Efecto de los microplásticos de poliestireno sobre el citoesqueleto de células humanas / Effect of Polystyrene Microplastics on the Cytoskeleton of Human Cells

Resumen El plástico se ha vuelto muy popular en los últimos años gracias a su durabilidad y propiedades. A pesar de sus múltiples ventajas, la humanidad ha desarrollado cierta dependencia hacia este material, lo que ha propiciado un incremento en su uso y, a su vez, en la generación de desechos ante el escaso hábito de reúso. Uno de los polímeros plásticos más usados es el poliestireno (PS), ya que este se usa en una amplia gama de aplicaciones gracias a su bajo costo y fácil producción. Sin embargo, pasado el tiempo de vida útil de este plástico, es considerado como desecho. El PS al estar expuesto a condiciones atmosféricas como la radiación UV, se fragmenta dando como resultado la creación de microplásticos (MP), mismos que son pequeñas partículas que no sobrepasan los 5 mm, lo que representa una amenaza al medio ambiente pues, al degradarse, las propiedades decaen, se genera un cambio dimensional y, además, pueden ser fácilmente transportadas no solo al medio ambiente, sino también a los organismos. Este artículo de revisión se enfoca en evidenciar las principales rutas que siguen los MP al interaccionar con los seres humanos y los efectos potenciales de los PS-MP en el citoesqueleto, así como en resaltar la necesidad de más estudios al respecto.

Abstract Plastic has become very popular in recent years due to its durability and properties. Despite its many advantages, humanity has developed a certain dependence on this material, which represents an increase in its use and in turn, in waste. One of the most widely used plastic polymers is the polystyrene (PS), as is used in a wide range of applications due to its low cost and easy production, although after the useful life of the plastic, it is considered as waste. When plastic is exposure to atmospheric conditions such as UV radiation, it degrades and fragments giving rise to microplastics (MPs), which are defined as small particles that do not exceed 5 mm, representing a threat to the environment because when they degrade the properties decay, a dimensional change is generated and they can also be easily transported not only to the environment but also to organisms. This review article focuses on highlighting the main pathways that MPs follow when interacting with humans and the potential effects of PS-MPs on the cytoskeleton, as well as highlighting the need for more studies in this regard.

Número de células CD34+ circulantes como predictor de recolección exitosa de progenitores hematopoyéticos por aféresis en trasplante autólogo / Number of circulating CD34+ cells as a predictor of successful collection of hematopoietic progenitors by apheresis in autologous transplantation

RESUMEN Introducción. El trasplante autólogo de células progenitoras hematopoyéticas es una terapia eficaz en neoplasias malignas hematológicas. El número de células que CD34+ en sangre periférica es el mejor predictor del rendimiento de recolección de células progenitoras hematopoyéticas. Objetivo. Determinar el número de células CD34+ en sangre periférica asociado al éxito de recolección de progenitores hematopoyéticos por aféresis en trasplante autólogo. Métodos. Se evaluó retrospectivamente los datos de 236 procedimientos de aféresis de células progenitoras hematopoyéticas para el trasplante autólogo en el Hospital Edgardo Rebagliati Martins (Lima, Perú) de julio del 2020 a julio del 2023. Se utilizó la curva ROC (características operativas del receptor) para determinar el número de células CD34+ en sangre periférica necesario para lograr una recolección por aféresis ≥ 2 x 106 células CD34+/kg. Resultados. El 61% fueron hombres, con mediana de edad de 58 años, el valor de corte fue de 18,38 células CD34+/μL (sensibilidad de 94,1% y especificidad de 96,9%). Conclusión. El número de células CD34+ sangre periférica para una recolección exitosa de células progenitoras hematopoyéticas para el trasplante autólogo fue de 18,38 células CD34+/μL.

ABSTRACT Introduction. Autologous hematopoietic progenitor cell transplantation is an effective therapy in hematological malignancies, the number of CD34+ cells in peripheral blood is the best predictor of hematopoietic progenitor cell harvesting performance. Objective. To determine the number of CD34+ cells in peripheral blood associated with the successful collection of hematopoietic progenitors by apheresis in autologous transplantation. Methods. The data of 236 hematopoietic progenitor cell apheresis procedures for autologous transplantation at the Edgardo Rebagliati Martins Hospital (Lima, Peru) were retrospectively evaluated from July 2020 to July 2023. The ROC (receiver operating characteristics) curve was used to determine the number of CD34+ cells in peripheral blood necessary to achieve an collection by apheresis ≥ 2 x 106 CD34+ cells/kg. Results. 61% were men, with a median age of 58 years, the cut-off value was 18.38 CD34+ cells/μL (sensitivity of 94.1% and specificity of 96.9%). Conclusion. The number of peripheral blood CD34+cells for successful collection of hematopoietic progenitor cells for autologous transplantation was 18.38 CD34+ cells/μL.

Cell detachment rates and confluence of fibroblast and osteoblast cell culture using different washing solutions / Taxas de desprendimento celular e confluência de cultura celular de fibroblastos e osteoblastos a partir de diferentes soluções de lavagem

The advancements in the cell culture studies have led to the development of regenerative medicine concept. The aim of this study is to compare the effectiveness of some washing solutions, including phosphate buffered saline (PBS), sodium chloride (NaCl), and ringer's lactate (RL) on the rate of detachment and confluency in fibroblast and osteoblast cell culture. Baby Hamster Kidney 21 clone 13 (BHK21/C13) fibroblast cells and 7F2 osteoblast were cultured on T25 flasks for 3-4 days. Three treatment groups were classified on the basis of different washing solutions used in the moment before trypsinization: PBS, 0.9% NaCl, and RL. Each group was measured for the detachment rate and cell confluence. The measurement was done in 2 passage numbers. The use of PBS, NaCl, and RL washing solution showed that detachment time was less than 5 minutes for the fibroblasts and 3 minutes for the osteoblasts. There was a significant difference in the rate of fibroblast cell detachment (p=0.006) and osteoblast (p=0.016). The capability of fibroblasts and osteoblasts to achieve a confluence of 106 cells/well on the first and second measurements was almost the same between the washing solution groups. The use of physiological 0.9% NaCl solution as a washing solution in fibroblast and osteoblast cell culture has almost the same effectiveness as PBS to help accelerate cell detachment in less than 5 minutes without influencing the capability of cells to proliferate.

