Influence of male-to-female ratio and climatic conditions on the reproductive performance of Anglo Nubian goats / Influência da proporção macho/fêmea e condições climáticas sobre a performance reprodutiva de caprinos Anglo-Nubianos

The objective of this study was to test the “male effect” on the reproductive performance of Anglo Nubian does (n = 180), aged between 24 and 60 months, under different male-to-female ratios (1:20 – T20, 1:30 – T30, and 1:40 – T40) and climatic conditions (dry season – DS, and rainy season – RS). Does were randomly distributed into three groups (T20, T30, and T40) and were isolated from bucks at a distance of 300 m for 60 days before the start of the experiments. The first manifestation of estrous during the DS occurred 6.83 ± 4.54 (T20), 6.72 ± 4.56 (T30) and 7.05 ± 5.23 (T40) days following the onset of the breeding season (P>0.05). In the RS, onset of estrous was observed 6.60 ± 4.74 (T20), 6.70 ± 4.43 (T30) and 7.46 ± 4.54 (T40) days after the beginning of the breeding season (P>0.05). Estrous induction in females during the DS occurred in 95% (T20), 80% (T30), and 75.5% (T40) of all females. During the RS, estrous detection reached 100% (T20), 100% (T30), and 97.5% (T40) of all females, with no difference between all RS and DS groups. Estrous synchronization during the DS occurred in 35.00% (T20), 36.66% (T30), and 32.50% (T40) of all females, for an average occurrence of 34.72%. During the RS, synchronization occurred in 65% (T20), 70% (T30) and 62.25% (T40) of all females, for an average occurrence of 65.75%; no difference was detected between the RS and the DS. Pregnancy rates in the DS groups were 65.0% (T20), 70.0% (T30), and 62.5% (T40), while pregnancy rates in the RS were 90.0% (T20), 86.6% (T30), and 95.0% (T40). No difference was observed for conception rates between any of the RS and DS groups. Prolificacy during the DS was 1.30 (T20), 1.30 (T30) and 1.35 (T40), while in the RS prolificacy was 1.29 (T20), 1.25 (T30) and 1.30 (T40). Thus, the male effect can be used effectively for goats under 1:20–1:40 male-to-female ratios in a 45-day mating season under varying climatic conditions.

O objetivo do presente trabalho foi testar o “efeito macho” sobre o desempenho reprodutivo de cabras Anglo Nubianas (n = 180), com idade entre 24 e 60 meses, sob diferentes proporções macho:fêmea (1:20 - T20, 1:30 - T30, e 01:40 - T40) e condições climáticas (estação seca - ES, e estação chuvosa - EC). As fêmeas foram distribuídas aleatoriamente em três grupos (T20, T30 e T40), e foram mantidas separadas dos machos a distância de 300 m por 60 dias antes do início do experimento. A primeira manifestação de estro na ES ocorreu 6,83 ± 4,54 (T20), 6,72 ± 4,56 (T30) e em 7,05 ± 5,23 (T40) dias após o início da época de reprodução (P>0,05). Na EC, o início do estro foi observado 6,60 ± 4,74 (T20), 6,70 ± 4,43 (T30) e 7,46 ± 4,54 (T40) dias após o início da época de reprodução (P>0,05). A indução de estro na ES chegou em 95% (T20), 80% (T30), e 75,5% (T40) das fêmeas. Na EC, a detecção do estro atingiu 100% (T20), 100% (T30), e 97,5% (T40), sem diferença entre as épocas do ano. Sincronização de estro durante ES ocorreu em 34,72%, 35,00% (T20), 36,66% (T30), e 32,5 % (T40) das fêmeas. Na EC, a sincronização ocorreu em 65,75% das fêmeas, 65% (T20), 70% (T30) e 62,25% (T40), sem apresentar diferença estatística (P>0,05) entre EC e ES. A taxa de gestação nos grupos ES foi de 65,0% (T20), 70,0% (T30), e 62,5% (T40), enquanto que em EC foi de 90,0% (T20), 86,6% (T30), e de 95,0% (T40), sem diferença estatística (P>0,05) entre EC e ES. A prolificidade durante ES foi 1,30 (T20), 1,30 (T30) e 1,35 (T40) e na EC foi 1,29 (T20), 1,25 (T30) e 1,30 (T40). Em conclusão, o efeito macho pode ser utilizado com as proporções 1:20-1:40 macho:fêmea, em estação de monta de 45 dias de duração sob condições climáticas diferentes.

