ABSTRACT
@#［摘要］ 目的：探讨lncRNA HOTTIP 对肺癌细胞增殖、凋亡及EMT 的影响及其作用机制。方法：利用qPCR 检测lncRNA HOTTIP、miR-637 和KLK4 在肺癌SPC-A-1、正常肺上皮BEAS-2B细胞中的表达量；siRNA干扰SPC-A-1 细胞中lncRNA HOTTIP 的表达后，分别通过CCK-8、Transwell、流式细胞术和WB法检测SPC-A-1 细胞增殖、侵袭、凋亡和EMT能力的变化。miRanda 软 件和双荧光素酶报告基因实验分析lncRNA HOTTIP 和miR-637 之间的靶向关系，RNA pull-down 实验检测lncRNA HOTTIP 和 miR-637 的吸附作用，检测lncRNA HOTTIP 通过miR-637 对SPC-A-1 细胞增殖、侵袭、凋亡和EMT的调控。利用TargetScan 软件 分析miR-637 与KLK4 的相关性，双荧光素酶报告基因实验检测miR-637 与KLK4 mRNA 之间的相互作用；检测miR-637 通过 KLK4 mRNA对SPC-A-1 细胞增殖、侵袭、凋亡和EMT 的调控。下调lncRNA HOTTIP 和miR-637 表达后，利用qPCR和WB检测 KLK4 mRNA 和蛋白表达水平的变化。结果：与BEAS-2B 细胞比，在SPC-A-1 细胞中lncRNA HOTTIP 呈高表达（P<0.01）， miR-637 呈低表达（P<0.01），KLK4 呈高表达（P<0.01）。下调lncRNA HOTTIP 后，SPC-A-1 细胞增殖、侵袭与EMT能力显著减弱， 细胞凋亡率显著上升（P<0.01）；lncRNA HOTTIP 与miR-637 具有靶向关系；下调miR-637 表达后，SPC-A-1 细胞增殖、侵袭与EMT 能力显著上升，细胞凋亡率显著降低（P<0.01）。miR-637 与KLK4 3'UTR特异性结合。miR-637 通过KLK4 显著促进了SPC-A-1 细胞增殖、侵袭与EMT，细胞凋亡率显著上升（P<0.01）。下调lncRNA HOTTIP 使KLK4 表达显著降低，而下调miR-637 可促进 KLK4 表达（P<0.05）。结论：上调lncRNA HOTTIP 可通过miR-637/KLK4 轴促进肺癌SPC-A-1 细胞的增殖、侵袭与EMT 而抑制 癌细胞凋亡。