Os avanços nos estudos de cultura de células levaram ao desenvolvimento do conceito de medicina regenerativa. O objetivo deste estudo é comparar a eficácia de algumas soluções de lavagem, incluindo solução salina tamponada com fosfato (PBS), cloreto de sódio (NaCl) e lactato de ringer (RL) na taxa de desprendimento e confluência em cultura de células de fibroblastos e osteoblastos. Células de fibroblastos Baby Hamster Kidney 21 clone 13 (BHK21/C13) e osteoblastos 7F2 foram cultivadas em frascos T25 por 3-4 dias. Três grupos de tratamento foram classificados com base nas diferentes soluções de lavagem utilizadas no momento anterior à tripsinização: PBS, NaCl 0,9% e RL. Cada grupo foi medido para a taxa de desprendimento e confluência celular. A medição foi feita em 2 números de passagem. O uso de solução de lavagem PBS, NaCl e RL mostrou que o tempo de descolamento foi inferior a 5 minutos para os fibroblastos e 3 minutos para os osteoblastos. Houve uma diferença significativa na taxa de desprendimento de células fibroblásticas (p=0.006) e osteoblasto (p=0.016). A capacidade de fibroblastos e osteoblastos de atingir uma confluência de 106 células/well na primeira e segunda medições foi quase a mesma entre os grupos de solução de lavagem. O uso de solução fisiológica de NaCl (0.9%) como solução de lavagem em cultura de células de fibroblastos e osteoblastos tem quase a mesma eficácia que o PBS para ajudar a acelerar o desprendimento celular em menos de 5 minutos sem influenciar a capacidade das células de proliferar.

Gentiopicroside injection promotes the healing of pressure injury wounds by upregulating the expression of bFGFR1 / A injeção de gentiopicrosídeo promove a cicatrização de feridas de lesão por pressão pela suprarregulação da expressão de bFGFR1 / La inyección de gentiopicrósido promueve la cicatrización de heridas de lesión por presión al aumentar la expresión de bFGFR1

ABSTRACT Objective: To observe the therapeutic effect of gentiopicroside, as the main component of Gentianaceae, on wounds in pressure injury (PI) model rats and explore its mechanism. Method: Male Sprague Dawley rats were randomly divided into control group, model group and gentiopicroside groups (50, 100 and 200 mg·kg-1·d-1 for 9 consecutive days). The mice's skeletal muscle fibroblast line NOR-10 cells were collected after being treated with gentiopicroside (0.2~5.0 M) and basic fibroblast growth factor receptor 1 (bFGFR1) inhibitor (5.0 M SU5402) for 7 days. Results: Compared to the model group, the gentiopicroside groups showed significantly increased wound healing rates, reduced inflammatory cells in the wound tissues, and significantly increased expression levels of proliferating cell nuclear antigen (PCNA) and bFGFR1, accompanied by increased proliferation of new myofibroblasts. Gentiopicroside upregulated the mRNA expression of bFGFR1 and PCNA in NOR-10 cells in a dose-dependent manner; however, SU5402 reversed the effect of gentiopicroside. Conclusion: Gentiopicroside may promote myofibroblast proliferation by upregulating the expression of bFGFR1 and PCNA and ultimately accelerating the healing of PI wounds.

RESUMO Objetivo: Observar o efeito terapêutico do gentiopicrosídeo como principal componente das Gentianáceas em feridas de lesão por pressão (LP) em modelos de ratos e explorar seu mecanismo. Métodos: Ratos Sprague Dawley machos foram divididos aleatoriamente em grupo controle, grupo modelo e grupos gentiopicrosídeo (50, 100 e 200 mg·kg-1·d-1 por 9 dias consecutivos). As células NOR-10 da linha de fibroblastos do músculo esquelético de camundongos foram coletadas após serem tratadas com gentiopicrosídeo (0,2~5,0 μM) e inibidor do receptor 1 do fator de crescimento fibroblástico básico (bFGFR1) (5.0 μM SU5402) por 7 dias. Resultados: Em comparação com o grupo modelo, os grupos gentiopicrosídeo apresentaram taxas de cicatrização de feridas significativamente maiores, menos células inflamatórias nos tecidos da ferida e níveis de expressão de antígeno nuclear de proliferação celular (PCNA) e bFGFR1 significativamente maiores, acompanhados por aumento da proliferação de novos miofibroblastos. O gentiopicrosídeo regulou positivamente a expressão de mRNA de bFGFR1 e PCNA em células NOR-10 de maneira dependente da dose, enquanto o SU5402 reverteu o efeito do gentiopicrosídeo. Conclusão: O gentiopicrosídeo pode promover a proliferação de miofibroblastos, suprarregulando a expressão de bFGFR1 e PCNA e, em última análise, acelerando a cicatrização de feridas de LP.

