ABSTRACT
The influence at the progressive motility and post-thawing plasmatic membrane integrity of different extenders (Tris-Yolk-based, Tris-Yolk/Skim Milk-based and Skim Milk-based) was studied in rams frozen semen, using a split-sample technique. The semen was obtained from four Santa Inês located in the district Campos dos Goytacazes, Rio de Janeiro, Brazil. A total of 8 semen collections per ram made possible 672 observations, i.e. 32 semen collections/ 3 semen extenders / 7 observations steps. The progressive motility was determined in the cool semen (Mpi) and after dilution with fraction A of extender (Mp1), a 2-hour balance period (Mp2), dilution in fraction B (Mp3), a 14-hour balance period (Mp4), semen exposure to N2-liquid vapor (Mp5) and post-thawing (Mp6). The sperm plasmatic membrane integrity was determined by employing fluorochromes carboxyfluorescein diacetate and propidium iodide at post-thawing (Mp6). Tris-Yolk-extender showed a Tris-Yolk/Skim Milk- and Skim Milk-extenders superior performance on recovering the post-thawing progressive motility. The rams presented the highest post-thawing sperm membrane integrity when the semen was frozen in Skim Milk-extender, in comparison to the Tris-Yolk and Tris-Yolk/Skim Milk-extenders. Concluding, it is necessary to elucidate the protection underlying mechanism conferred by the extenders studied over the investigated sperm
Foi estudada a influência do leite em pó desnatado, usando-se a técnica de subdivisões da amostragem, sobre a motilidade progressiva e integridade de membrana plasmática, após o congelamento/descongelamento de sêmen ovino. O sêmen foi obtido de quatro carneiros da raça Santa Inês, localizados no distrito de Campos dos Goytacazes, Rio de Janeiro, Brasil. Um total de 8 coletas de sêmen por carneiro possibilitou 672 observações, i.e., 32 coletas de sêmen/ 3 diluidores de sêmen / 7 repetições. As observações da motilidade progressiva foram avaliadas no sêmen fresco (Mpi), após a diluição com a fração A do diluente (Mp1), o período de equilíbrio de 2 horas (Mp2), a diluição com a fração B (Mp3), o período de equilíbrio de 14 horas (Mp4), a exposição do sêmen ao vapor de N2-líquido (Mp5) e o descongelamento (Mp6). A integridade de membrana plasmática foi avaliada por meio dos fluorocromos, diacetato de carboxifluoresceína e iodeto de propídio no pós-descongelamento (Mp6). Os diluentes utilizados para o congelamento do sêmen foram Tris-Gema, Tris-Gema-Leite e Leite. O diluente Tris-Gema mostrou desempenho superior aos diluentes Tris-Gema-Leite e Leite no que se refere à recuperação da motilidade progressiva após o descongelamento. Os carneiros da raça Santa Inês apresentaram maior integridade de membrana espermática pós-descongelamento quando o sêmen foi congelado no diluente Leite,
ABSTRACT
The influence at the progressive motility and post-thawing plasmatic membrane integrity of different extenders (Tris-Yolk-based, Tris-Yolk/Skim Milk-based and Skim Milk-based) was studied in rams frozen semen, using a split-sample technique. The semen was obtained from four Santa Inês located in the district Campos dos Goytacazes, Rio de Janeiro, Brazil. A total of 8 semen collections per ram made possible 672 observations, i.e. 32 semen collections/ 3 semen extenders / 7 observations steps. The progressive motility was determined in the cool semen (Mpi) and after dilution with fraction A of extender (Mp1), a 2-hour balance period (Mp2), dilution in fraction B (Mp3), a 14-hour balance period (Mp4), semen exposure to N2-liquid vapor (Mp5) and post-thawing (Mp6). The sperm plasmatic membrane integrity was determined by employing fluorochromes carboxyfluorescein diacetate and propidium iodide at post-thawing (Mp6). Tris-Yolk-extender showed a Tris-Yolk/Skim Milk- and Skim Milk-extenders superior performance on recovering the post-thawing progressive motility. The rams presented the highest post-thawing sperm membrane integrity when the semen was frozen in Skim Milk-extender, in comparison to the Tris-Yolk and Tris-Yolk/Skim Milk-extenders. Concluding, it is necessary to elucidate the protection underlying mechanism conferred by the extenders studied over the investigated sperm
Foi estudada a influência do leite em pó desnatado, usando-se a técnica de subdivisões da amostragem, sobre a motilidade progressiva e integridade de membrana plasmática, após o congelamento/descongelamento de sêmen ovino. O sêmen foi obtido de quatro carneiros da raça Santa Inês, localizados no distrito de Campos dos Goytacazes, Rio de Janeiro, Brasil. Um total de 8 coletas de sêmen por carneiro possibilitou 672 observações, i.e., 32 coletas de sêmen/ 3 diluidores de sêmen / 7 repetições. As observações da motilidade progressiva foram avaliadas no sêmen fresco (Mpi), após a diluição com a fração A do diluente (Mp1), o período de equilíbrio de 2 horas (Mp2), a diluição com a fração B (Mp3), o período de equilíbrio de 14 horas (Mp4), a exposição do sêmen ao vapor de N2-líquido (Mp5) e o descongelamento (Mp6). A integridade de membrana plasmática foi avaliada por meio dos fluorocromos, diacetato de carboxifluoresceína e iodeto de propídio no pós-descongelamento (Mp6). Os diluentes utilizados para o congelamento do sêmen foram Tris-Gema, Tris-Gema-Leite e Leite. O diluente Tris-Gema mostrou desempenho superior aos diluentes Tris-Gema-Leite e Leite no que se refere à recuperação da motilidade progressiva após o descongelamento. Os carneiros da raça Santa Inês apresentaram maior integridade de membrana espermática pós-descongelamento quando o sêmen foi congelado no diluente Leite,