Influence of male-to-female ratio and climatic conditions on the reproductive performance of Anglo Nubian goats / Influência da proporção macho/fêmea e condições climáticas sobre a performance reprodutiva de caprinos Anglo-Nubianos

The objective of this study was to test the “male effect” on the reproductive performance of Anglo Nubian does (n = 180), aged between 24 and 60 months, under different male-to-female ratios (1:20 T20, 1:30 T30, and 1:40 T40) and climatic conditions (dry season DS, and rainy season RS). Does were randomly distributed into three groups (T20, T30, and T40) and were isolated from bucks at a distance of 300 m for 60 days before the start of the experiments. The first manifestation of estrous during the DS occurred 6.83 ± 4.54 (T20), 6.72 ± 4.56 (T30) and 7.05 ± 5.23 (T40) days following the onset of the breeding season (P>0.05). In the RS, onset of estrous was observed 6.60 ± 4.74 (T20), 6.70 ± 4.43 (T30) and 7.46 ± 4.54 (T40) days after the beginning of the breeding season (P>0.05). Estrous induction in females during the DS occurred in 95% (T20), 80% (T30), and 75.5% (T40) of all females. During the RS, estrous detection reached 100% (T20), 100% (T30), and 97.5% (T40) of all females, with no difference between all RS and DS groups. Estrous synchronization during the DS occurred in 35.00% (T20), 36.66% (T30), and 32.50% (T40) of all females, for an average occurrence of 34.72%. During the RS, synchronization occurred in 65% (T20), 70% (T30) and 62.25% (T40) of all females, for an average occurrence of 65.75%; no difference was detected between the RS and the DS. Pregnancy rates in the DS groups were 65.0% (T20), 70.0% (T30), and 62.5% (T40), while pregnancy rates in the RS were 90.0% (T20), 86.6% (T30), and 95.0% (T40). No difference was observed for conception rates between any of the RS and DS groups. Prolificacy during the DS was 1.30 (T20), 1.30 (T30) and 1.35 (T40), while in the RS prolificacy was 1.29 (T20), 1.25 (T30) and 1.30 (T40). Thus, the male effect can be used effectively for goats under 1:20–1:40 male-to-female ratios in a 45-day mating season under varying climatic conditions.(AU)

O objetivo do presente trabalho foi testar o “efeito macho” sobre o desempenho reprodutivo de cabras Anglo Nubianas (n = 180), com idade entre 24 e 60 meses, sob diferentes proporções macho:fêmea (1:20 - T20, 1:30 - T30, e 01:40 - T40) e condições climáticas (estação seca - ES, e estação chuvosa - EC). As fêmeas foram distribuídas aleatoriamente em três grupos (T20, T30 e T40), e foram mantidas separadas dos machos a distância de 300 m por 60 dias antes do início do experimento. A primeira manifestação de estro na ES ocorreu 6,83 ± 4,54 (T20), 6,72 ± 4,56 (T30) e em 7,05 ± 5,23 (T40) dias após o início da época de reprodução (P>0,05). Na EC, o início do estro foi observado 6,60 ± 4,74 (T20), 6,70 ± 4,43 (T30) e 7,46 ± 4,54 (T40) dias após o início da época de reprodução (P>0,05). A indução de estro na ES chegou em 95% (T20), 80% (T30), e 75,5% (T40) das fêmeas. Na EC, a detecção do estro atingiu 100% (T20), 100% (T30), e 97,5% (T40), sem diferença entre as épocas do ano. Sincronização de estro durante ES ocorreu em 34,72%, 35,00% (T20), 36,66% (T30), e 32,5 % (T40) das fêmeas. Na EC, a sincronização ocorreu em 65,75% das fêmeas, 65% (T20), 70% (T30) e 62,25% (T40), sem apresentar diferença estatística (P>0,05) entre EC e ES. A taxa de gestação nos grupos ES foi de 65,0% (T20), 70,0% (T30), e 62,5% (T40), enquanto que em EC foi de 90,0% (T20), 86,6% (T30), e de 95,0% (T40), sem diferença estatística (P>0,05) entre EC e ES. A prolificidade durante ES foi 1,30 (T20), 1,30 (T30) e 1,35 (T40) e na EC foi 1,29 (T20), 1,25 (T30) e 1,30 (T40). Em conclusão, o efeito macho pode ser utilizado com as proporções 1:20-1:40 macho:fêmea, em estação de monta de 45 dias de duração sob condições climáticas diferentes.(AU)