RESUMEN Objetivo: Observar el efecto terapéutico del gentiopicrósido como componente principal de la Gentianaceae en heridas por lesión por presión (LP) en modelos de ratas y explorar su mecanismo. Método: Se dividieron aleatoriamente ratas macho Sprague Dawley en grupo control, grupo modelo y grupos gentiopicrósido (50, 100 y 200 mg·kg-1·d-1 durante 9 días consecutivos). Se recogieron células NOR-10 de la línea de fibroblastos de músculo esquelético de ratón después de ser tratadas con gentiopicrósido (0.2~5.0 μM) y un inhibidor del receptor 1 del factor de crecimiento de fibroblastos básico (bFGFR1) (5.0 μM SU5402) durante 7 días. Resultados: En comparación con el grupo modelo, los grupos de gentiopicrósido mostraron tasas de curación de heridas significativamente más altas, menos células inflamatorias en los tejidos de la herida y niveles de expresión significativamente mayores del antígeno nuclear de proliferación celular (PCNA) y bFGFR1, acompañados de una mayor proliferación de nuevos miofibroblastos. El gentiopicrósido podría regular positivamente la expresión de ARNm de bFGFR1 y PCNA en células NOR-10 de manera dependiente de la dosis, sin embargo, SU5402 revirtió el efecto del gentiopicrósido. Conclusión: El gentiopicrósido puede promover la proliferación de miofibroblastos al aumentar la expresión de bFGFR1 y PCNA y, en última instancia, acelerar la cicatrización de las heridas de LP.

Carcinomatosis peritoneal en cáncer de pulmón: revisión de la literatura con reporte de caso / Peritoneal Carcinomatosis in Lung Cancer: Literature Review with a Case Report

En Colombia, para 2020, el cáncer de pulmón se reportó como la segunda neoplasia con mayor incidencia y la primera con mayor tasa de mortalidad según las cifras del minis-terio de salud de Colombia. El compromiso peritoneal en el cáncer de pulmón es algo extremadamente raro, se considera <1%. A continuación, exponemos un caso de car-cinomatosis peritoneal en cáncer de pulmón en un hospital en la ciudad de Bogotá. Se incorpora una posterior revisión descriptiva de la literatura de los casos clínicos de car-cinomatosis peritoneal en cáncer de pulmón reportados en la literatura mundial en los últimos 20 años, con el objetivo de resumir las principales características de estos pa-cientes que permiten plantear hipótesis de su enfoque terapéutico y pronóstico

In Colombia for 2020, lung cancer was reported as the fifth neoplasm with the highest incidence and the second with the highest mortality rate. Peritoneal involvement in lung cancer is extremely rare, it is considered <1%. Next, we present a case of peritoneal car-cinomatosis in lung cancer in Bogotá, with a subsequent literature review of the litera-ture of clinical cases of peritoneal carcinomatosis in lung cancer reported in the world li-terature in the last 20 years. The aim is to summarize the main characteristics of these patients that allow to hypothesize their prognostic and therapeutic approach

Desarrollo y validación de un método de suspensión basado en células Vero para la detección del virus Zika / Development and validation of a vero cell-based suspension method for the detection of Zika virus

Objetivo . Desarrollar y validar un método de suspensión celular utilizando células Vero 76 para el cultivo del virus Zika (ZIKV) basado en la infección de células recién sembradas no adheridas. Material y métodos . Se utilizaron tres multiplicidades de infección diferentes del ZIKV para desarrollar y comparar este novedoso método con el método estándar de monocapa de células confluentes. Además, validamos preliminarmente el método de suspensión utilizando muestras clínicas caracterizadas como positivas o negativas para el ZIKV. El método estándar de monocapa se utilizó como método de referencia, y el aislamiento viral se confirmó mediante un RT-PCR específico del ZIKV. Se estimó la sensibilidad e intervalos de confianza del 95% para el método de suspensión. Asimismo, se realizó una comparación técnica del método de suspensión contra el método de monocapa. Resultados . Nuestros hallazgos sugieren que tanto la carga viral como la replicación del ZIKV fueron comparables entre los métodos de infección en monocapa y en suspensión. Aunque ambos métodos fueron adecuados para cultivar y aislar el ZIKV, el método de suspensión se caracterizó por ser más fácil, barato y rápido, así como una técnica de aislamiento sensible. En comparación con el método de monocapa, el método de suspensión fue cuatro veces más sensible en la detección del ZIKV en casos inconclusos por RT-PCR. Conclusiones . El método de suspensión tiene el potencial de ser un método eficaz para cultivar y aislar el ZIKV y su uso es potencialmente útil tanto en la investigación como en entornos clínicos.

Objective. To develop and validate a cell suspension method using Vero 76 cells for culturing Zika virus (ZIKV) based on infection of detached freshly seeded cells. Material and methods. Three different multiplicities of infection of ZIKV were used to develop and compare this novel method to the standard confluent cell monolayer method. In addition, we preliminary validated the cell suspension method using well-characterized ZIKV positive and negative clinical samples. The standard confluent cell monolayer method was used as the reference method, and viral isolation was confirmed by a ZIKV-specific RT-PCR. The sensitivity and its 95% confidence intervals for the cell suspension method were estimated. Also, a technical comparison of the cell suspension method against the cell monolayer method was performed. Results. Our findings suggested that both the viral load and replication of ZIKV were comparable between both monolayer- and suspension-infection methods. Although both methods were suitable for culturing and isolating ZIKV, the cell suspension method was easier, cheaper, and quicker as well as a sensitive isolation technique. The cell suspension method was significantly more sensitive in detecting Zika in inconclusive cases by RT-PCR, with a fourfold increase compared to the confluent cell monolayer method. Conclusion. The cell suspension method has the potential to be an effective method for cultivating and isolating ZIKV and its application is potentially useful in both research and clinical settings.

