Citoquinas reguladoras de la respuesta al trasplante renal alogénico / Regulatory cytokines in the response to the allogeneic renal transplant

The outcome of the kidney allograft mainly depends on the immune response and on its complex regulation, where the cytokine network and other mediators play an important role. At present, kidney biopsy is the most useful tool for monitoring the transplant rejection and the diagnosis of the associated nephropathies, in spite of the invasiveness of the procedure. Thus, it is of great interest to find alternative tools for diagnosis. The evaluation of regulatory cytokines is a simple procedure of low cost that could be useful to increase the sensitivity of the detection of polymorphic differences, to predict the graft acceptance and for the early detection of rejection. Recent studies suggest that the high production of pro-inflammatory mediators, such as Th1 cytokines, could be detrimental, whereas the production of anti-inflammatory regulatory cytokines, such as interleukin (IL)-10 and tumor necrosis factor (TGF)-beta, could be beneficial for graft survival. In the early stages, the cellular cytotoxicity is activated by the Th1 response and the detection of cytotoxic molecules is associated to the acute rejection. Later, the balance between pro and anti-inflammatory mediators and the regulation of their levels could be more important. In this regard, TGF-beta is also fibrogenic and a high local production can contribute to kidney damage. On the other hand, the increased production of IL-10 in response to the allogeneic stimuli could be, in most cases, an important marker of long-term acceptance.

La aceptación o el rechazo del riñón alogénico dependen principalmente de la respuesta inmune y de su compleja regulación en la cual la red de citoquinas y otros mediadores juegan un importantepapel. Actualmente, la biopsia renal es, a pesar de lo invasor del procedimiento, la herramienta de mayor utilidadpara el control del rechazo al trasplante y el diagnóstico de las nefropatías asociadas. Por ello, es de graninterés encontrar métodos alternativos para el diagnóstico. La evaluación de citoquinas reguladoras de la respuestainmune es un procedimiento sencillo y de bajo costo que podría ser de utilidad para incrementar la sensibilidadde la detección de diferencias polimórficas, para pronosticar la aceptación del trasplante y para ladetección precoz del rechazo. Los estudios recientes sugieren que la producción exagerada de mediadores proinflamatorios, incluyendo a citoquinas Th1, sería desventajosa para la sobrevida del trasplante, mientras que la producción de citoquinas reguladoras anti-inflamatorias, como la interleuquina (IL)-10 y el factor de crecimiento tumoral (TGF)-β, sería beneficiosa. En las primeras etapas, la respuesta Th1 puede incrementar la actividad citotóxica y la detección de moléculas citotóxicas está asociada al rechazo agudo. Luego podría ser más importante considerar el balance entre la producción de mediadores pro- y anti-inflamatorios y la regulación desus niveles. Así, el TGF-β es también fibrogénico y su excesiva producción local puede contribuir al daño renal.Por otro lado, el incremento de la producción de IL-10 en respuesta al estímulo alogénico sería, en la mayoríade los casos, un marcador importante para pronosticar la aceptación prolongada.

Citoquinas reguladoras de la respuesta al trasplante renal alogénico / Regulatory cytokines in the response to the allogeneic renal transplant

The outcome of the kidney allograft mainly depends on the immune response and on its complex regulation, where the cytokine network and other mediators play an important role. At present, kidney biopsy is the most useful tool for monitoring the transplant rejection and the diagnosis of the associated nephropathies, in spite of the invasiveness of the procedure. Thus, it is of great interest to find alternative tools for diagnosis. The evaluation of regulatory cytokines is a simple procedure of low cost that could be useful to increase the sensitivity of the detection of polymorphic differences, to predict the graft acceptance and for the early detection of rejection. Recent studies suggest that the high production of pro-inflammatory mediators, such as Th1 cytokines, could be detrimental, whereas the production of anti-inflammatory regulatory cytokines, such as interleukin (IL)-10 and tumor necrosis factor (TGF)-beta, could be beneficial for graft survival. In the early stages, the cellular cytotoxicity is activated by the Th1 response and the detection of cytotoxic molecules is associated to the acute rejection. Later, the balance between pro and anti-inflammatory mediators and the regulation of their levels could be more important. In this regard, TGF-beta is also fibrogenic and a high local production can contribute to kidney damage. On the other hand, the increased production of IL-10 in response to the allogeneic stimuli could be, in most cases, an important marker of long-term acceptance.(AU)

