados com enzimas de restriçäo MspI, Hpa II, EcoRI, Bgl II, Dra I e Hae III, seguidos pela coloraçäo Giemsa. Msp I (C CGG) e Hae III (GG CC) produziram bandas similares a G nos cromossomos humanos, indicando que as bandas säo causadas pela remoçäo de classes específicas de DNA ricas em CG. Contudo, padröes comparáveis de banda G foram também obtidos nos cromossomos humanos com Eco RI (G AATTC), Bgl II (A GATCT) e Dra I (TTT AAA), cujos sítios de digestäo näo revelam abundância particular em CG. Nos anuros 4n, Msp I removeu DNA cromossômico do braço longo de dois a três homólogos do grupo I (lq), da constricçäo secundária do grupo 11 bem como as bandas centroméricas, teloméricas e intercalares. Essas duas näo foram removidas pela Hpa II (C CGG), a qual näo corta DNA metilado. Eco RI causou bandas 2q e 3q. Os resultados sugerem que: 1. a açäo dessas enzimas depende da acessibilidade da enzima a regiöes cromossômicas com compactaçöes diferentes do DNA; 2. a obtençäo difícil de bandas intersticiais em Anura pode resultar da menor quantidade de seqüências ricas em CG provavelmente arranjadas em cachos menores, ou da maior condensaçäo cromatínica nos cromômeros

Extrachromosomal circular DNA-containing structures in lymphocytes of normal and x-fragile individuals: electron microscopy

Por microscopia eletrônica, evidenciou-se seqüências de ADN ricas em CG, ativas na transcriçäo de ARN em "spreads" de linfócitos in-vitro, de indivíduos normais e com fra-X. Esta classe de DNA ocorre em dois estados dentro dos núcleos. Apresenta-se como círculos extracromossômicos ou em associaçäo com alças cromatínicas "multiforked". Assumiu-se que os círculos säo formados pelo anelamento de segmentos excisos, neosintetizados nas alças cromatínicas complexas. As configuraçöes encontradas levaram à discussäo sobre a ocorrência eventual da amplificaçäo gênica ou de elementos similares a transposons em células humanas somáticas

Active genes visualized in pachytene and lymphocyte nuclei from normal and affected individuals: Ag-As-staining, light and electron microscopy and high-resolution autoradiography

Aglomerados de genes nucleolares transcritos foram evidenciados por microscopia óptica e eletrônica como grânulos de 0.1 a 1.0 micron m, corados com prata e ácido fosfotungstico alcoólico (PTA), em espermatócitos e linfócitos humanos. Os grânulos encontrados nos núcleos paquitênicos acham-se aglomerados numa regiäo nuclear distinta, contendo bivalentes autossômicos associados e o par sexual XY. Um grânulo corado pela prata foi encontrado estreitamente relacionado com o bivalente sexual XY. Esta específica regiäo nuclear foi designada "corpo cromatínico" (c cr), neste trabalho. Os grânulos, encontrados nos nucléolos de linfócitos, correspondem a aglomerados de sítios ativos em transcriçäo, tendo fibrilas enroladas de ribonucleoproteínas (RNP), as quais incorporam uridina [3H], em experimentos de marcaçäo de pulso. Os genes ativos foram encontrados nos componentes fibrilares do nucléolo e seus níveis de transcriçäo, estimados pela quantidade de grânulos corados, variaram em indíviduos normais e afetados e durante o tratamento com ácido fólico