Flow cytometry-detected changes in megaloblastic anemia secondary to cobalamin deficiency

Introduction: Megaloblastic anemias secondary to Vitamin B12 deficiency are a group of pathologies produced by defective nuclear DNA synthesis. Objective: To describe the maturation alterations found in hematopoietic precursors of the bone marrow in a series of patients with megaloblastic anemia. Methods: Were included patients attended at the Regional Hospital of Concepción with bone marrow samples sent for the study of cytopenia by flow cytometry whose final diagnosis was megaloblastic anemia. The immunophenotype was performed with CD45, CD34, CD117, HLA-DR, markers of neutrophil (CD13, CD11b, CD10, CD16) and/or erythroblast (CD105, CD71, CD36) maturation. Results: From the flow cytometry laboratory database, 8 patients with megaloblastic anemia were identified, and myelodysplastic syndromes (n=9) and normal or reactive bone marrow (n=10) were used as controls. 44% were men, with a median age of 58 years. Megaloblastic anemia was associated with a higher proportion of size and complexity of erythroid and myeloid progenitors compared to lymphocytes compared to controls. The total percentage of erythroblasts and the proportion of CD34+ myeloid cells associated with erythroid lineage was higher in megaloblastic anemia, associated with a maturation arrest in the CD105+ precursor stage (69% vs 19% and 23%, p<0.001). The heterogeneity of CD36 and CD71 in megaloblastic anemia was similar to myelodysplastic syndromes. Conclusions: Megaloblastic anemia produces a heterogeneous involvement of hematopoiesis, characterized by a greater size and cellular complexity of precursors of the neutrophil and erythroid series and a maturation arrest of the erythroblasts.

Introducción: Anemias megaloblásticas secundarias a la deficiencia de vitamina B12 son patologías producidas por una síntesis defectuosa del ADN nuclear. Objetivo: Describir las alteraciones madurativas encontradas en precursores hematopoyéticos de la médula ósea de una serie de pacientes con anemia megaloblástica. Métodos: Se incluyeron pacientes atendidos en el Hospital Regional de Concepción con muestras de médula ósea enviadas para estudio de citopenias por citometría de flujo cuyo diagnóstico fue anemia megaloblástica. El inmunofenotipo se realizó con CD45, CD34, CD117, HLA-DR, marcadores de maduración de serie de neutrófilo (CD13, CD11b, CD10, CD16) y/o eritroblasto (CD105, CD71, CD36). Resultados: Se identificaron 8 pacientes con anemia megaloblástica y como controles se utilizaron síndromes mielodisplásicos (n=9) y médula ósea normal o reactiva (n=10). El 44% eran hombres, con una mediana de edad de 58 años. La anemia megaloblástica se asoció con una mayor proporción de tamaño y complejidad de progenitores eritroides y mieloides con respecto de los linfocitos en comparación a los controles. El porcentaje total de eritroblastos y la proporción de células mieloides CD34+ comprometidas con el linaje eritroide fue mayor en anemia megaloblástica, asociado a una parada madurativa en la etapa de precursor CD105+ (69% vs 19% y 23%, p <0.001). La heterogeneidad de CD36 y CD71 en anemia megaloblástica fue similar a los síndromes mielodisplásicos. Conclusiones: la anemia megaloblástica produce una afectación heterogénea de la hematopoyesis, caracterizada por un mayor tamaño y complejidad celulares de precursores de la serie neutrófilo y eritroide y una detención madurativa de los eritroblastos.

Análise do perfil de liberação do princípio ativo peróxido de hidrogênio por diferentes géis clareadores dentais / Analysis of the release profile of the active ingredient hydrogen peroxide by different tooth whitening gels

O objetivo desse estudo foi analisar o perfil de liberação do princípio ativo peróxido de hidrogênio por diferentes géis clareadores no decorrer do período de aplicação. Para tal diferentes géis clareadores à base de peróxido de hidrogênio para uso na técnica em consultório foram levados à câmara doadora de uma célula de difusão vertical (célula Franz). Foi empregado como meio de difusão uma membrana de éster de celulose com porosidade de 100-500 Daltons. A câmara receptora foi preenchida com água ultrapura. Os seguintes géis foram testados: Whiteness HP (FGM), Whiteness HP Blue (FGM), Whiteness HP Automix (FGM), Potenza Bianco (PHS do Brasil), Opalescence Boost (Ultradent), e Pola Office Plus (SDI); solução de peróxido 35% controle. O peróxido de hidrogênio liberado pelo gel se difundiu através da membrana e se misturou com a água na câmara receptora. Uma amostra de 40µl foi coletada da câmara receptora a cada 5 min, durante 45 minutos e foi reposto o mesmo volume de 40 µl em água ultrapura. A concentração de peróxido na amostra (mg/ml) foi determinada em triplicata a cada momento, utilizando um espectrofotômetro leitor de microplacas e reagente enzimático. A normalidade e homoscedasticidade dos dados foram avaliadas pelos testes de Shapiro-Wilk e Levene. Os dados de quantidade acumulada de peróxido foram submetidos ao teste de análise de variância ANOVA a 2 fatores (tipo de gel x tempo) e teste de Tukey. Para todas as análises foi adotado um nível de significância de 5%. Diferenças significativas foram observadas para os fatores agente clareador (p=0,0001) e tempo (p=0,0001), assim como para a interação entre eles (p=0,0001). Os resultados do teste de Tukey para o fator agente clareador quanto à quantidade cumulativa de peróxido foram: WHPB-14,04(6,60)a, WHP19,51(8,61)b, WHPA-23,20(10,48)c, POP-26,53(11,13)d, PB-28,29(10,99)de, OPB31,03(11,81)e, Controle 79,12(32,27)f. Para o fator tempo, em minutos, os resultados foram: 5 9,64(6,70)a, 10-17,42(11,60)b, 15-24,03(16,86)c, 20-29,50(20,44)d, 25-33,93(23,00)e, 30-38,41(25,83)f, 35-41,52(27,32)fg, 40-44,11(28,47)gh, 45- 46,50(29,72)h. Os resultados do teste ANOVA de medidas repetidas mostraram diferenças significativas (p=0,00) em relação a concentração inicial e final de peróxido para os fatores agente clareador, momento de leitura e para a interação entre eles. Agentes clareadores com maior concentração inicial de peróxido de hidrogênio apresentaram maior liberação cumulativa do ingrediente ativo; a liberação de peróxido de hidrogênio de diferentes géis clareadores ocorre de maneira gradual em relação ao tempo de aplicação, porém essa liberação não ocorre de maneira constante.(AU)