Avaliação de embriões ovinos provenientes de oócitos submetidos a estresse calórico durante a maturação in vitro / Evaluation of sheep oocytes submitted to heat stress induced during in vitro maturation

Neste trabalho foi avaliado o efeito do estresse calórico durante a maturação de oócitos sobre a produção in vitro de embriões ovinos. Os ovários foram obtidos em abatedouro e os oócitos colhidos de folículos de 2 a 6 mm de diâmetro. Após seleção, os oócitos, em 10 replicações, foram colocados para maturação in vitro (MIV) durante 24 horas. Os oócitos submetidos ao estresse térmico de 41º C durante 3, 6, 12, 18 e 24 horas foram posteriormente transferidos para completar a MIV a 39 ºC, mesma temperatura utilizada para maturação dos oócitos do grupo controle. O desenvolvimento dos embriões foi determinado nos dias 3, 4, 5 e 8 pós-fecundação. A avaliação da qualidade dos embriões foi efetuada através da contagem total de células coradas pelo DAPI e da determinação do número de blastômeros positivos para apoptose através do teste de TUNEL. Observou-se que o estresse térmico diminuiu (P 0,05) somente até 18 horas de incubação. Os resultados permitem concluir que o estresse calórico durante a maturação in vitro de oócitos reduz a quantidade e a qualidade dos embriões ovinos produzidos in vitro determinadas pela alta incidência de apoptose.

The aim of this work was evaluate the effect of heat stress during oocyte maturation on ovine in vitro embryo production. Ovaries were collected at abattoirs and oocytes retrieved from follicles ranging from 2 and 6 mm in diameter. After selection, all oocytes, in 10 replicates, were placed in in vitro maturation (IVM) during 24 hours. The oocytes were submitted to heat stress of 41º C during 3, 6, 12, 18 and 24 hours and were further transferred to 39º C in order to complete IVM, which was the temperature of maturation of control oocytes. Embryonic development was determined on days 3, 4, 5, and 8 post-fertilization. Embryo evaluation was performed as total cell count by DAPI staining and determination of positive blastomere for apoptosis by the TUNEL assay. We observed that heat stress diminishes (P 0.05) only up to 18 hours of incubation. The results allow the conclusion that heat stress during oocyte in vitro maturation reduces the quantity and quality of ovine embryos produced in vitro determined by the high incidence of apoptosis.

Avaliação de embriões ovinos provenientes de oócitos submetidos a estresse calórico durante a maturação in vitro / Evaluation of sheep oocytes submitted to heat stress induced during in vitro maturation

Neste trabalho foi avaliado o efeito do estresse calórico durante a maturação de oócitos sobre a produção in vitro de embriões ovinos. Os ovários foram obtidos em abatedouro e os oócitos colhidos de folículos de 2 a 6 mm de diâmetro. Após seleção, os oócitos, em 10 replicações, foram colocados para maturação in vitro (MIV) durante 24 horas. Os oócitos submetidos ao estresse térmico de 41º C durante 3, 6, 12, 18 e 24 horas foram posteriormente transferidos para completar a MIV a 39 ºC, mesma temperatura utilizada para maturação dos oócitos do grupo controle. O desenvolvimento dos embriões foi determinado nos dias 3, 4, 5 e 8 pós-fecundação. A avaliação da qualidade dos embriões foi efetuada através da contagem total de células coradas pelo DAPI e da determinação do número de blastômeros positivos para apoptose através do teste de TUNEL. Observou-se que o estresse térmico diminuiu (P < 0,05) a capacidade de maturação dos oócitos de acordo com o tempo de exposição à temperatura de 41º C. No grupo de oócitos incubados a 39 C, 70,70% maturou, enquanto que nos grupos expostos ao estresse térmico, apenas 45,28%, 35,17%, 12,30%, 9,74% e 4,60% maturaram, respectivamente, após 3, 6, 12, 18 e 24 horas de incubação. A duração de exposição dos oócitos ao estresse calórico é inversamente proporcional (P < 0,05) à capacidade de desenvolvimento embrionário e diretamente proporcional (P < 0,05) ao número de blastocistos positivos para apoptose. Todavia, o efeito deletério do estresse térmico sobre a clivagem e os embriões nos estádios de 8 a 16 células e de mórula foi crescente (P > 0,05) somente até 18 horas de incubação. Os resultados permitem concluir que o estresse calórico durante a maturação in vitro de oócitos reduz a quantidade e a qualidade dos embriões ovinos produzidos in vitro determinadas pela alta incidência de apoptose.(AU)

