Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) for detection of IgY Anti-Borrelia anserina antibodies in Gallus gallus domesticus / Ensaio de imunoadsorção enzimático (ELISA) indireto para detecção de anticorpos IgY Anti-Borreliaanserina em Gallus gallus domesticus

This study aimed to promote the standardization of an indirect, enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) for the serological detection of B. anserina in Gallus gallusdomesticus. An aliquoted sera from vaccinated chicken with B. anserina antigen (GI), experimental infected chickens with B. anserina (GII) and rustic poultry rearing of G. gallus (GIII) were tested with in-house ELISA developed to detect serum antibodies against B. anserina in G. gallus domesticus. On average, the experimentally infected chickens became positive at 9 DPI a mean ± standard deviation (SD) ODI value of 163.11 ± 70.65. The highest observed Optical Density Index (ODI) was 372.54 ± 132.39, at 26 DPI, and the highest overall ODI value was 626.51. The vaccinated chickens became positive between 8 and 10 DPV, with an ODI of 245.59 at 10 DPV, with an overall maximum ODI of 543.13. A total of 108 blood samples were collected from poultry raised on rustic farms. Of the total samples collected, 58.33% (63/108) were considered positive for B. anserina. The maximum ODI found among these rustic chickens was 283.24. This stardardization provided a sensitivity and specificity of 100%.

Este estudo teve como objetivo promover a padronização de um ensaio imunoenzimático indireto (ELISA) para a detecção sorológica de Borrelia anserina em Gallus gallus domesticus. Um frango vacinado com antígeno de B. anserina (GI), frangos infectados experimentalmente com B. anserina (GII) e frangos criados de forma rústica (GIII) foram testados com ELISA indireto in house desenvolvido para a detecção sorológica contra B. anserina em G. gallus domesticus. Em média, os frangos infectados experimentalmente tornaram-se positivos aos 9º dia pós-inoculação (DPI), um valor do índice de densidade óptica (ODI) médio ± desvio padrão (SD) de 163,11 ± 70,65. O maior ODI observado foi 372,54 ± 132,39, em 26ºDPI, e o maior valor geral de ODI foi 626,51. Os frangos vacinados tornaram-se positivos entre 8º e 10° DPV, com um ODI de 245,59 a 10 DPV, com um ODI máximo geral de 543,13. Um total de 108 amostras de sangue foram coletadas de aves criadas em fazendas rústicas. Do total de amostras coletadas, 58,33% (63/108) foram consideradas positivas para B. anserina. O ODI máximo encontrado entre essas galinhas rústicas foi 283,24. Essa padronização proporcionou sensibilidade e especificidade de 100%.

First serological detection of Borrelia spp. in dogs in western Cuba / Primeira detecção sorológica de Borrelia spp. em cães na região oeste de Cuba

Abstract This study aimed to verify the presence of IgG antibodies against Borrelia burgdorferi sensu lato (s.l) in domestic dogs in western Cuba. Serum samples were analyzed by indirect enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), using crude antigens of a B. burgdorferi strain of North American origin. To verify the presence of Borrelia spp., deoxyribonucleic acid (DNA) extracted from individual blood samples was analyzed by nested-PCR, with markers targeted for amplification of portions of the flagellin B gene (flaB) present in Borrelia spirochetes. Ticks were also collected through inspection of the animals. Sera from 93 of 176 (52.84%) dogs were reactive to the indirect ELISA. Geographic prevalence varied from 54.35% (25/46) in Boyeros, 44.44% (20/45) in Cotorro, 66.67% (22/33) in Habana del Este, and 50% (26/52) in San José de las Lajas. There was no statistical difference between these tested variables. No blood samples analyzed were positive for the Borrelia flaB gene.

