The effect of magnification loupes on the performance of preclinical dental students.

OBJECTIVE: optical magnifying devices such as magnification loupes are increasingly used in clinical practice and educational settings. However, scientific evidence to validate their benefits is limited. This study assessed the effect of dental magnification loupes on psychomotor skill acquisition during a preclinical operative dentistry course. METHOD AND MATERIALS: the performance of first-year dental students was assessed during an Advanced Simulation Course (AS) using virtual reality-based technology (VRBT) training. The test group consisted of 116 dental students using magnification loupes (+MAG), while students not using them (-MAG, n = 116) served as the control. The following parameters were evaluated: number of successfully passing preparation procedures per course rotation, amount of time per tooth preparation, number of times students needed computer assistance and evaluation, and amount of time spent in the computer assistance and evaluation mode per procedure. Data were collected on each student through VRBT during the preparation procedure and stored on a closed network server computer. Unpaired t tests were used to analyze mean differences between the groups. In addition, student acceptance of magnification loupes was measured and evaluated through survey interpretation. RESULTS: +MAG students completed more preparations, worked faster per procedure, and used the computer-assisted evaluation less frequently and for shorter periods, therefore displaying greater overall performance. The survey revealed a high degree of student acceptance of using magnification. CONCLUSION: dental magnification loupes significantly enhanced student performance during preclinical dental education and were considered an effective adjunct by the students who used them.

Characterization of Newcastle disease viruses isolated from chicken, gamefowl, pigeon and quail in Mexico.

Velogenic Newcastle disease has threatened the Mexican poultry industry since 1946. Seven strains of velogenic Newcastle disease virus were isolated from poultry and other avian species in central and northern Mexico from 1998 to 2006 and subjected to phylogenetic analysis and biological characterization using standard pathogenicity tests and challenge studies. Phylogenetic analysis showed that all velogenic strains belonged to genetic group V and are clearly divided in two lineages, since phylogenetic similarities between groups are of only 93-94%. Isolates from 1998 to 2001 are closely related to the strain responsible for the 2000 year outbreak raised in La Laguna region (Torreon strain), and are phylogenetically distinct from viruses isolated between 2004 and 2006 that are genetically related to the Chimalhuacan strain isolated in 1973. All the viruses of both, the Chimalhuacan and the Torreon groups, contained a virulent fusion protein cleavage site represented by the motif "GGRRQKRF", revealing that evolutionary changes occurred at a different site. Chicken embryo mean death time value was shorter for the Chimalhuacan-like viruses (43.9 hours), when compared with the 1998-2001 average (54.3 hours). ICPI average value was higher (1.92) for viruses isolated during 2004-2006 than that for viruses isolated before 2001 (1.74). Microscopic evaluation of bursa of Fabricius and thymus of 5w-o broiler chickens challenged with 106 LD50/0.2 ml showed that Chimalhuacan-like isolate caused more severe lesions at 48 hpi in bursa and 72 and 96 hpi in thymus than Torreon-like isolate. Along with the MDT, ICPI and microscopic results, our findings suggest that some distinct selective pressure on the very virulent Chimalhuacan strain isolated in early 1970's may have led to the appearance of the still velogenic but less virulent new group (Torreon-like) in the middle of 1990's.

Matrix-encapsulation cell-seeding technique to prevent cell detachment during arthroscopic implantation of matrix-induced autologous chondrocytes.

PURPOSE: The goal of this study is to evaluate the efficiency of obtaining a large number of viable cells within a construct that will not be detached by high fluid flow during arthroscopic implantation. METHODS: Arthroscopic osteochondral biopsy specimens were obtained from the medial femoral trochlea of 8 horses. Chondrocytes were isolated by collagenase digestion and expanded in M199 media until confluency. After 10 to 12 days, cultures were trypsinized and cells resuspended in culture media. Then, 5 x 10(6) cells x mL(-1) were seeded on a culture dish and the same amount in a flask. Once extracellular matrix was formed, a polyglycolic/polylactic acid disk was placed in the culture dish. Cells obtained from the culture flasks (2 x 10(7) cells) were seeded onto the polymer and encapsulated by lifting the monolayer of cells and matrix from the bottom of the dish with surgical forceps. On days 1, 3, 5, 7, and 9, viability was evaluated by calcein fluorescence. Fiber cell attachment was evaluated before implantation by environmental scanning electron microscopy. Six horses were implanted with naive cell-polymer constructs, and two horses were implanted with adenoviral vector with green fluorescent protein (AdGFP)-transduced cells. Biopsy specimens of repair tissue were evaluated at 8 weeks in 6 horses and at 4 weeks in the 2 horses implanted with AdGFP-transduced cells by second-look arthroscopy and biopsy, histochemistry, and confocal laser scanning microscopy via MitoTracker Red 580 (Invitrogen [Molecular Probes], Gibco, Carlsbad, CA) to assess cell viability. RESULTS: Viability and attachment of cells to polymer were confirmed by calcein fluorescence microscopy and environmental scanning electron microscopy. Consistency of the construct was ideal for implantation between 7 and 9 days. Repair tissue with AdGFP chondrocytes after 4 weeks showed fluorescent cells also positive to MitoTracker probe by confocal laser scanning microscopy. Repair tissue after 8 weeks showed very cellular new tissue formation with good attachment to subchondral bone and adjacent cartilage. CONCLUSIONS: The matrix-encapsulation cell-seeding technique allowed us to maintain a sufficient number of viable cells within the polymer construct despite the high-pressure fluid flow that occurred during arthroscopic implantation when we used a pump for direct visualization. CLINICAL RELEVANCE: Arthroscopic implantation of cell-polymer constructs via a fluid pump can be performed without the risk of cell loss with the use of a simple cell-seeding technique.

