ABSTRACT
A doença periodontal, afecção crônica inflamatória multifatorial, está entre as principais doenças bucais que afetam a população mundial. Entre as bactérias associadas à periodontite, estão Fusobacterium nucleatum e Aggregactibacter actinomycetemcomitans. Novas terapias adjuntas ao tratamento convencional têm sido propostas para a doença periodontal, entre elas o uso de probióticos. Porém, seu uso não está isento de riscos, e uma alternativa para minimizá-los é inativar os microorganismos, mantendo suas propriedades benéficas, o que ocorre com os chamados paraprobióticos. Desse modo, são objetivos deste estudo avaliar os efeitos antimicrobianos de L. reuteri vivo, inativado pelo calor e seus produtos sobre F. nucleatum, A. actinomycetemcomitans e sobre as bactérias comensais, Streptococcus mitis e Streptococcus salivarius, além de estudar os efeitos da interação das preparações e periodontopatógenos em modelo de invertebrado. A atividade antimicrobiana in vitro foi avaliada associando-se as bactérias patogênicas ou comensais a L. reuteri vivo, inativado ou sobrenadante. Após interação, as bactérias foram cultivadas em meio seletivo para contagem de unidades formadoras de colônias (UFC). No estudo em Galleria mellonella, após a infecção com as bactérias patogênicas e as preparações de L. reuteri, foi avaliada a curva de sobrevivência e densidade hemocitária. Os dados foram analisados com o teste estatístico apropriado, ao nível de 5%. Após interação bacteriana in vitro, S. salivarius reduziu o número de UFC de L. reuteri, enquanto que não houve interferência das outras bactérias. O probiótico foi mais eficiente em reduzir o crescimento das bactérias periodontopatogênicas e comensais, exceto para F. nucleatum onde a preparação do sobrenadante foi melhor. In vivo, o sobrenadante foi mais eficiente em aumentar a sobrevivência das lagartas quando infectadas por F. nucleatum. Entretanto, quando infectadas por A. actinomycetemcomitans, nenhuma das preparações aumentou a sobrevivência. Da mesma maneira, nenhuma das preparações aumentaram o número de hemócitos das lagartas após infecção por F. nucleatum e A. actinomycetemcomitans, apesar de todas resultarem em redução na contagem de colônias das bactérias periodontopatogênicas. Dessa forma, concluiu-se que tanto o probiótico quanto os produtos dele derivados apresentaram efeitos antimicrobianos e aumentaram a sobrevivência de G. mellonella quando infectada por F. nucleatum (AU)
Periodontal disease, a chronic multifactorial inflammatory disease, is among the major oral diseases that affects the worldwide population. Among the bacteria associated with periodontitis are Fusobacterium nucleatum and Aggregactibacter actinomycetemcomitans. New therapies have been proposed for periodontal disease as adjunct to conventional treatment, including the use of probiotics. However, their use isn't risk-free and an alternative to that is the inactivation of the microorganisms, maintaining their beneficial properties, which occurs with the paraprobiotics. Thus, the objective of this study is to evaluate the antimicrobial effects of living and heat-killed L. reuteri, and its products on F. nucleatum, A. actinomycetemcomitans and on the commensal bacteria, Streptococcus mitis and Streptococcus salivarius, as well as to study the interaction of the preparations and periodontopathogens in an invertebrate model. In vitro antimicrobial activity was evaluated by associating the pathogenic or commensal bacteria to live, heat killed or L. reuteri supernatant. After interaction, the bacteria were cultured in a selective medium for colony-forming unit (CFU) count. In the study with Galleria mellonella, after infection with pathogenic bacteria and L. reuteri preparations, the survival curve and hemocyte density were evaluated. The data were analyzed with the appropriate statistical test at the 5% level. After bacterial interaction in vitro, S. salivarius reduced the number of CFU of L. reuteri, while there was no interference of the other bacteria. The probiotic was more efficient in reducing the growth of periodontopathogenic and commensal bacteria, except for F. nucleatum. In this case, the supernatant presented better results. In vivo, the supernatant was more efficient in increasing the larvae survival when infected by F. nucleatum. However, when infected by A. actinomycetemcomitans, none of the preparations increased the survival. Likewise, none of the preparations increased the number of hemocytes of the larvae after infection by F. nucleatum and A. actinomycetemcomitans, although all resulted in reduction in the CFU of the periodontopathogenic bacteria. Thus, it was concluded that the probiotic and the products derived therefrom presented antimicrobial effects and increased the survival of G. mellonella when infected by F. nucleatum.(AU)
Subject(s)
