Activation of NOS-cGMP pathways promotes stress-induced sensitization of behavioral responses in zebrafish.

Nitric oxide (NO) is a molecule involved in plasticity across levels and systems. The role of NOergic pathways in stress-induced sensitization (SIS) of behavioral responses, in which a particular stressor triggers a state of hyper-responsiveness to other stressors after an incubation period, was assessed in adult zebrafish. In this model, adult zebrafish acutely exposed to a fear-inducing conspecific alarm substance (CAS) and left undisturbed for an incubation period show increased anxiety-like behavior 24 h after exposure. CAS increased forebrain glutamate immediately after stress and 30 min after stress, an effect that was accompanied by increased nitrite levels immediately after stress, 30 min after stress, 90 min after stress, and 24 h after stress. CAS also increased nitrite levels in the head kidney, where cortisol is produced in zebrafish. CAS-elicited nitrite responses in the forebrain 90 min (but not 30 min) after stress were prevented by a NOS-2 blocker. Blocking NOS-1 30 min after stress prevents SIS; blocking NOS-2 90 min after stress also prevents stress-induced sensitization, as does blocking calcium-activated potassium channels in this latter time window. Stress-induced sensitization is also prevented by blocking guanylate cyclase activation in both time windows, and cGMP-dependent channel activation in the second time window. These results suggest that different NO-related pathways converge at different time windows of the incubation period to induce stress-induced sensitization.

Detecção de bactérias enteropatogênicas e enteroparasitas em pacientes com diarreia aguda em Juruti, Pará, Brasil / Detection of enteropathogenic bacteria and enteroparasites in patients with acute diarrhea in Juruti, Pará, Brazil

Com o intuito de determinar a frequência de bactérias enteropatogênicas e enteroparasitas em pacientes com diarreia aguda no Município de Juruti, Pará, o qual passa por intenso processo imigratório face o grande projeto de exploração mineral, avaliaram-se 263 casos de diarreia aguda, dos quais 19 por cento foram atribuídos a bactérias enteropatogênicas, destacando-se a Shigella spp, que representou 13,7 por cento. Salmonella spp, Aeromonas spp e Plesiomonas shigelloides também foram detectados. Os sorotipos de Shigella mais frequentemente encontrados foram S. flexneri (61,1 por cento) e S. sonnei (38,9 por cento). Entre as Salmonella, identificaram-se os seguintes sorotipos: S. Panama (2), S. Newport (2), S. Bredeney, S. Saintpaul e S. Gaminara. A infecção pelos protozoários alcançou 85,3 por cento tendo como principais responsáveis, por ordem de frequência, Blastocystis hominis (37,3 por cento), Entamoeba histolytica/E. dispar (22,8 por cento), Endolimax nana (16,7 por cento), Entamoeba coli (9,5 por cento) e Giardia lamblia (8,4 por cento). Esses resultados fornecem valiosos subsídios à vigilância epidemiológica e ambiental, demonstrando as condições insatisfatórias de saneamento básico em que vive a população do Município.

With the aim of determining the frequency rate of enteropathogenic bacteria and enteroparasites in patients with acute diarrhea in the Municipality of Juruti, Pará State, which has been facing an intense migratory process due to a great mining project, we analyzed 263 cases of acute diarrhea. A total of 19 percent of those cases were related to enteropathogenic bacteria, particularly Shigella spp. that accounted for 13.7 percent of the cases. Salmonella spp, Aeromonas spp and Plesiomonas shigeloide were also detected. The most frequent Shigella serotypes found were S. flexneri (61.1 percent) and S. sonnei (38.9 percent). Among the Salmonella, we could observe the following serotypes: S. Panama (2), S. Newport (2), S. Bredeney, S. Saintpaul and S. Gaminara. The infection caused by protozoa reached 85.3 percent, mostly due to Blastocystis hominis (37.3 percent), Entamoeba histolytica/E. dispar (22.8 percent), Endolimax nana (16.7 percent), Entamoeba coli (9.5 percent) and Giardia lamblia (8.4 percent). These results provide valuable data to epidemiological and environmental surveillance because it presents the unsatisfactory basic sanitary conditions of the local population.

Avaliação de diferentes procedimentos para extração de DNA a partir de esfregaços corados pelo método de Ziehl-Neelsen / Evaluation of different methods of DNA extraction from baciloscopic tests of Ziehl-Neelsen stainig

O Pará é o estado com maior taxa de incidência de tuberculose (TB) na região Norte, com 36,3 casos por 100 mil habitantes em 2004. A obtenção de DNA de qualidade a partir de material fixado em lâminas coradas pelo método de Ziehl-Neelsen (ZN) supriria a falta de amostras representativas para estudos de genotipagem, contribuindo para melhor entendimento da dinâmica de transmissão da TB. O presente estudo avaliou quatro diferentes procedimentos para obtenção de DNA de M. tuberculosis a partir de 196 esfregaços corados pelo método de ZN, que utilizaram xilol e N-acetil-L-cisteína (NALC) em conjunto, de forma isolada ou nenhuma destas substâncias, e ainda dois protocolos de amplificação distintos, um com o adjuvante de PCR glicerol e outro com betaína. O percentual de amplificação foi superior para as amostras que foram submetidas ao procedimento que utilizou somente o xilol e ao que não utilizou nenhuma substância, sendo 77 por cento e 67 por cento, respectivamente, para o protocolo com glicerol, e de 98 por cento e de 96 por cento para o protocolo com betaína. A partir dos resultados obtidos, não é recomendado o uso de xilol ou NALC nos procedimentos de remoção das amostras e sugere-se a inclusão do adjuvante betaína nas reações, assim como o uso do DNA extraído de lâminas coradas pelo método de ZN em análises baseadas em PCR.

Qualidade das baciloscopias de escarro realizadas em oito unidades de saúde no estado do Pará / Quality of the sputum bacilloscopy held in eight health units in the state of Pará

A baciloscopia pelo método de Ziehl-Neelsen (ZN) é um exame simples, rápido, econômico e é a técnica mais difundida para o diagnóstico da tuberculose (TB), pois permite detectar as fontes mais importantes de infecção. O presente trabalho avaliou a qualidade das baciloscopias para tuberculose em oito Unidades Básicas de Saúde (UBS) e encaminhadas ao LACEN-PA, no Estado do Pará. Os itens avaliados foram identificação das lâminas, distensão, coloração dos esfregaços e índice baciloscópico. Dentre as 189 lâminas avaliadas, 36 por cento (69 por 189) foram caracterizadas como inadequadas. Falhas relacionadas ao item distensão foram as mais frequentes (31 por cento), seguidas de problemas na coloração (28 por cento). No item identificação das lâminas, apenas a UBS B apresentou falhas, e estas ocorreram em 100 por cento (4) das lâminas enviadas ao LACEN no período do estudo. A avaliação dos índices bacterioscópicos determinou 10 discordâncias em número de cruzes, um falso-negativo e um falso-positivo. Tais resultados sugerem falta de obediência aos parâmetros de qualidade preconizados pelo Ministério da Saúde. No entanto, recomenda-se a realização de estudo com ampliação do número de amostras e atenção especial as principais causas de erro no desenvolvimento das baciloscopias.