Infección cervical por virus del papiloma humano: genotipificación por hibridación in situ y análisis ultraestructural por microscopia electrónica de transmisión

INTRODUCCIÓN: El virus del papiloma humano (VPH) es el virus que más frecuentemente se transmite por contacto sexual y está fuertemente asociado con el cáncer cérvicouterino. Los tipos virales que se documentan con mayor frecuencia en el epitelio cervical son 6, 11, 16, 18, 31 y 33, los cuales difieren en su capacidad oncogénica; los dos primeros presentan bajo potencial y los últimos alto potencial oncogénico. Objetivo: Identificar los tipos de VPH presentes en biopsias de cervix con evidencia citológica, colposcópica e histopatológica de infección viral, y realizar un análisis ultraestructural de los cambios celulares asociados. Material y métodos: Usamos la hibridación in situ (HIS) con sondas biotiniladas para identificar los tipos virales, y las biopsias positivas se procesaron para análisis ultraestructural por microscopia electrónica. Resultados: Se analizaron por HIS 63 biopsias cervicales, 24 (38%) resultaron positivas para alguno de los tipos virales probados, los más frecuentes fueron los tipos 6/11 (24%), los cuales en el análisis ultraestructural se asociaron a la presencia de varios nucléolos en núcleos con bordes crenados, en tanto que los tipos oncogénicos se asociaron con la presencia de partículas virales en núcleos, que frecuentemente se presentan multilobulados y con inclusiones citoplasmáticas. En ambos casos es evidente la desorganización de los desmosomas. Conclusiones: La prevalencia de VPH encontrada en este estudio concuerda con lo reportado para esta infección viral en otros estudios donde se usa la misma técnica, los tipos virales concuerdan con el diagnóstico inicial, y el estudio ultraestructural arroja evidencias sobre las principales alteraciones celulares asociadas a la infección viral.

Introduction: Human papillomavirus (HPV) is the most common sexually transmitted virus, is strongly associated with cervical cancer. HPV genital types differs in oncogenic potential, types 6/11 are low-risk and, types 16/18, 31/33 are high-risk. In situ Hybridization (ISH) analysis has advantage of being able to detect both, the specific cellular types infected with viral DNA and the HPV types in cervical biopsies and therefore, cervical cancer patient's risk. Objective: This work was performed in order to typing HPV in cervical biopsies with cytological, colposcopical and histopathological evidence of HPV infection, and to search ultrastructural changes associates with viral infection. Results: We analyzed, by ISH, 63 cervical biopsies, 24 (38%) positives to some viral type, HPV types 6/11 were more common types (24%) consistent with the more frequent, both colposcopical and histopathological diagnostic; Low-grade intraepithelial lesion. Ultraestructural analysis showed cellular alteration in association with low-risk types, principally irregular nucleus and several nucleolus for nucleus, as long as cells infected with oncogenic types DNA showed multilobulated nucleus, cytoplasmic inclusions and viral particles in nucleus. In both cases is clear an disorganization of cellular junctions desmosomes. Conclusions: The HPV prevalence in this study was consistent with other reported, using ISH analysis, the more common types were low-risk types in agreement with previous diagnostic, and electron microscopy analysis provide evidence on the main cell alterations associated with viral infection.

Análisis ultraestructural de placentas con villitis. Estudio retrospectivo / Ultrastructural analysis of villitis placentae. a retrospective study

La villitis es una inflamación crónica focal o multifocal de las vellocidades coriónicas con infiltración de células mononucleares y áreas de necrosis fibrinoide la cual puede ser producida por infección viral (VIV) o bien puede ser de etiología desconocida (VED). En el presente estudio se realizó un examen morfológico a nivel ultraestructural de 11 placentas con diagnóstico de villitis con el objetivo de establecer una comparación de tipo descriptivo entre las VIV y las VED. Las biopsias fueron procesadas con las técnicas convencionales para microscopía óptica y electrónica. Las observaciones ultraestructurales permitieron confirmar la presencia de partículas virales en cuatro casos, mientras que en los restantes siete no se detectó ningún tipo de virus. Se notó ausencia o disminución focal en las microvellosidades lo cual estuvo asociado con la presencia de necrosis fibrinoide en el estroma y clínicamente a cuatro partos pretérmino y un óbito. En ambos tipos de villitis se encontraron alteraciones en el trofoblasto como engrosamiento de la membrana basal asociado con depósito de material electrodenso similar a calcio; también se observó vacuolización y edema en el estroma de las vellosidades. En algunos casos se notó la presencia de depósitos focales de fibrina asociado con zonas de necrosis en el estroma, precipitados de calcio y cuerpos mielínicos en el sinciotrofoblasto. En los casos de infección viral (dos por CMV y dos positivos para TORCH) los vasos fetales mostraron obliteración y/o trombos. En estos casos se detectaron partículas virales con incremento de las células de Hofbauer y calcificaciones en la membrana basal. En conclusión podemos decir que en ambos tipos de villitis existe una reacción inmunológica que produce la pérdida o disminución de las microvellosidades del trofoblasto con infiltración de células mononucleares y edema. Estas alteraciones reducen importantemente el intercambio materno-fetal de gases, nutrientes, hormonas etc., lo cual puede ser la causa del retraso en el crecimiento, la inmadurez o la muerte del feto

