Architectural remodelling in lungs of rabbits induced by type V collagen immunization: a preliminary morphologic model to study diffuse connective tissue diseases.

The pathogenesis of diffuse connective tissue diseases (DCTD) is still unknown and has been extensively studied regarding its autoimmunity aspects related to extracellular matrix (ECM) remodelling, with an emphasis on the collagens at the inflammatory site. The present paper describes the pulmonary architectural and repair/remodelling responses to injury after immunization of rabbits with human type V collagen. The animal model consisted of rabbits immunized with collagen mixed with Freund's adjuvant and sacrificed 7, 15, 30, 75, and 120 days after the first of four doses of antigen. Pulmonary architecture remodelling response was evaluated by histology, morphometry, and the immunofluorescence method, according to compartments of reference (parenchyma and interstitium) and injury: 1 inflammation (polymorphonuclear and mononuclear cells); 2-repair (fibrosis) and 3-ECM remodelling (collagen system). The results showed an intense inflammatory involvement of the pulmonary vascular and bronchiolar parenchyma, characterized by increased wall thickness in small arteries, infiltrations by pseudoeosinophils, and mononuclear cells. Progressive remodelling of the pulmonary ECM was characterized by collagen deposition in the septal and bronchovascular interstitium, especially in rabbits sacrifices at 75 and 120 days. The ECM remodelling process was not reproduced when rabbits were inoculated with collagen types I and III. We conclude that the model reproduces morphologic changes similar to those observed in many DCTD, encouraging realization of other experiments to gain a better understanding of the pathogenesis of these diseases.

Caracterização bioquímica do colágeno do tipo VI na osteoartrose experimental / Biochemical characterization of type VI collagen in experimental osteoarthritis

Objetivo - A razão deste estudo foi avaliar o conteúdo de colágeno do tipo VI presente na cartilagem normal e osteoartrósica em coelhos submetidos a meniscectomia parcial. Metodologia - Avaliação histológica da cartilagem através do tricômico de Mallory e isolamento do colágeno do tipo VI com cloreto de guanidina 4M, assim como a caracterização de suas cadeias por eletroforese em gel de poliacrilamida e cromatografia líquida. Resultados - Na fase inicial da indução, equivalente a três semanas, e na fase mais tardia da doença, 14 semanas, foi encontrado aumento gradativo nos níveis de colágeno do tipo VI extraídos em relação às cartilagens normais e aumento dos aminoácidos 4-hidroxiprolina e cisteína. Conclusão - Os resultados sugerem que existe maior produção de colágeno do tipo VI nas cartilagens osteoartrósicas e que este fato parece ter relação direta com o tempo de doença e grau de degeneração cartilaginosa

Análise morfológica da cartilagem articular de coelhos submetidos a meniscectomia parcial / Morphologic analysis of the articular cartilage of rabbits submitted to partial meniscectomy

A osteoartrose é uma doença degenerativa da cartilagem articular que provoca rigidez e dor nas articulações acometidas. Vários fatores podem ser responsáveis por seu desenvolvimento. Os principais elementos desencadeadores são os mecânicos e os bioquímicos, que provocam um turnover acelerado da cartilagem, ou seja, um desbalanceamento entre produção e degradação do colágeno da matriz extracelular. Nesta doença, os colágenos próprios da cartilagem são degradados, causando alterações relevantes na estrutura do tecido. Pelo método da meniscectomia parcial em coelhos foram obtidas alterações semelhantes às encontradas na osteoartrose humana, facilitando o estudo dos mecanismos iniciais da doença. Após 14 semanas de indução foi realizado estudo morfológico nas amostras de cartilagem articular, através da hematoxilina-eosina e do tricrômico de Mallory. Observou-se, através da hematoxilina-eosina, degradação das células da camada superficial, além de mudanças na organização celular da área profunda do tecido. Pelo tricrômico de Mallory, modificações importantes no colágeno da matriz extracelular, principalmente da camada superficial, puderam ser evidenciadas. Esses achados reforçam a idéia de que a meniscectomia parcial em coelhos é um excelente modo de indução da osteoartrose, reproduzindo os padrões encontrados na osteoartrose humana

Quantificação do colágeno XI em cartilagem articular de coelhos com osteoartrose / Quantification of collagen type XI in articular cartilage of rabbits with osteoarthritis

A osteoartrose é uma doença degenerativa que atinge principalmente a cartilagem, osso subcondral e outras estruturas articulares. Esta cartilagem é formada por tecido conectivo altamente diferenciado constituído por uma densa matriz, avascular e hipocelular. A porção fibrosa da cartilagem articular é constituída principalmente por colágeno, sendo este um dos componentes de maior importância da matriz cartilaginosa. Entre os colágenos fibrilares da cartilagem articular pode-se ressaltar o tipo XI que, apesar de sua localização e função na fibra colágena não serem bem conhecidas, parece exercer função importante na organização da arquitetura das fibras. Neste estudo, o colágeno XI foi isolado a partir da cartilagem articular de coelhos normais e de coelhos submetidos a meniscectomia parcial, com período de indução equivalente a 14 semanas. A cartilagem foi tratada com pepsina e o colágeno foi fracionado através de gradiente sequencial salino com cloreto de sódio, analisado por SDS-PAGE e densitometria. Os resultados indicaram mudança no perfil eletroforético das cadeias do colágeno do tipo XI, na cartilagem dos animais após 14 semanas de indução, quando comparadas com os controles normais, sugerindo participação ativa desse tipo de colágeno na evolução do processo degenerativo articular