ABSTRACT
To mask the antigenic sites of cells for cell therapies, especially for blood transfusion, we investigated the hemocompatibility of two poly(2-(dimethylamino)ethyl methacrylate-co-poly(ethyleneglycol) compared with that of the homopolymer without PEG. Our strategy relies on the potential ability of these copolymers to self-assemble at the erythrocyte surface. The cationic sequence of the copolymer should be able to interact with the glycocalyx by ionic interaction. The other sequence, based on a polyethyleneglycol moiety, should prevent both nonspecific interactions and specific recognition of the biological surface. The hemocompatibility of these copolymers was assessed by analyzing alterations in human erythrocyte membrane viscoelasticity, morphology, granularity, and aggregation. Their properties to mask ABO system and three erythrocyte glycophorin sites were investigated. No alterations in the erythrocyte morphology were observed by confocal microscopy. On the other hand, a partial masking of different specific glycophorin sites leads to future optimization of the macromolecular structures of these functionalized copolymers.
Subject(s)
Biocompatible Materials/pharmacology , Materials Testing/methods , Methacrylates/pharmacology , Polyethylene Glycols/pharmacology , Antibodies, Monoclonal/pharmacology , Erythrocyte Aggregation/drug effects , Erythrocyte Membrane/drug effects , Erythrocytes/cytology , Erythrocytes/drug effects , Flow Cytometry , Fluorescence , Glycophorins/immunology , Hemagglutination/drug effects , Humans , Kinetics , Microscopy, Confocal , Polyamines/pharmacology , Polyelectrolytes , Rheology/drug effectsABSTRACT
La aglutinación inmunológica es la consecuencia de la reacción Ag-Ac que adhiere eritrocitos adyacentes. Los anticuerpos se fijan a los sitios antigénicos distribuidos sobre la superficie de la membrana eritrocitaria, actuando como anclajes moleculares para unir células adyacentes y formas aglutinadas. Una pequeña cantidad de energía es disipada durante la reacción. Si se suministra una cantidad de trabajo mecánico equivalente a la energía disipada, los aglutinatos pueden ser disociados. El trabajo mecánico es realizado por tensiones de corte generadas en un viscosímetro de tipo Couette. Se propone una nueva técnica que utiliza la retrodifusión de un haz láser para analizar la cinética de disociación de aglutinatos eritrocitarios inmunológicos, producida por cizallamiento de los aglutinatos en suspensión. La intensidad del láser, retrodifundida, aumenta en la medida que los aglutinatos son disociados por corte. El registro de la intensidad retrodifundida suministra una curva de disociación que es ajustada por una ecuación exponencial. Los parámetros que caracterizan esta ecuación muestran una buena correlación con la potencia de la aglutinación. La integración numérica de las curvas de disociación conduce a la obtención de un parámetro ED que estima la energía intercambiada en el proceso de disociación y, en consecuencia, la constante de afinidad. (AU)
Subject(s)
Hemorheology , Erythrocyte Aggregation/immunology , Thermodynamics , Cell Communication , Cell Separation/methods , Immune Adherence Reaction/methods , Energy Diffusion , Lasers/statistics & numerical dataABSTRACT
La aglutinación inmunológica es la consecuencia de la reacción Ag-Ac que adhiere eritrocitos adyacentes. Los anticuerpos se fijan a los sitios antigénicos distribuidos sobre la superficie de la membrana eritrocitaria, actuando como anclajes moleculares para unir células adyacentes y formas aglutinadas. Una pequeña cantidad de energía es disipada durante la reacción. Si se suministra una cantidad de trabajo mecánico equivalente a la energía disipada, los aglutinatos pueden ser disociados. El trabajo mecánico es realizado por tensiones de corte generadas en un viscosímetro de tipo Couette. Se propone una nueva técnica que utiliza la retrodifusión de un haz láser para analizar la cinética de disociación de aglutinatos eritrocitarios inmunológicos, producida por cizallamiento de los aglutinatos en suspensión. La intensidad del láser, retrodifundida, aumenta en la medida que los aglutinatos son disociados por corte. El registro de la intensidad retrodifundida suministra una curva de disociación que es ajustada por una ecuación exponencial. Los parámetros que caracterizan esta ecuación muestran una buena correlación con la potencia de la aglutinación. La integración numérica de las curvas de disociación conduce a la obtención de un parámetro ED que estima la energía intercambiada en el proceso de disociación y, en consecuencia, la constante de afinidad.