La microscopía electrónica en el diagnóstico de enfermedades infecciosas de transmisión sexual: experiencia institucional / Diagnosis by electronic micrography of sexually transmited diseases. An institutional experience

Se informa los resultados, de seis estudios de enfermedades de transmisión sexual (STD) que se han hecho en nuestra Institución. En infecciones por el citomegalovirus, el diagnóstico por microscopía electrónica se puede efectuar en menos de media hora a través de la tinción negativa (PTA). En casos de mujeres embarazadas y seropositivas para VIH, fue posible demostrar partículas semejantes a virus de VIH en diferentes niveles dentro del tejido placentario. En los núcleos de celulas del epitelio cervical se observaron partículas virales semejantes a papilomavirus. En este estudio se confirmó que los Mycoplasmas pueden adherirse o penetrar en los espermatozoides. También se muestra que la Chlamydia trachomatis puede llevar a cabo su ciclo vital en el interior de células espermáticas. Finalmente, material fotográfico es presentado para mostrar los mecanismos de invasión de la Gardnerella vaginalis en células epiteliales vaginales

Efecto protector de la albúmina sobre las membranas del espermatozoide humano en la capacitación espermática in vitro / Albumin protective effect on human spermatozoa membranes during in vitro sperm capacitation

Se estudió el efecto de la preparación in vitro de semen sobre la estructura y sobrevida del espermatozoide humano, con el objeto de valuar si la albúmina protege las membranas durante la centrifugación. Se analizaron de manera cegada y aleatoria 12 muestras seminales de hombres fértiles a las cuales se les trató por tres métodos diferentes (swim-up, gradientes de albúmina, gradientes de percoll), para separar la fracción móvil de espermatozoides. Las membranas plasmática y acrosomal externa y la sustancia acrosomal de los espermatozoides fueron observadas al microscopio electrónico de transmisión en 50 espermatozoides por muestra y la viabilidad y movilidad progresiva se analizó después de incubación durante 24 horas a 37ºC. Se presenta evidencia que sugiere que la albúmina estabiliza la membrana acrosomal externa del espermatozoide humano e incrementa la viabilidad de esta célula

Cambios en la reserva hipofisiaria de gonadotropinas en relación al daño testicular / Gonadotrophy hypophisiary storage changes in relation to the testicular damage

Con el objeto de estudiar la correlación morfo-funcional del eje hipotálamo-hipófisis-testículo en el humano, se estudiaron 20 pacientes con azoospermia, volumen testicular normal y concentraciones normales o discretamente elevadas de hormona folículoestimulante. En todos los casos se practicó biopsias testicular unilateral y determinaciones de hormona luteinizante (LH), hormona folículo estimulante (FSH), testosterona libre (TL) y estradiol (E), tanto en condiciones basales como su respuesta dinámica en una prueba de citrato de omifeno (CC:100 mg/día/7 días). Se observó un incremento progresivo de FSH en relación con la severidad del daño testicular (r=0.68; p<0.001). La respuesta de FSH al CC fué mayor que la de LH en los casos en que el índice FSH/LH era superior a 1.06. Estos datos confirman la existencia de un nivel fino de regulación de la gónada hacia el eje hipotálamo-hipófisis

Prevalencia del ateroma coronario microscópico en adultos jóvenes de la Ciudad de México / Prevalence of microscopic coronary atheroma in young male inhabitants of Mexico City

Se estudió la prevalencia de la ateromatosis microscópica en la porción proximal de la arteria coronaria descendente anterior en 38 sujetos masculinos entre los 20 y los 29 años de edad, muertos accidentalmente y representativos de la clase socioeconómica mayoritaria de la ciudad de México. En 11 (33%) existía ateroma coronario con grados variables de obstrucción luminal, siendo en dos de ellos mayor del 75%. Esta prevalencia es superior a la observada por nosotros en sujetos más jóvenes del mismo nivel socio-económico y es menor y con lesiones menos importantes, que la encontrada en sujetos mayores de 40 años. Estos resultados sugieren, que al igual que en algunas otras partes del mundo, en la ciudad de México un número importante de varones, con bajo nivel socioeconómico, desarrolla aterosclerosis coronaria en la tercera década de la vida. Estos resultados pudieran poner en duda conceptos tenidos hasta ahora en nuestro medio de la relación entre el estado socioeconómico y la prevalencia de aterosclerosis coronaria