Periodontal Diseases , Fusobacterium nucleatum , Probiotics , Limosilactobacillus reuteriABSTRACT
A doença periodontal, afecção crônica inflamatória multifatorial, está entre as principais doenças bucais que afetam a população mundial. Entre as bactérias associadas à periodontite, estão Fusobacterium nucleatum e Aggregactibacter actinomycetemcomitans. Novas terapias adjuntas ao tratamento convencional têm sido propostas para a doença periodontal, entre elas o uso de probióticos. Porém, seu uso não está isento de riscos, e uma alternativa para minimizá-los é inativar os microorganismos, mantendo suas propriedades benéficas, o que ocorre com os chamados paraprobióticos. Desse modo, são objetivos deste estudo avaliar os efeitos antimicrobianos de L. reuteri vivo, inativado pelo calor e seus produtos sobre F. nucleatum, A. actinomycetemcomitans e sobre as bactérias comensais, Streptococcus mitis e Streptococcus salivarius, além de estudar os efeitos da interação das preparações e periodontopatógenos em modelo de invertebrado. A atividade antimicrobiana in vitro foi avaliada associando-se as bactérias patogênicas ou comensais a L. reuteri vivo, inativado ou sobrenadante. Após interação, as bactérias foram cultivadas em meio seletivo para contagem de unidades formadoras de colônias (UFC). No estudo em Galleria mellonella, após a infecção com as bactérias patogênicas e as preparações de L. reuteri, foi avaliada a curva de sobrevivência e densidade hemocitária. Os dados foram analisados com o teste estatístico apropriado, ao nível de 5%. Após interação bacteriana in vitro, S. salivarius reduziu o número de UFC de L. reuteri, enquanto que não houve interferência das outras bactérias. O probiótico foi mais eficiente em reduzir o crescimento das bactérias periodontopatogênicas e comensais, exceto para F. nucleatum onde a preparação do sobrenadante foi melhor. In vivo, o sobrenadante foi mais eficiente em aumentar a sobrevivência das lagartas quando infectadas por F. nucleatum. Entretanto, quando infectadas por A. actinomycetemcomitans, nenhuma das preparações aumentou a sobrevivência. Da mesma maneira, nenhuma das preparações aumentaram o número de hemócitos das lagartas após infecção por F. nucleatum e A. actinomycetemcomitans, apesar de todas resultarem em redução na contagem de colônias das bactérias periodontopatogênicas. Dessa forma, concluiu-se que tanto o probiótico quanto os produtos dele derivados apresentaram efeitos antimicrobianos e aumentaram a sobrevivência de G. mellonella quando infectada por F. nucleatum(AU)
Periodontal disease, a chronic multifactorial inflammatory disease, is among the major oral diseases that affects the worldwide population. Among the bacteria associated with periodontitis are Fusobacterium nucleatum and Aggregactibacter actinomycetemcomitans. New therapies have been proposed for periodontal disease as adjunct to conventional treatment, including the use of probiotics. However, their use isn't risk-free and an alternative to that is the inactivation of the microorganisms, maintaining their beneficial properties, which occurs with the paraprobiotics. Thus, the objective of this study is to evaluate the antimicrobial effects of living and heat-killed L. reuteri, and its products on F. nucleatum, A. actinomycetemcomitans and on the commensal bacteria, Streptococcus mitis and Streptococcus salivarius, as well as to study the interaction of the preparations and periodontopathogens in an invertebrate model. In vitro antimicrobial activity was evaluated by associating the pathogenic or commensal bacteria to live, heat killed or L. reuteri supernatant. After interaction, the bacteria were cultured in a selective medium for colony-forming unit (CFU) count. In the study with Galleria mellonella, after infection with pathogenic bacteria and L. reuteri preparations, the survival curve and hemocyte density were evaluated. The data were analyzed with the appropriate statistical test at the 5% level. After bacterial interaction in vitro, S. salivarius reduced the number of CFU of L. reuteri, while there was no interference of the other bacteria. The probiotic was more efficient in reducing the growth of periodontopathogenic and commensal bacteria, except for F. nucleatum. In this case, the supernatant presented better results. In vivo, the supernatant was more efficient in increasing the larvae survival when infected by F. nucleatum. However, when infected by A. actinomycetemcomitans, none of the preparations increased the survival. Likewise, none of the preparations increased the number of hemocytes of the larvae after infection by F. nucleatum and A. actinomycetemcomitans, although all resulted in reduction in the CFU of the periodontopathogenic bacteria. Thus, it was concluded that the probiotic and the products derived therefrom presented antimicrobial effects and increased the survival of G. mellonella when infected by F. nucleatum(AU)
