ABSTRACT
ABSTRACT: Ensilage is a simple and low-cost strategy to enable long term preservation and environmentally friendly utilization of agricultural by-products, such as straws and distiller's grains (DG) for ruminants. Effect of mixing different proportions of DG and rice straw (i.e. 0, 10, 20 or 30% of DG) with or without 5% molasses addition on fermentation and chemical variables of silages was evaluated. The study was conducted as a randomized blocks design in a 4 × 2 factorial arrangement, with three replications, using laboratory silos of 1L capacity (n=24). Despite a significant interaction (P<0.01) between DG and molasses addition was observed for most variables, in general the increased addition of DG linearly decreased the pH value, acetic acid (AA), butyric acid (BA) and ammonia N concentration (P<0.01), and increased the lactic acid (LA) concentration (P<0.01). Exception was the propionic acid concentration which linearly decreased without molasses addition and linearly increased with molasses addition at increased proportion of DG (P<0.01). In both silages with or without molasses the addition of DG increased the dry matter, water soluble carbohydrates and crude protein (P<0.01), and decreased the NDF content (P<0.01). Based on the perspective of maximum utilization of rice straw, the mixture of 10% of DG associated to 5% molasses at ensilage process is recommended.
RESUMO: Ensilagem é uma estratégia simples e de baixo custo que habilita a preservação de sub-produtos agrícolas por longo tempo e com mínimo impacto ambiental, tal como a preservação de palha de arroz e resíduos da destilação de grãos (DG) para uso na alimentação de ruminantes. O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito de incluir diferentes proporções de DG e palha de arroz (i.e. 0, 10, 20 or 30% of DG) com ou sem inclusão de 5% de melaço sobre variáveis da fermentação e composição química do material ensilado. O estudo foi conduzido em blocos casualizados em um esquema fatorial 4 × 2, com três repetições, utilizando mini-silos de 1L de capacidade (n=24). Embora a interação entre DG e melaço foi significativa (P<0,01) para a maior parte das variáveis, em geral a adição de DG diminuiu linearmente o pH e as concentrações de ácido acético, ácido butírico e amônia (P<0,01), e aumentou linearmente a concentração de ácido láctico (P<0,01). Exceção foi a concentração de ácido propiônico que diminuiu linearmente sem a adição de melaço enquanto aumentou linearmente com a adição de melaço, à incrementados níveis de inclusão de DG (P<0,01). Em ambos casos, com ou sem adição de melaço, a adição de DG aumentou linearmente o teor de matéria seca, de carboidratos solúveis em água e de proteína bruta, e diminuiu o teor de fibra em detergente neutro do material ensilado the NDF content (P<0,01). Baseado na perspectiva de máxima utilização de palha da arroz, recomenda-se a mistura de 10% de DG associado com 5% de melaço no processo de ensilagem.
ABSTRACT
Background: Cold-active endo-1, 4-β-glucanase (EglC) can decrease energy costs and prevent product denaturation in biotechnological processes. However, the nature EglC from C. farmeri A1 showed very low activity (800 U/L). In an attempt to increase its expression level, C. farmeri EglC was expressed in Escherichia coli as an N-terminal fusion to protein S (ProS) from Myxococcus xanthus. Results: A novel expression vector, pET(ProS-EglC), was successfully constructed for the expression of C. farmeri EglC in E. coli. SDS-PAGE showed that the recombinant protein (ProS-EglC) was approximately 60 kDa. The activity of ProS-EglC was 12,400 U/L, which was considerably higher than that of the nature EglC (800 U/L). ProS-EglC was active at pH 6.5-pH 8.0, with optimum activity at pH 7.0. The recombinant protein was stable at pH 3.5-pH 6.5 for 30 min. The optimal temperature for activity of ProS-EglC was 30°C-40°C. It showed greater than 50% of maximum activity even at 5°C, indicating that the ProS-EglC is a cold-active enzyme. Its activity was increased by Co2+ and Fe2+, but decreased by Cd2+, Zn2+, Li+, methanol, Triton-X-100, acetonitrile, Tween 80, and SDS. Conclusions: The ProS-EglC is promising in application of various biotechnological processes because of its cold-active characterizations. This study also suggests a useful strategy for the expression of foreign proteins in E. coli using a ProS tag.
Subject(s)
Cellulases/metabolism , Citrobacter/enzymology , Escherichia coli/enzymology , Myxococcus xanthus/enzymology , Cold Temperature , Genetic Vectors , Recombinant ProteinsABSTRACT
Ensilage is a simple and low-cost strategy to enable long term preservation and environmentally friendly utilization of agricultural by-products, such as straws and distiller's grains (DG) for ruminants. Effect of mixing different proportions of DG and rice straw (i.e. 0, 10, 20 or 30% of DG) with or without 5% molasses addition on fermentation and chemical variables of silages was evaluated. The study was conducted as a randomized blocks design in a 4 × 2 factorial arrangement, with three replications, using laboratory silos of 1L capacity (n=24). Despite a significant interaction (P<0.01) between DG and molasses addition was observed for most variables, in general the increased addition of DG linearly decreased the pH value, acetic acid (AA), butyric acid (BA) and ammonia N concentration (P<0.01), and increased the lactic acid (LA) concentration (P<0.01). Exception was the propionic acid concentration which linearly decreased without molasses addition and linearly increased with molasses addition at increased proportion of DG (P<0.01). In both silages with or without molasses the addition of DG increased the dry matter, water soluble carbohydrates and crude protein (P<0.01), and decreased the NDF content (P<0.01). Based on the perspective of maximum utilization of rice straw, the mixture of 10% of DG associated to 5% molasses at ensilage process is recommended.(AU)
Ensilagem é uma estratégia simples e de baixo custo que habilita a preservação de sub-produtos agrícolas por longo tempo e com mínimo impacto ambiental, tal como a preservação de palha de arroz e resíduos da destilação de grãos (DG) para uso na alimentação de ruminantes. O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito de incluir diferentes proporções de DG e palha de arroz (i.e. 0, 10, 20 or 30% of DG) com ou sem inclusão de 5% de melaço sobre variáveis da fermentação e composição química do material ensilado. O estudo foi conduzido em blocos casualizados em um esquema fatorial 4 × 2, com três repetições, utilizando mini-silos de 1L de capacidade (n=24). Embora a interação entre DG e melaço foi significativa (P<0,01) para a maior parte das variáveis, em geral a adição de DG diminuiu linearmente o pH e as concentrações de ácido acético, ácido butírico e amônia (P<0,01), e aumentou linearmente a concentração de ácido láctico (P<0,01). Exceção foi a concentração de ácido propiônico que diminuiu linearmente sem a adição de melaço enquanto aumentou linearmente com a adição de melaço, à incrementados níveis de inclusão de DG (P<0,01). Em ambos casos, com ou sem adição de melaço, a adição de DG aumentou linearmente o teor de matéria seca, de carboidratos solúveis em água e de proteína bruta, e diminuiu o teor de fibra em detergente neutro do material ensilado the NDF content (P<0,01). Baseado na perspectiva de máxima utilização de palha da arroz, recomenda-se a mistura de 10% de DG associado com 5% de melaço no processo de ensilagem.(AU)