The aim of this work was evaluate the effect of heat stress during oocyte maturation on ovine in vitro embryo production. Ovaries were collected at abattoirs and oocytes retrieved from follicles ranging from 2 and 6 mm in diameter. After selection, all oocytes, in 10 replicates, were placed in in vitro maturation (IVM) during 24 hours. The oocytes were submitted to heat stress of 41º C during 3, 6, 12, 18 and 24 hours and were further transferred to 39º C in order to complete IVM, which was the temperature of maturation of control oocytes. Embryonic development was determined on days 3, 4, 5, and 8 post-fertilization. Embryo evaluation was performed as total cell count by DAPI staining and determination of positive blastomere for apoptosis by the TUNEL assay. We observed that heat stress diminishes (P < 0.05) oocyte maturation capacity in accordance with exposure time of 41º C. In the group of oocytes incubated at 39 ºC, 70.70% matured, while in the groups exposed to heat stress of 41º C, only 45.28%, 35.17%, 12.30%, 9.74% and 4.60% matured, respectively, after 3, 6, 12, 18 and 24 hours of incubation. The duration of exposure to heat stress is inversely proportional (P < 0.05) to embryonic developmental capacity directly proportional (P < 0.05) to the number of blastocysts positive to apoptosis. However, the cleavage rate and embryonic development from 8 to 16 cells and morulae stages were affected by heat stress (P > 0.05) only up to 18 hours of incubation. The results allow the conclusion that heat stress during oocyte in vitro maturation reduces the quantity and quality of ovine embryos produced in vitro determined by the high incidence of apoptosis.(AU)

Influência das estações seca e chuvosa na capacidade de desenvolvimento de oócitos e produção in vitro de embriões da espécie caprina / Influence of dry and rainy seasons on oocyte maturation and in vitro embryo production in goats

Objetivou-se com este estudo determinar a influência das estações seca e chuvosa na maturação de oócitos e produção in vitro (PIV) de embriões na espécie caprina. Os ovários das cabras nas estações seca (outubro a março) e chuvosa (abril a setembro) foram colhidos em abatedouro e transportados ao Laboratório de Biotécnicas da Reprodução da UFRPE. Os complexos cumulus oophorus (CCOs) foram colhidos pela técnica de "slicing" dos folículos entre 2 a 6 mm de diâmetro e selecionados com base na classificação morfológica. Foram realizadas 12 repetições, nas quais os CCOs foram submetidos à maturação, fertilização e cultivo in vitro dos embriões. A média e desvio padrão da taxa de clivagem foi determinada no dia 3 (D-3) e dos embriões que se desenvolveram aos estádios de 8-16 células, mórula e blastocisto foi determinada nos dias 4 (D-4), 5 (D-5) e 8 (D-8) após a fecundação, respectivamente. A quantidade de blastômeros foi determinada com o corante DAPI e os blastômeros positivos para apoptose por meio do teste de TUNEL. A produção de embriões no D-3 e mórulas foram inferiores ao obtido no período chuvoso (P 0,05) quanto às fases de maturação, fertilização, cultivo no D-4 e blastocisto. Os embriões produzidos na estação seca apresentaram maior incidência de apoptose (P < 0,05). Nas condições descritas neste estudo, os resultados permitem concluir que as fases iniciais do desenvolvimento embrionário sofrem maior impacto negativo durante a estação seca em protocolos de PIV na espécie caprina.