The aim of this study was to analyze the release profile of the active ingredient hydrogen peroxide by different bleaching gels over the course of the application period. For this purpose, different bleaching gels based on hydrogen peroxide for use in the in-office technique were taken to the donor chamber of a vertical diffusion cell (Franz cell). A cellulose ester membrane with a porosity of 100-500 Daltons was used as diffusion medium. The receiving chamber was filled with ultrapure water. The following gels were tested: Whiteness HP (FGM), Whiteness HP Blue (FGM), Whiteness HP Automix (FGM), Potenza Bianco (PHS do Brasil), Opalescence Boost (Ultradent), and Pola Office Plus (SDI); 35% peroxide control solution. The hydrogen peroxide released by the gel diffused through the membrane and mixed with the water in the receiving chamber. A 40µl sample was collected from the receiving chamber every 5 min for 45 minutes and the same volume of 40 µl was replaced in ultrapure water. The peroxide concentration in the sample (mg/ml) was determined in triplicate at each time point, using a microplate reader spectrophotometer and enzymatic reagent. Data normality and homoscedasticity were evaluated using the Shapiro-Wilk and Levene tests. Accumulated amount of peroxide data was submitted to 2-way ANOVA test of variance (type of gel x time) and Tukey's test. For all analyses, a significance level of 5% was adopted. Significant differences were observed for the factors bleaching agent (p=0.0001) and time (p=0.0001), as well as for the interaction between them (p=0.0001). The results of the Tukey test for the bleaching agent factor regarding the cumulative amount of peroxide were: WHPB-14.04(6.60)a, WHP-19.51(8.61)b, WHPA-23.20(10 ,48)c, POP-26.53(11.13)d, PB 28.29(10.99)de, OPB-31.03(11.81)e, Control-79.12(32.27) )f. For the time factor, in minutes, the results were: 5-9.64(6.70)a, 10-17.42(11.60)b, 15-24.03(16.86)c, 20- 29.50(20.44)d, 25-33.93(23.00)e, 30- 38.41(25.83)f, 35-41.52(27.32)fg, 40-44, 11(28.47)gh, 45-46.50(29.72)h. The results of the repeated measures ANOVA test showed significant differences (p=0.00) in relation to the initial and final peroxide concentration for the factors bleaching agent, reading time and the interaction between them. Bleaching agents with a higher initial concentration of hydrogen peroxide showed a greater cumulative release of the active ingredient; The release of hydrogen peroxide from different whitening gels occurs gradually in relation to the application time, but this release does not occur constantly. (AU)

Avaliação dos efeitos modulatórios da hematopoese no envelhecimento: Papel das células tronco mesenquimais medulares / Evaluation of the modulatory effects of hematopoiesis during aging: Role of bone marrow mesenchymal stem cells

O envelhecimento é um processo fisiológico que traz consigo uma série de alterações no organismo que se estendem até o nível molecular. Diante disto, este é um processo complexo que afeta diversos tecidos, sendo um deles o hematopoético, local onde, através de interações da Célula Tronco Hematopoética (CTH) com o ambiente ao seu redor, incluindo a Célula Tronco Mesenquimal (CTM), ocorre a hematopoese. Embora já sejam descritas na literatura algumas alterações na medula óssea consequentes do envelhecimento, os mecanismos por trás de tais mudanças permanecem elusivas, principalmente no âmbito das interações celulares ocorrentes na medula óssea. Portanto, este trabalho buscou investigar como o envelhecimento afeta a regulação hematopoética no contexto de sua relação com as CTM medulares. Para esta pesquisa, foram utilizados camundongos machos isogênicos da linhagem C57BL/6, dividindoos em grupos conforme sua idade: jovens (3 ­ 5 meses) e idosos (18 ­ 19 meses). Foi realizada a caracterização do modelo através de aspectos físicos como consumo proteico, variação de peso, entre outros, seguido de avaliação bioquímica e hematológica. Adicionalmente, foram coletadas células medulares e, posteriormente, realizado o isolamento das CTMs. Para estudar a relação destas células com a hematopoese, foram realizados ensaios in vitro utilizando a linhagem celular leucêmica C1498 (TIB-49™, ATCC®) mantidas em contato com o sobrenadante das CTMs isoladas. Quanto aos parâmetros bioquímicos, os animais idosos apresentaram menores níveis de albumina, aspartato alanina transferase (ALT) e de triglicerídeos quando comparados aos animais jovens. Contrariamente, os animais idosos apresentaram um maior nível de colesterol. Na avaliação hematológica, foi constatado pelo hemograma que os animais idosos apresentaram valores comparáveis aos animais jovens, todavia, o mielograma mostrou menor celularidade geral, seguido de menor número de células da linhagem eritroide e maior número de precursores granulocíticos. Através da imunofenotipagem, foi revelado um maior número de CTHs e de precursores grânulosmonocíticos na medula de animais idosos quando comparado aos jovens, e uma menor frequência de progenitores linfoides. Na imunofenotipagem de sangue periférico de animais idosos houve uma redução no número de linfócitos B e de eritrócitos, e aumento na população de células natural killers. Na imunofenotipagem de CTMs, o marcador CD73 apresentou menor expressão nos animais idosos. Avaliando o secretoma destas células estromais, foram encontrados no sobrenadante de CTMs de animais idosos aumentos significativos nas concentrações de CXCL12 e SCF e redução de IL-11. No âmbito molecular, as CTMs de animais idosos apresentaram aumento na expressão de Akt1, Nos e Ppar-γ, e redução na expressão de Csf3 e Cdh2. Adicionalmente, quando comparado a ação das CTMs de animais idosos em relação as CTMs de animais jovens, observou-se que CTMs de animais idosos foram capazes de aumentar a expressão de Sox2, Pou5f1 e Nanog e diminuir a expressão de Cdkn1a de células da linhagem C1498. O sobrenadante de CTMs de animais idosos também resultou na maior proliferação e migração de células da linhagem C1498. Portanto, levando em consideração a importância das CTMs sobre a regulação do sistema hematopoético, pode-se concluir que, no envelhecimento, as CTMs criam um ambiente propício para a proliferação celular no qual a manutenção da pluripotência é estimulada, o que pode acarretar em uma desregulação do sítio hematopoético quando habitado por células malignas

