Expression of Ki-67 and P16 INK4a in chemically-induced perioral squamous cell carcinomas in mice / Expressão KI-67 e P16 INK4a em carcinomas espinocelulares periorais quimicamente induzidos em camundongos

ABSTRACT Objective: to evaluate the influence of Ki-67 and P16INK4a proteins immunohistochemical expressions on the clinical and morphological parameters of perioral squamous cell carcinoma induced with 9,10-dimethyl-1,2-benzanthracene (DMBA) in mice. Methods: we topically induced the lesions in the oral commissure of ten Swiss mice for 20 weeks, determining the time to tumors onset and the average tumor volume up to 26 weeks. In histopathological analysis, the variables studied were histological malignancy grade and the immunohistochemical expression of Ki-67 and P16INK4a proteins. The correlation between variables was determined by application of the Spearman correlation test. Results: the mean time to onset of perioral lesions was 21.1 ± 2.13 weeks; mean tumor volume was 555.91 ± 205.52 mm3. Of the induced tumors, 80% were classified as low score and 20% high score. There was diffuse positivity for Ki-67 in 100% of lesions - Proliferation Index (PI) of 50.1 ± 18.0. There was a strong direct correlation between Ki-67 immunoreactivity and tumor volume (R = 0.702) and a low correlation with the malignancy score (R = 0.486). The P16INK4a protein expression was heterogeneous, showing a weak correlation with tumor volume (R = 0.334). There was no correlation between the immunohistochemical expression of the two proteins studied. Conclusion: in an experimental model of DMBA-induced perioral carcinogenesis, tumor progression was associated with the tumor proliferative fraction (Ki-67 positive cells) and with tumor histological grading, but not with P16INK4a expression.

RESUMO Objetivo: avaliar a influência da expressão imuno-histoquímica das proteínas Ki-67 e p16INK4a sobre parâmetros clínico-morfológicos em carcinomas espinocelulares periorais quimicamente induzidos com 9,10-dimetil-1,2-benzantraceno (DMBA) em modelo murino. Métodos: as lesões foram induzidas topicamente na comissura labial de dez camundongos Swiss durante 20 semanas, sendo determinado o momento de surgimento dos tumores e volume tumoral médio até 26 semanas. Na análise histopatológica, as variáveis estudadas foram gradação histológica de malignidade tumoral e expressão imuno-histoquímica das proteínas Ki-67 e p16INK4a. A correlação entre as variáveis estudadas foi determinada pela aplicação do teste de correlação de Spearman. Resultados: o tempo médio de surgimento das lesões periorais foi 21,1±2,13 semanas. Volume tumoral médio foi de 555,91±205,52mm3. Dos tumores produzidos, 80% foram classificados como de baixo escore e 20%, alto escore. Evidenciou-se positividade difusa para Ki-67 em 100% das lesões - índice de marcação (PI) de 50,1±18,0. Verificou-se correlação direta forte entre a imunoexpressão do Ki-67 e o volume tumoral (R=0,702) e fraca correlação com o escore de malignidade (R=0,486). A expressão da proteína p16INK4a foi heterogênea, mostrando fraca correlação com o volume tumoral (R=0,334). Não houve correlação entre a expressão imuno-histoquímica das duas proteínas estudadas. Conclusão: Em modelo experimental de carcinogênese perioral DMBA-induzida, a progressão tumoral está associada à fração proliferativa do tumor (células ki-67 positivas) e com a gradação histológica tumoral, porém não com a expressão da p16INK4a.

Effect of green propolis on oral epithelial dysplasia in rats / Efeito da própolis verde sobre displasias epiteliais orais em ratos

Studies have demonstrated that flavonoid compounds of green propolis have antitumoral activity. STUDY DESIGN: Experimental study. AIMS: To evaluate the effect of a hydroalcoholic extract of green propolis (EPV) on chemically induced epithelial dysplasias in rat tongues. METHODS AND MATERIALS: DMBA was brushed on the lingual dorsum of rats 3x/week on alternate days - 100 (PROP1), 200 (PROP2) and 300 mg/kg (PROP3) EPV was administered orally for 20 weeks. EPV or DMBA were replaced by their vehicles and applied as positive (TUM1 and TUM2) and negative controls (CTR1 and CTR2), respectively. The lingual epithelium was histologically analyzed and graded according a binary system and the WHO classification; the data were compared using ANOVA (*p<0.05). RESULTS: The EPV yield was 41 percent and the flavonoid yield was 0.95±0.44 percent. According to the Binary System, TUM1, TUM2 and PROP1 were considered high risk lesions, with significantly higher morphological alteration rates compared to the other groups (p<0.05), which were considered low risk lesions. Based on the WHO classification, moderate dysplasia was TUM1 and TUM2, mild dysplasia was PROP1, PROP2 and PROP3, and non-dysplastic epithelium was CTR1 and CTR2. CONCLUSION: EPV seems to play an important protective role against chemically-induced lingual carcinogenesis in rats.

Estudos têm demonstrado que componentes hidrossolúveis da própolis verde, flavonóides, apresentam atividade antitumoral. FORMA DE ESTUDO: Estudo experimental. OBJETIVO: Avaliar o efeito do extrato hidroalcoólico de própolis verde (EPV) sobre displasias epiteliais linguais quimicamente induzidas em ratos. MATERIAIS E MÉTODOS: Neste estudo, foi pincelado DMBA (9,10-dimetil-1,2- benzatraceno) no dorso lingual de ratos 3x/semana, em dias alternados, administrado 100 (PROP1), 200 (PROP2) e 300 mg/kg (PROP3) de EPV (v.o.), durante 20 semanas. A substituição do EPV ou DMBA pelos seus veículos foi usada nos controles positivos (TUM1 e TUM2), negativos (CTR1 e CTR2), respectivamente. O epitélio lingual foi analisado histologicamente, graduado pelo Sistema Binário e classificação OMS, e os dados comparados por análise de variância (ANOVA) (p<0,05). RESULTADOS: O rendimento do EPV foi 41,43 por cento e o teor de flavonóides 0,95±0,44 por cento. Segundo o Sistema Binário, TUM1, TUM2 e PROP1 foram considerados lesões de alto risco, apresentando índices de alterações morfológicas significativamente mais elevados (p<0,05), e os demais de baixo risco. Segundo a classificação OMS, observou-se displasia moderada em TUM e TUM2, leve em PROP1, PROP2 e PROP3, e ausente em CTR1 e CTR2. Conclusão: Sugere-se que o EPV possa desempenhar um papel protetor importante durante a carcinogênese lingual quimicamente induzida em ratos. CONCLUSÃO: Sugere-se que o EPV possa desempenhar um papel protetor importante durante a carcinogênese lingual quimicamente induzida em ratos.