La aceptación o el rechazo del riñón alogénico dependen principalmente de la respuesta inmune y de su compleja regulación en la cual la red de citoquinas y otros mediadores juegan un importantepapel. Actualmente, la biopsia renal es, a pesar de lo invasor del procedimiento, la herramienta de mayor utilidadpara el control del rechazo al trasplante y el diagnóstico de las nefropatías asociadas. Por ello, es de graninterés encontrar métodos alternativos para el diagnóstico. La evaluación de citoquinas reguladoras de la respuestainmune es un procedimiento sencillo y de bajo costo que podría ser de utilidad para incrementar la sensibilidadde la detección de diferencias polimórficas, para pronosticar la aceptación del trasplante y para ladetección precoz del rechazo. Los estudios recientes sugieren que la producción exagerada de mediadores proinflamatorios, incluyendo a citoquinas Th1, sería desventajosa para la sobrevida del trasplante, mientras que la producción de citoquinas reguladoras anti-inflamatorias, como la interleuquina (IL)-10 y el factor de crecimiento tumoral (TGF)-β, sería beneficiosa. En las primeras etapas, la respuesta Th1 puede incrementar la actividad citotóxica y la detección de moléculas citotóxicas está asociada al rechazo agudo. Luego podría ser más importante considerar el balance entre la producción de mediadores pro- y anti-inflamatorios y la regulación desus niveles. Así, el TGF-β es también fibrogénico y su excesiva producción local puede contribuir al daño renal.Por otro lado, el incremento de la producción de IL-10 en respuesta al estímulo alogénico sería, en la mayoríade los casos, un marcador importante para pronosticar la aceptación prolongada.(AU)

Conversion from azathioprine [correction of azathioprina] to mycophenolate mofetil in pediatric renal transplant recipients with chronic rejection.

BACKGROUND: Chronic rejection is the leading cause of graft failure. Both nonimmunological and immunological mechanisms contribute to this pathology. METHODS: We studied changes in kidney function, mixed lymphocyte culture, cell-mediated lympholysis, serum HLA class I antigens, cytotoxic antibodies, and lymphocyte population before and after 6 months of follow-up in 22 pediatric renal transplanted patients. The immunosuppressive protocol used was: cyclosporine, azathioprine, and corticosteroids. Eight patients demonstrated chronic graft rejection (by biopsy), group I; and eight patients had no clinical evidence of chronic and/or acute rejection, group II. Substitution of mycophenolate mofetil (MMF) (600 mg/m2 bid for azathioprine was done in patients of groups I and II. Another six patients with chronic rejection, did not receive MMF, group III. RESULTS: Creatinine clearance increased in group I (44+/-5 vs. 51.1+/- ml/min/1.73 m2, P<0.03) but it decreased in group III (30+/-3 vs. 25+/-2, P<0.01). Urinary protein excretion decreased only in group I (0.3+/-0.03 to 0.06+/-0.03 g/24 hr, P<0.03). During MMF therapy antidonor mixed lymphocyte culture decreased 62 and 70% (P<0.05) in group I and II. Cell-mediated lympholysis against lymphocyte of the donor decreased 65% (P<0.05) in group I. Cell-mediated lympholysis toward control cells decreased 54% (P<0.01) in group II. Serum HLA class I antigens, only decreased from 0.7+/-0.1 to 0.5+/-0.1 microl/ml, P<0.05, in group I. CD19+ decreased from 7.9+/-1.1 to 5.6+/-0.8%, P<0.05, and 7.8+/-1.2 to 5.5+/-0.9%, P<0.05, in groups I and II, respectively. CD16+ increased from 5.7+/-1.1 to 8.6+/-1.3 (P<0.05) only in group I. CONCLUSIONS: Our data suggest that substituting MMF for azathioprine therapy leads to an improvement in the immunosuppression and renal function in children with on-going chronic rejection.