Aging is a physiological process in which occurs a series of alterations in an organism that extend to a molecular level. It is a complex process that affects various tissues, one of them being the bone marrow, wherethrough the interactions of the hematopoietic stem cell (CTH) with its surrounding environment, including with the mesenchymal stem cell (CTM), hematopoiesis takes place. Although some aging-associated alterations in the bone marrow can be found described in the literature, the mechanisms behind said changes remain elusive, especially when regarding the cellular interactions present inside the bone marrow. Therefore, this research aimed to investigate how aging affects the regulation of hematopoiesis in the context of its interactions with bone marrow-derived CTMs. For this investigation, male isogenic C57BL/6 mice were used as animal models. These were separated in two groups according to their age: young (3 ­ 5 months) and aged (18 ­ 19 months). The animal models were characterized by their physical properties such as protein intake and weight variation, followed by biochemical and hematological evaluation. Bone marrow cells were obtained and identified through immunophenotyping, thus isolating different cell populations, including the CTMs. To study the relationship between these cells and hematopoiesis, in vitro assays were conducted utilizing the leukemic cell lineage C1498 (TIB-49™, ATCC®) maintained in contact with the supernatant of isolated CTMs. By their biochemical profile, aged mice showed lower levels of albumin, alanine-aspartate transferase (ALT) and triglycerides compared to the young group. In contrast, aged mice had a higher cholesterol level. Hematological evaluation by total blood count showed similar results between the two groups, however, the myelogram revealed that the aged animals had lower cellularity, with less frequent cells from the erythroid lineage, with an increase in granulocytic precursors. Through immunophenotyping, it was also revealed that aged mice have higher numbers of hematopoietic stem cells, while also being noted a reduced population of lymphoid progenitors. An increase in the granulomonocytic progenitors was also found. Immunophenotyping peripheral blood cells of aged mice revealed reduced numbers of B lymphocytes and erythrocytes, and an increased natural killer cell population. Additionally, the cell surface marker CD73 was found to be less expressed in aged mice CTMs. The secretome of these stromal cells obtained from aged mice showed higher levels of CXCL12 and SCF, and lower levels of IL-11when compared to the young counterparts. At a molecular level, CTMs obtained from aged mice expressed more Akt1, Nos and Ppar-γ, while the expression of Csf3 and Cdh2 was reduced. Additionally, when comparing the effects of aged mice CTMs with young mice CTMs, it was observed that the first expressed were capable of increasing the expression of Sox2, Pou5f1 and Nanog, while decreasing Cdkn1a expression in the C1498 cell lineage. The supernatant obtained from aged mice also favored the proliferation and cell migration of the C1498 cell line. Thus, considering the importance that CTMs have over the hematopoietic system, we can conclude that, in aging, CTMs create a special environment which favors cell proliferation and maintenance of pluripotency, which can result in a dysregulation of the hematopoietic tissue when malignant cells are present

Comparison of different sports training methods on muscle plasticity / Comparação de diferentes métodos de treinamento esportivo sobre a plasticidade muscular / Comparación de diferentes métodos de entrenamiento deportivo sobre la plasticidad muscular

ABSTRACT Introduction: Different loads and volumes in resistance training is the most effective way to muscle hypertrophy stimulation in rehabilitation. Adding different stability planes to balance training will increase the intensity of muscle activation, causing an enhanced exercise load. It is theorized that unstable stimuli in the support environment increased central excitability, improving the ability to mobilize muscle fiber contraction. However, the intensity of this relationship is not clarified. Objective: Investigate how to balance exercise training improves CORE muscle plasticity and the central nervous system. Methods: A total of 36 undergraduate and graduate students were recruited to participate in this experiment. Two movements with bridge exercise were selected for maximal muscle endurance testing. Electromyographic data of the CORE muscles were captured and compared at all execution phases. Results: There was no interaction between the stabilization plane and cognitive tasks. The main effects of the low bridge and high bridge movements on erector spinae muscle activation were 28.88 and 2.06. The main effects of cognitive tasks were 0.33 and 7.88, and the interaction effect was 0.89 0.31. Conclusion: Exercise training can increase capillaries in muscles, increase the cross-sectional area of myofibrils, change the proportion of different types of myofibrils, and increase muscle strength. Evidence Level II; Therapeutic Studies - Investigating the results.

