Enhanced liposomal vaccine formulation and performance: Simple physicochemical and immunological Approaches

The Dtxd (Diphtheria toxoid) was the first antigen encapsulated within liposomes, their adjuvant properties were discovered (their capacity to enhance the vaccine immunogenicity). The point here is not to propose a new method to prepare this lipossomal vaccine. The central idea is to give new dresses for old vaccines by using classical and well-established liposome preparation method changing only the encapsulation pH and the immunization protocol.The most appropriate method of Dtxd encapsulation within liposome was based on lipid film hydration in 100 mM citrate buffer, pH 4.0. This was accompanied by changes on protein hydrophobicity, observed by CD and fluorescence spectroscopies. Whenever the Dtxd exposed its hydrophobic residues at pH 4.0, it interacted better with the lipossomal (observed by electrophoretic mobility) film than when its hydrophobic residues were buried (pH 9.0). The Dtxd partition coefficient in Triton-X114 and the acrylamide fluorescence quenching were also pH dependent. Both were bigger at pH 4.0 than at pH 9.0. The relationship protein structure and lipid interaction was pH dependent and now it can be easily maximized to enhance encapsulation of antigens in vaccine development.The simple change on lipossomal pH formulation and timing of the booster enhanced both antibody production and selectivity.

Suscetibilidade da linhagem de células Vero a cepas vacinais do vírus do sarampo / Susceptibility of Vero cell line to vaccine strains of the measles vírus

A suscetibilidade da linhagem de células Vero ao vírus do sarampo é bem conhecida e sua utilizaçäo no controle da potência da vacina contra o sarampo é amplamente difundida. Com o objetivo de comparar a suscetibilidade de células Vero empregadas em titulaçöes, amostras provenientes de dois laboratórios controladores (Vero IB e Vero INCQS), foram testadas frente a três cepas vacinais: Moraten Schwarz e Biken CAM-70. Foram titulados 72 lotes de vacinas contra o sarampo, sendo 25 produzidos com a cepa Moraten, 24 com a cepa Schwarz e 23 com a cepa Biken CAM-70. A análise estatística dos resultados obtidos nas titulaçöes, feita através dos testes Limites para uma Média e "t" de Student, mostrou que para as cepas Moraten e Biken CAM-70, as diferenças de títulos näo foram estatisticamente significantes, o mesmo näo ocorrendo com a cepa Schwarz, para a qual as células Vero IB se mostraram mais sensíveis

Fotossensibilidade e termoestabilidade de vacinas contra o sarampo (CEPA BIKEN CAM-70) liofilizadas e/ou reconstituídas para administraçäo / Photosensitivity and stability of freeze-dried and reconstituted measles vaccines (Biken CAM-70 strain)

Três lotes de vacinas contra o sarampo, produzidos com a cepa de vírus Biken CAM-70, sob as formas liofilizada e reconstituída, pertencentes ao estoque da rede de vacinaçäo da Secretaria de Estado da Saúde de Säo Paulo, Brasil, foram submetidos a testes de sensibilidade a luz, a temperatura de 2 a 8§C, e de termoestabilidade (protegidos da luz) as temperaturas de 28, 36,5 e 45§C, objetivando verificar por quanto tempo retinham sua potência, isto é, a concentraçäo ideal recomendada para a cepa de vírus presente. A análise de retas de regressäo ajustadas demonstrou que, de modo geral, tanto os lotes de vacinas liofilizados como de potência no decorrer do experimento, a qual foi mais acentuada para vacinas expostas a luz. Reconstituídos e mantidos a 2 a 8§C, os lotes näo apresentaram homogeneidade no referente a sensibilidade a luz. Quando a fotossensibilidade de lotes de vacinas liofilizadas foi testada a 2 a 8§C eles mostraram-se mais sensíveis a degradaçäo térmica quando expostos a luz do que quando protegidos dela. Entretanto, expostos ou protegidos, a potência foi inferior a mínima aceita para a cepa Bikien CAM-70. As demais temperaturas, mesmo ao abrigo da luz, os dois lotes näo retiveram potência mínima. Quanto as vacinas do lote 3, conservadas a 2 a 8§C, mantiveram-se de acordo com os requerimentos mínimos de potência durante 60 dias quando protegidas da luz, e durante 40 dias quando expostas a ela. A degradaçäo térmica as demais temperaturas foi mais acentuada (28§C: 5 dias...