Microquimerismo y actividad bloqueante en mujeres con abortos espontáneos recurrentes (RSA) después de la aloinmunización con linfocitos del esposo / Microchimerism and blocking activity in women with recurrent spontaneous abortions after the allo immunization with their partner's leucocytes

Se han detectado células fetales en la circulación materna de seres humanos 4 semanas post-concepción (Thomas y colab. 1994). Se podría hipotetizar que el tráfico celular temprano a través de la placenta es importante y tal vez necesario para la inducción de tolerancia fetal. La localización de células fetales CD34+ en los órganos maternos linfoides puede ayudar a mantener la tolerancia fetal de una manera análoga al trasplante de órganos alogeneicos (Bianchi y colab. 1996). El reciente hallazgo de que células del dador circulan en el receptor de trasplante hasta 29 años post-trasplante, ha hecho pensar que éstas células quiméricas (Microquimerismo) pueden tener un rol en la inducción y perpetuación de la tolerancia. La terapia de aloinmunización con linfocitos del esposo podría ser efectiva para prevenir los abortos recurrentes de causa desconocida. Algunos investigadores establecieron que después de la aloinmunización se observa la presencia de factores bloqueantes (FB) en el suero de mujeres con embarazos exitosos en ensayos "in vitro" de cultivo mixto linfocitario (MLC). Nosotros hemos investigado la producción de FB en MLC antes y después de la aloinmunización y su posible relación con el desarrollo de microquimerismo (M). Antes del tratamiento estudiamos 14 parejas con 3 o más abortos quienes eran evaluadas clínicamente para descartar causas anatómicas, genéticas, estructurales, endócrinas, infecciosas y/o autoinmunes. El estudio de M fue hecho con la técnica llamada nested PCR-SSP para los alelos HLA-DR antes del tratamiento y después de 30 días de la última inmunización. Antes del tratamiento, solo 1 paciente tenía M positivo y ninguna tenía FB positivos con índice de inhibición (I.I) >50, solo 8 pacientes realizaron el tratamiento. Las pacientes recibieron entre 3 y 9 aloinmunizaciones (x=4.7). Después del tratamiento todas las pacientes tenían M positivo e I.I>50, 6 meses después de la última inmunización 4 pacientes tienen M positivo eII>50. En conclusión: la hipótesis propone que la aloinmunización establece un estado de microquimerismo que sería el estímulo alogénico necesario para la activación de células T y la inducción o mantenimiento de la tolerancia hacia el feto durante el embarazo

Microquimerismo y actividad bloqueante en mujeres con abortos espontáneos recurrentes (RSA) después de la aloinmunización con linfocitos del esposo / Microchimerism and blocking activity in women with recurrent spontaneous abortions after the allo immunization with their partners leucocytes