Resumo Este estudo teve como objetivo confirmar a presença de anticorpos IgG contra Borrelia burgdorferi sensu lato (s.l) em cães na região oeste de Cuba. As amostras de soro foram analisadas por ensaio de imunoabsorção enzimática (ELISA) indireto, usando-se antígenos brutos de uma cepa de B. burgdorferi de origem norte-americana. Para confirmar a presença de Borrelia spp., o ácido desoxirribonucleico (DNA), extraído de amostras individuais de sangue, foi analisado por PCR, utilizando-se marcadores direcionados para a amplificação de porções do gene da flagelina B (flaB) presente nas espiroquetas de Borrelia. Os carrapatos também foram coletados através da inspeção dos animais. Os soros de 93 de 176 (52,84%) cães foram reativos ao ELISA indireto. A prevalência geográfica variou de 54,35% (25/46) em Boyeros, 44,44% (20/45) em Cotorro, 66,67% (22/33) em Habana del Este e 50% (26/52) em San José de las Lajas. Não houve diferença estatística entre essas variáveis testadas. Nenhuma amostra de sangue analisada foi positiva para o gene Borrelia flaB.

Soroprevalência de anticorpos homólogos anti-Borrelia burgdorferi em equinos de uso militar no Brasil / Seroprevalence of homologous antiBorrelia burgdorferi antibodies in horses of military use in Brazil

A maioria das atividades de treinamento militar transcorre em ambiente de risco para aquisição de doenças de transmissão vetorial, incluindo importantes zoonoses e doenças emergentes/reemergentes. O objetivo deste estudo foi relatar a ocorrência de anticorpos homólogos da classe IgG anti-Borrelia burgdorferi em equinos de uso militar no Brasil, assim como analisar os fatores de risco associados à soropositividade nos animais. Foram estudados dois plantéis de equinos, sendo um no município de Resende, estado do Rio de Janeiro, tendo sido encontrada prevalência de 29,9%, e outro no município de São Borja, estado do Rio Grande do Sul, com prevalência de 44,7%, totalizando 474 animais e prevalência de 39,24%. Na análise dos fatores de risco associados, observou-se que a infestação por carrapatos constituiu-se no fator de risco para a soropositividade. A evidência de circulação de Borrelia spp. com soroprevalência nos equinos reforça seu papel como sentinela, sendo fator de alerta para potencial ocorrência de casos humanos. Os resultados obtidos reforçam a importância da vigilância epidemiológica dos carrapatos vetores e sua associação tanto com agentes infecciosos de risco para a saúde do efetivo militar humano, como nos equinos de uso militar nas regiões avaliadas. Isto também realça a necessidade da adoção de medidas de proteção coletivas e individuais visando mitigar o risco de doenças transmitidas por carrapatos em atividades militares.

Comparative analysis of the roles of Ixodes persulcatus and I. trianguliceps ticks in natural foci of ixodid tick-borne borrelioses in the Middle Urals, Russia.

Long-term studies on natural foci of ixodid tick-borne borrelioses (ITBB) have been performed in Chusovskoi district of Perm region, the Middle Urals, where the vectors of these infections are represented by two ixodid tick species: the taiga tick Ixodes persulcatus and many times less abundant vole tick I. trianguliceps. Over 10 years, more than 6000 half-engorged ticks were collected from small forest mammals using the standard procedure, and 1027 I. persulcatus and 1142 I. trianguliceps ticks, individually or in pools, were used to inoculate BSK-2 medium. As a result, 199 Borrelia isolates were obtained. Among them, 177 isolates were identified, and the rrf(5S)-rrl(23S) intergenic spacer sequence was determined in 57 isolates. The prevalence of Borrelia infection in I. persulcatus larvae and nymphs averaged 31.0 and 53.3%, while that in I. trianguliceps larvae, nymphs, and adult ticks was five to ten times lower: 2.6, 10.2, and 8.1%, respectively. Each of the two tick species was found to carry both ITBB agents circulating in the Middle Ural foci (Borrelia garinii and B. afzelii), but the set of genogroups and genovariants of these spirochetes in I. trianguliceps proved to be far less diverse. According to the available data, this tick, compared to I. persulcatus, is generally less susceptible to Borrelia infection (especially by B. afzelii). Taking into account of its relatively low abundance, it appears that I. trianguliceps cannot seriously influence the course of epizootic process in ITBB foci of the study region, whereas highly abundant I. persulcatus with the high level of Borrelia infection is obviously a key component of these parasitic systems. A similar situation may well be typical for the entire geographic range shared by the two tick species.