Seringas hipodérmicas descartáveis versus reutilizáveis: estudo de possíveis efeitos sobre o vírus da vacina viva, atenuada contra o sarampo

Objetivou-se verificar entre seringas hipodérmicas descartáveis e reutilizáveis qual interfere mais com o vírus vivo presente na vacina contra o sarampo. Vacinas pertencentes a dois lotes foram reconstituídas com os dois tipos de seringas, de modo a formarem dois pools distintos, mantidos à temperatura de +2 a+8-C e protegidos da luz. De cada lote foram realizadas, no mínimo, seis titulacöes em paralelo, com amostragem a cada hora, de zero a seis horas após reconstituicäo. A análise estatística dos resultados obtidos nas titulacöes, feita pelo sistema de retas de regressäo demonstrou que embora as vacinas manipuladas com ambos os tipos de seringas apresentassem um decréscimo de título estatisticamente significativo com o decorrer das horas, ele foi bem mais acentuado para as vacinas reconstituídas com seringas reutilizáveis. A menor interferência das descartáveis no título da vacina viva, atenuada contra o sarampo, demonstrou que a preconizacäo e uso desse tipo de seringas pela Secretaria de Estado da Saúde de Säo Paulo é o ideal e recomendável, por preservar mais a vacina desde a reconstituicäo até sua administracäo e, conseqüentemente, a sua eficácia na prevencäo dessa infeccäo (AU)

Seringas hipodérmicas descartáveis versus reutilizáveis: estudo de possíveis efeitos sobre o vírus da vacina viva, atenuada contra o sarampo / Disposable vs. reusable hypodermic syringes: study of feasible effects upon the virus of the live, attenuated measles vaccine

Objetivou-se verificar entre seringas hipodérmicas descartáveis e reutilizáveis qual interfere mais com o vírus vivo presente na vacina contra o sarampo. Vacinas pertencentes a dois lotes foram reconstituídas com os dois tipos de seringas, de modo a formarem dois pools distintos, mantidos à temperatura de +2 a+8-C e protegidos da luz. De cada lote foram realizadas, no mínimo, seis titulaçöes em paralelo, com amostragem a cada hora, de zero a seis horas após reconstituiçäo. A análise estatística dos resultados obtidos nas titulaçöes, feita pelo sistema de retas de regressäo demonstrou que embora as vacinas manipuladas com ambos os tipos de seringas apresentassem um decréscimo de título estatisticamente significativo com o decorrer das horas, ele foi bem mais acentuado para as vacinas reconstituídas com seringas reutilizáveis. A menor interferência das descartáveis no título da vacina viva, atenuada contra o sarampo, demonstrou que a preconizaçäo e uso desse tipo de seringas pela Secretaria de Estado da Saúde de Säo Paulo é o ideal e recomendável, por preservar mais a vacina desde a reconstituiçäo até sua administraçäo e, conseqüentemente, a sua eficácia na prevençäo dessa infecçäo

Estudo comparativo de meios de cultura recomendados para testes de esterilidade de produtos biológicos / Comparative study of culture media recommended for sterility tests of biologic products

A sensibilidade do caldo de caseína-soja foi comparada à dos meios líquidos de tioglicolato de Sabouraud, usualmente recomendados para testes de esterilidade de produtos biológicos. Os resultados demonstraram que o caldo de caseína-soja foi täo efetivo quanto o tioglicolato líquido na detecçäo de bactérias aeróbicas. Com relaçäo aos bolores e leveduras, o caldo de caseína-soja apresentou a mesma eficiência do meio de Sabouraud líquido. O caldo de caseína-soja, usado em paralelo aos meios tioglicolato e Sabouraud, proporciona maior confiabilidade aos testes de esterilidade de meios de cultura usados em cultura celular, vacinas virais e de imunológicos em geral