RESUMO Introdução: O treinamento de resistência com diferentes cargas e volumes é a maneira mais eficaz de estimular a hipertrofia muscular na reabilitação. Adicionar diferentes planos de estabilidade ao treinamento equilíbrio aumentará o grau de ativação muscular, causando um aumento na carga de exercícios. Teoriza-se que estímulos instáveis no ambiente de suporte levam ao aumento da excitabilidade central, melhorando a capacidade de mobilizar a contração das fibras musculares. Porém, ainda não sabemos a intensidade dessa relação. Objetivo: Investigar como o treinamento de exercícios com equilíbrio melhora a plasticidade muscular do CORE e o sistema nervoso central. Métodos: Um total de 36 graduandos e pós-graduandos foram recrutados para participar deste experimento. Dois movimentos com exercício ponte foram selecionados para o teste de máxima resistência muscular. Os dados eletromiográficos da musculatura do CORE foram capturados e comparados em todas as fases de execução. Resultados: Não houve interação entre o plano de estabilização e as tarefas cognitivas. Os principais efeitos dos movimentos de ponte baixa e ponte alta na ativação do músculo eretor da espinha foram 28,88 e 2,06, os principais efeitos das tarefas cognitivas foram 0,33 e 7,88, e o efeito de interação foi 0,89 e 0,31. Conclusão: O treinamento de exercícios pode aumentar os capilares nos músculos, aumentar a área transversal das miofibrilas, alterar a proporção de diferentes tipos de miofibrilas e aumentar a força muscular. Nível de evidência II; Estudos Terapêuticos - Investigação de Resultados.

RESUMEN Introducción: El entrenamiento de resistencia con diferentes cargas y volúmenes es la forma más eficaz de estimular la hipertrofia muscular en la rehabilitación. Añadir diferentes planos de estabilidad al entrenamiento de equilibrio aumentará el grado de activación muscular, provocando un aumento de la carga del ejercicio. Se teoriza que los estímulos inestables en el entorno de apoyo conducen a un aumento de la excitabilidad central, mejorando la capacidad de movilizar la contracción de las fibras musculares. Sin embargo, aún no conocemos la intensidad de esta relación. Objetivo: Investigar cómo el entrenamiento de ejercicios de equilibrio mejora la plasticidad muscular del CORE y del sistema nervioso central. Métodos: Se reclutó a un total de 36 estudiantes de grado y posgrado para participar en este experimento. Se seleccionaron dos movimientos con ejercicio de puente para la prueba de resistencia muscular máxima. Se capturaron los datos electromiográficos de los músculos del CORE y se compararon en todas las fases de la ejecución. Resultados: No hubo interacción entre el plano de estabilización y las tareas cognitivas. Los efectos principales de los movimientos de puente bajo y puente alto sobre la activación de los músculos erectores de la columna vertebral fueron de 28,88 y 2,06, los efectos principales de las tareas cognitivas fueron de 0,33 y 7,88, y el efecto de interacción fue de 0,89 y 0,31. Conclusión: El entrenamiento con ejercicios puede aumentar los capilares en los músculos, incrementar el área transversal de las miofibrillas, cambiar la proporción de los diferentes tipos de miofibrillas y aumentar la fuerza muscular. Nivel de evidencia II; Estudios terapéuticos - Investigación de resultados.

Guías Argentinas de Vasculitis Suplemento. Tablas arteritis de células gigantes / Argentine Vasculitis Guidelines Supplement. Giant cell arteritis tables

La arteritis de células gigantes (ACG) es una vasculitis sistémica que afecta a personas adultas; compromete vasos arteriales de mediano y gran calibre, con potenciales complicaciones de gravedad, como la ceguera, y es considerada una emergencia médica. El objetivo de estas guías fue desarrollar las primeras recomendaciones argentinas para su tratamiento, basadas en la revisión de la literatura mediante metodología GRADE. Un panel de expertos en vasculitis elaboró las preguntas en formato PICO (población, intervención, comparador y outcomes), y luego un panel de expertos en metodología efectuó la revisión de la bibliografía con la extracción de la evidencia para cada una de las preguntas. Se realizó un focus group de pacientes para conocer sus preferencias y experiencias. Finalmente, con la información recabada, el panel de expertos en vasculitis procedió a la votación de las recomendaciones que a continuación se presentan.

Dynamic changes in and time sequence of ultraviolet B-induced apoptosis in rat corneal epithelial cells / Alterações dinâmicas na sequência temporal da apoptose induzida por radiação ultravioleta B em células epiteliais da córnea de ratos

ABSTRACT Purpose: To systematically examine the dynamic changes and time sequence in corneal epithelial cell apoptosis after excessive ultraviolet B irradiation. Methods: Ultraviolet B (144 mJ/cm2) was used to irradiate rat corneal epithelial cells for 2 h. Cell morphology was observed on differential interference contrast microscopy, and the numbers of the different kinds of apoptotic cells were counted using the ImageJ software. Cell viability was measured with the 3-(4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5- diphenyl-2-H-tetrazolium bromide method. Cell apoptotic rate and loss of mitochondrial membrane potential were detected using flow cytometric analyses. The expression levels of 3 apoptotic genes were measured with real-time quantitative polymerase chain reaction at different time points within 0-24 h after irradiation. Results: After 144-mJ/cm2 ultraviolet B irradiation for 2 h, the expression levels of caspase-8 and Bax were highest at 0 h; furthermore, the mitochondrial membrane potential decreased at 0 h and remained constant for 6 h in a subsequent culture. At 6 h, caspase-3 was activated. The decrease in cell viability and increase in apoptotic rate peaked at 6 h. The caspase-3 expression level decreased within 12-24 h, which led to a decline in apoptotic rate and change in apoptotic stage. Conclusions: The corneal epithelial cells exhibited rapid apoptosis after ultraviolet B irradiation, which was associated with both extrinsic and intrinsic pathways.

