ABSTRACT
Objetivo: investigar a suscetibilidade de cepas fúngicas de Candida parapsilosis isoladas de sangue humano frente ao timol, bem como seu mecanismo de ação. Metodologia: foram utilizadas técnicas de microdiluição em placas de 96 poços para determinar a concentração inibitória mínima (CIM) e concentração fungicida mínima (CFM). Além disso, foram realizados testes com o sorbitol e o ergosterol para investigar a ação do timol na parede e na membrana celular fúngica respectivamente. Resultados: nos testes de CIM e CFM, foi observado que as cepas de C. parapsilosis são resistentes ao fluconazol e a anfotericina B, no entanto, o timol desempenhou efeito fungicida com razão CFM/CIM entre 1 e 2. Além disso, a CIM do timol não aumentou quando o sorbitol ou o ergosterol foi adicionado no meio, sugerindo fortemente que este monoterpeno não age na parede celular fúngica ou por ligação ao ergosterol na membrana plasmática. Conclusão: portanto, esses resultados contribuem para a elucidação do mecanismo de ação do timol, sugerindo outros possíveis alvos de interação fármaco-receptor. No entanto, mais investigações de caráter enzimático e molecular em modelos in vitro são necessários para que se possa elucidar completamente o modo de ação desse promissor monoterpeno.
Objective: to investigate the susceptibility of fungal strains of Candida parapsilosis isolated from human blood against thymol, as well as its mechanism of action. Methodology: microdilution techniques were used in 96-well plates to determine minimum inhibitory concentration (MIC) and minimum fungicidal concentration (MFC). In addition, tests were performed with sorbitol and ergosterol to investigate the action of thymol on the wall and on the fungal cell membrane respectively. Results: in the CIM and CFM tests, it was observed that C. parapsilosis strains are resistant to fluconazole and amphotericin B, however, thymol had a fungicidal effect with MFC/MIC ratio between 1 and 2. In addition, thymol MIC did not increase when sorbitol or ergosterol was added in the medium, strongly suggesting that this monoterpene does not act on the fungal cell wall or by binding to ergosterol on the plasma membrane. Conclusion: therefore, these results contribute to the elucidation of the mechanism of action of thymol, suggesting other possible targets of drug-receptor interaction. However, further investigations of enzymatic and molecular character in in vitro models are necessary to fully elucidate the mode of action of this promising monoterpene.
Subject(s)
Humans , Thymol , Fluconazole , Amphotericin B , Candidiasis, Invasive , Candida parapsilosis , Anti-Infective Agents , Antifungal Agents , Sorbitol , ErgosterolABSTRACT
Introdução: aproximadamente 75% das mulheres saudáveis experimentam pelo menos um episódio sintomático de candidíase vulvovaginal (CVV) durante sua vida. Objetivo: avaliar a atividade antifúngica contra cepas de C. tropicalis dos enantiômeros (R)-(+) e (S)-(-)-citronelal [(R)-(+) e (S)-(-)-CT] em associação com cetoconazol. Metodologia: o efeito antifúngico de ambos os enantiômeros foram quantificados e classificados como fungicida ou fungistático a partir dos resultados obtidos da microdiluição em meio líquido RPMI1640 para a obtenção da concentração inibitória mínima (CIM) e da concentração fungicida mínima (CFM). Foram realizados ensaios de associação do antifúngico padrão, cetoconazol com os fitoconstituintes por difusão em Agar e os resultados foram classificados como sinérgicos, antagônicos e indiferentes. Resultados: a CIM50 e a CFM50 dos compostos (R)-(+) e (S)-(-)-citronelal foram respectivamente 16 e 64µg/mL e 2×CIM. Houve sinergismo para todas as cepas testadas com ambos os compostos, porém com maior efeito do enantiômero (S)-(-)-CT sobre as cepas LM 665 e LM 255 em relação ao enantiômero (R)-(+)-CT. Conclusão: os compostos naturais deste estudo mostraram efeito fungicida sobre as cepas testadas, bem como efeito sinérgico significativo quando associado ao cetoconazol
Subject(s)
Female , Candida tropicalisABSTRACT
Candidiasis is an opportunistic fungal infection caused by Candida yeasts. In Brazil, C. tropicalis is the second most frequently isolated microorganism after C. albicans. The arising of strains resistant to conventional antifungal agents has increased the search for new alternatives from natural products, especially essential oils. This research investigated essential oil activity against strains of C. tropicalis by disk diffusion method. The minimum inhibitory concentration (MIC) and minimum fungicidal concentration (MFC) were also determinate. In the disk diffusion, the essential oils of Cinnamomum zeylanicum, Eugenia caryophyllata and Origanum vulgare had the highest inhibition zones values. MIC and MFC values of E. caryophyllata essential oil were 512 and 1024 ug/mL, respectively. MIC and MFC amphotericin B values were identical (2 ug/mL). Therefore, it was concluded that E. caryophyllata essential oil has strong antifungal activity and may be subject to further studies.
La candidiasis es una infección fúngica oportunista causada por levaduras del género Candida. En Brasil, la especie C. tropicalis esta siendo aislada frecuentemente, es el segundo microorganismo más aislado después de C. albicans. La aparición de cepas resistentes a los antifúngicos convencionales ha aumentado la búsqueda de nuevas alternativas provenientes de productos naturales, especialmente los aceites esenciales. En este estudio se investigó la actividad de los aceites esenciales contra las cepas de C. tropicalis, utilizando el método de difusión en disco, la concentración inhibitoria mínima (CIM) y la concentración fungicida mínima (CFM). En el método de difusión en disco, con los aceites esenciales de Cinnamomum zeylanicum, Eugenia caryophyllata y Origanum vulgare se obtuvieron mayores valores de inhibición. La CIM y CFM del aceite esencial de Eugenia caryophyllata fueron 512 y 1024 ug/mL, mientras que los de la anfotericina B fueron idénticos, 2 ug/mL. Por lo tanto, se puede concluir que el aceite esencial de E. caryophyllata tiene potente actividad antifúngica y puede ser objeto de nuevos estudios sobre esta actividad.
Subject(s)
Oils, Volatile/pharmacology , Antifungal Agents/pharmacology , Candida tropicalis , Eugenia/chemistry , Brazil , Origanum/chemistryABSTRACT
The genus Acinetobacter has gained importance in recent years due to involvement in serious infections and antimicrobial resistance. Many plants have been evaluated not only for direct antimicrobial activity, but also as resistance modifying agents. The Essential oil of Citrus limon (EOCL) addition at 156.25 µgmL(-1) (MIC/8) sub-inhibitory concentration in the growth medium led to MIC decrease for amikacin, imipenem and meropenem. The Essential oil of Cinnamomum zeylanicum (EOCZ) addition at 78.125 µg mL(-1) (MIC/8) sub-inhibitory concentrations in the growth medium caused drastic MIC reduction of amikacin. Results of combining antibiotics and essential oils had shown us a synergistic effect with both essential oils/amikacin combinations. An additive effect was observed with the combinations of both essential oils and gentamicin. The results of this study suggest that essential oil of C. limon and C. zeylanicum may suppress the growth of Acinetobacter species and could be a source of metabolites with antibacterial modifying activity.