Se han detectado células fetales en la circulación materna de seres humanos 4 semanas post-concepción (Thomas y colab. 1994). Se podría hipotetizar que el tráfico celular temprano a través de la placenta es importante y tal vez necesario para la inducción de tolerancia fetal. La localización de células fetales CD34+ en los órganos maternos linfoides puede ayudar a mantener la tolerancia fetal de una manera análoga al trasplante de órganos alogeneicos (Bianchi y colab. 1996). El reciente hallazgo de que células del dador circulan en el receptor de trasplante hasta 29 años post-trasplante, ha hecho pensar que éstas células quiméricas (Microquimerismo) pueden tener un rol en la inducción y perpetuación de la tolerancia. La terapia de aloinmunización con linfocitos del esposo podría ser efectiva para prevenir los abortos recurrentes de causa desconocida. Algunos investigadores establecieron que después de la aloinmunización se observa la presencia de factores bloqueantes (FB) en el suero de mujeres con embarazos exitosos en ensayos "in vitro" de cultivo mixto linfocitario (MLC). Nosotros hemos investigado la producción de FB en MLC antes y después de la aloinmunización y su posible relación con el desarrollo de microquimerismo (M). Antes del tratamiento estudiamos 14 parejas con 3 o más abortos quienes eran evaluadas clínicamente para descartar causas anatómicas, genéticas, estructurales, endócrinas, infecciosas y/o autoinmunes. El estudio de M fue hecho con la técnica llamada nested PCR-SSP para los alelos HLA-DR antes del tratamiento y después de 30 días de la última inmunización. Antes del tratamiento, solo 1 paciente tenía M positivo y ninguna tenía FB positivos con índice de inhibición (I.I) >50, solo 8 pacientes realizaron el tratamiento. Las pacientes recibieron entre 3 y 9 aloinmunizaciones (x=4.7). Después del tratamiento todas las pacientes tenían M positivo e I.I>50, 6 meses después de la última inmunización 4 pacientes tienen M positivo eII>50. En conclusión: la hipótesis propone que la aloinmunización establece un estado de microquimerismo que sería el estímulo alogénico necesario para la activación de células T y la inducción o mantenimiento de la tolerancia hacia el feto durante el embarazo (AU)

Microchimerism and blocking activity in women with recurrent spontaneous abortion (RSA) after alloimmunization with the partner's lymphocytes.

Alloimmunization therapy using the partner's leukocytes has been reported to be effective in preventing the failure of pregnancy in patients who have suffered RSA of unknown cause. After alloimmunization, several investigators have reported the presence of blocking factors (BF) in women with successful pregnancies in in vitro assays of lymphocyte response. The recent discovery of small numbers of ubiquitous donor cells (microchimerism) in human transplants up to 29 years post-transplantation has raised questions about the migration of the chimeric cells and their role in the induction and perpetuation of tolerance. We have investigated the production of BF in the mixed lymphocyte reaction (MLR) before and in some patients after alloimmunization and its possible relation with the development of microchimerism (M). Before the treatment we studied 14 couples with three or more abortions who were evaluated clinically to rule-out genetic, structural, endocrine, infectious and autoimmune causes. The M study was done by nested PCR-SSP technique with HLA-DR alleles, before and after 30 days of the last immunization. Before the treatment only one patient was M positive and none were BF positive with inhibition effect (IE) > 50. Only eight underwent treatment. The patients had between three and nine alloimmunizations (x = 4.7). After treatment, all patients were M positive with IE > 50. Six months after the last immunization, four patients are M positive with IE > 50. In conclusion, the hypothesis proposes that alloimmunization establishes a state of microchimerism that would be the necessary allogeneic stimulus for T-cell activation, and the induction or maintenance of tolerance to the fetus during pregnancy. reserved.

Soluble HLA class I antigens in pediatric patients with renal transplants from related living donors without acute rejection and treated with triple therapy.

All HLA class I Ag-expressing cells may be the source of serum Ag sHLA I. T and B lymphocytes secrete considerable amounts of Ag sHLA I in a variety of in vitro and in vivo activation systems. The purpose of this study was to evaluate the level of Ag sHLA I in serum of children with kidney transplants from related living donors without acute rejection and with triple therapy. We studied 25 patients (2-21 years) with first kidney transplant, 19 individuals (10-20 years) undergoing hemodialysis without transplant, and 25 normal children (4-21 years). The levels of Ag sHLA in transplant patients was 0.2-3.2 micrograms/ml (mean = 1.04). The hemodialyzed patients was 0.48-4.5 micrograms/ml (mean = 2.09), and the normal control was 0.30-4.38 micrograms/ml (mean = 2.04). A statistically significant reduction was observed in transplant patients compared to normal control and hemodialyzed patients (p < 0.05 in both cases), whereas between normal and hemodialyzed patients no significant difference was seen (p > 0.05). The reduced levels of Ag sHLA I in blood could be an expression of adequate immunosuppressive treatment.