This study aimed to determine the influence of dry and rainy seasons on oocyte maturation and in vitro production (IVP) of embryos in goats. The ovaries of does in dry (October to March) and rainy season (April-September) were collected at a slaughterhouse and transported to the Laboratory of Biotechnical Reproduction of UFRPE. The cumulus oophorus complexes (COCs) were collected by the technique of slicing of the follicles from 2 to 6 mm in diameter, and selected based on morphologic classification. We used 12 replicates, in which the COCs were submitted to maturation, fertilization and in vitro culture. The cleavage rate was determined on day 3 (D-3) and embryos that developed to 8-16 cells (D-4), morulae (D-5) and blastocyst (D-8) stages after fertilization. The number of blastomeres was assessed with DAPI staining, and the determination of apoptotic blastomeres was performed by TUNEL assay. In the dry season, D-3 embryos and morulae development was lower than that obtained in the rainy season (P0.05) were observed on oocyte maturation, fertilization, D-4 embryo yield and blastocyst development. Embryos produced during the dry season had a higher incidence of apoptosis on D- 3 and at the morulae stage (P<0.05). Under the conditions described in this study, the results suggest that the early stages of embryonic development suffer greater negative impact during the dry season in IVP protocols in goats.

Influência das estações seca e chuvosa na capacidade de desenvolvimento de oócitos e produção in vitro de embriões da espécie caprina / Influence of dry and rainy seasons on oocyte maturation and in vitro embryo production in goats

Objetivou-se com este estudo determinar a influência das estações seca e chuvosa na maturação de oócitos e produção in vitro (PIV) de embriões na espécie caprina. Os ovários das cabras nas estações seca (outubro a março) e chuvosa (abril a setembro) foram colhidos em abatedouro e transportados ao Laboratório de Biotécnicas da Reprodução da UFRPE. Os complexos cumulus oophorus (CCOs) foram colhidos pela técnica de "slicing" dos folículos entre 2 a 6 mm de diâmetro e selecionados com base na classificação morfológica. Foram realizadas 12 repetições, nas quais os CCOs foram submetidos à maturação, fertilização e cultivo in vitro dos embriões. A média e desvio padrão da taxa de clivagem foi determinada no dia 3 (D-3) e dos embriões que se desenvolveram aos estádios de 8-16 células, mórula e blastocisto foi determinada nos dias 4 (D-4), 5 (D-5) e 8 (D-8) após a fecundação, respectivamente. A quantidade de blastômeros foi determinada com o corante DAPI e os blastômeros positivos para apoptose por meio do teste de TUNEL. A produção de embriões no D-3 e mórulas foram inferiores ao obtido no período chuvoso (P < 0,05). Não apresentaram diferenças (P > 0,05) quanto às fases de maturação, fertilização, cultivo no D-4 e blastocisto. Os embriões produzidos na estação seca apresentaram maior incidência de apoptose (P < 0,05). Nas condições descritas neste estudo, os resultados permitem concluir que as fases iniciais do desenvolvimento embrionário sofrem maior impacto negativo durante a estação seca em protocolos de PIV na espécie caprina.(AU)

This study aimed to determine the influence of dry and rainy seasons on oocyte maturation and in vitro production (IVP) of embryos in goats. The ovaries of does in dry (October to March) and rainy season (April-September) were collected at a slaughterhouse and transported to the Laboratory of Biotechnical Reproduction of UFRPE. The cumulus oophorus complexes (COCs) were collected by the technique of slicing of the follicles from 2 to 6 mm in diameter, and selected based on morphologic classification. We used 12 replicates, in which the COCs were submitted to maturation, fertilization and in vitro culture. The cleavage rate was determined on day 3 (D-3) and embryos that developed to 8-16 cells (D-4), morulae (D-5) and blastocyst (D-8) stages after fertilization. The number of blastomeres was assessed with DAPI staining, and the determination of apoptotic blastomeres was performed by TUNEL assay. In the dry season, D-3 embryos and morulae development was lower than that obtained in the rainy season (P<0.05). However, no differences (P>0.05) were observed on oocyte maturation, fertilization, D-4 embryo yield and blastocyst development. Embryos produced during the dry season had a higher incidence of apoptosis on D- 3 and at the morulae stage (P<0.05). Under the conditions described in this study, the results suggest that the early stages of embryonic development suffer greater negative impact during the dry season in IVP protocols in goats.(AU)