RESUMO Objetivos: Explorar sistematicamente as mudanças dinâmicas e a sequência temporal no processo de apoptose de células epiteliais corneanas após excesso de irradiação com ultravioleta B. Métodos: A radiação ultravioleta B (144 mJ/cm2) foi utilizada para irradiar células epiteliais da córnea de rato durante 2h. A morfologia celular foi observada por meio de microscópio de contraste de interferência diferencial, e os números de diferentes tipos de células apoptóticas foram contados e registrados pelo software ImageJ. A viabilidade celular foi medida pelo método brometo de 3- (4, 5-dimetil-2-tiazolil) -2, 5-difenil-2-H-tetrazólio. A taxa apoptótica celular e a perda do potencial da membrana mitocondrial foram detectadas por meio de análises citométricas de fluxo. Os níveis de expressão de três genes apoptóticos foram medidos por reação em cadeia da polimerase quantitativa em tempo real em diferentes momentos dentro de 0-24 h após a irradiação. Resultados: Após 144 mJ/cm2 de irradiação com ultravioleta B por 2h, os níveis de expressão de caspase-8 e Bax foram maiores em 0h; o potencial da membrana mitocondrial diminuiu a 0h e permaneceu constante por 6h na cultura subsequente. Às 6h, a caspase-3 foi ativada. A diminuição da viabilidade celular e o aumento da taxa apoptótica atingiu o pico em 6h. A expressão de caspase-3 diminuiu dentro de 12 - 24 h, levando a um declínio na taxa apoptótica e alteração no estágio apoptótico. Conclusões: As células epiteliais da córnea apresentaram uma apoptose rápida após excesso de irradiação com ultravioleta B, e esse processo foi associado tanto à via extrínseca como à via intrínseca.

Cellular theory in the botanical courses of Francisco Bayon in the Universidad Nacional De Colombia (1868-1875) / Teoría celular en los cursos de botánica de francisco bayón en la universidad nacional de colombia (1868-1875)

RESUMEN La fundación de la Universidad Nacional de los Estados Unidos de Colombia en 1867 ocurre casi una década después de la publicación del origen de las especies de Darwin (1859) y de la publicación de Die Cellular pathologie de Virchow (1859), textos representativos de las dos teorías básicas que sustentan la biología moderna: la teoría de evolución por selección natural y la teoría celular. Analizando las fuentes históricas primarias y secundarias determinamos que en la Escuela de Ciencias Naturales se enseñó entre 1868 y 1875 la teoría celular. El curso de botánica de Francisco Bayón (1868) explicó esta teoría, incluyendo las propuestas de Schleiden, Mirbel, Möhl y Unger; así como los procesos de polinización y fecundación de las plantas. La desactualización en algunos aspectos se explica porque las fuentes principales de Bayón son textos editados en España y Francia y por la ausencia de traducciones de los trabajos pioneros que surgían en Alemania. La Escuela de Ciencias Naturales dio un paso desde la historia natural hasta la biología moderna al incluir en sus cursos la teoría celular.

ABSTRACT The foundation of the Universidad Nacional de los Estados Unidos de Colombia in 1867 took place almost a decade after the publication of Darwin's Origin of Species (1859) and Virchow's Die Cellularpathologie (1859). The first of these works presents the theory of evolution by natural selection, the second the cell theory, both of which underpin modern biology. The analysis of primary and secondary historical sources led us to determine that cell theory was taught in the School of Natural Sciences between 1868 and 1875. The botany course of Francisco Bayón (1868) explained the cell theory, including the proposals of Schleiden, Mirbel, Mohl and Unger; as well as the processes of pollination and fertilization in plants. Some topics were outdated, mainly by the fact that Bayón's main sources were texts edited in Spain and France, and by the absence of translations of the pioneering works that emerged in Germany. The School of Natural Sciences took a step further from natural history to modern biology by including the cell theory in their courses.

Carcinoma de células de Merkel: múltiplas lesões cutâneas primárias no membro inferior / Merkel cell carcinoma: multiple primary skin lesions in the lower limb

Carcinoma de células de Merkel é um tumor neuroendócrino raro e agressivo de pele que usualmente apresenta-se como lesão única na região de cabeça ou pescoço. Relata-se um caso de topografia e apresentação atípicas, com presença de múltiplos e simultâneos tumores na perna esquerda de rápida evolução, associados à linfonodomegalia inguinal palpável, com diagnóstico confirmado por meio de histopatologia e imuno-histoquímica. Realizada exérese de linfonodo inguinal esquerdo e das lesões cutâneas com margem de segurança

Merkel cell carcinoma is a rare and aggressive neuroendocrine skin tumor usually presenting as a single lesion in the head or neck region. We report a case of atypical topography and presentation, with multiple and simultaneous tumors on the left leg of rapid progression associated with palpable inguinal lymphadenopathy and diagnostic confirmation by histopathology and immunohistochemistry. Exeresis of the left inguinal lymph node and skin lesions with a safety margin was performed

Triiodothyronine does not influence in vitro chondrogenic differentiation of adipose tissue-derived stem cells from young female rat / Triiodotironina não influencia na diferenciação condrogênica de células tronco do tecido adipose de ratas jovens

The objective of this study was to investigate the in vitro action of triiodothyronine (T3) on the chondrogenic differentiation of adipose tissue-derived stem cells (ASCs) of female rats, with different time periods and doses. ASCs were extracted from female Wistar rats and were cultured in chondrogenic medium with and without the presence of T3. Five groups were established: 1) ASCs without T3; and 2,3,4,5) ASCs with 0.01, 1, 100 and 1,000 nM T3, respectively). After 7, 14 and 21 days, cell morphology, chondrogenic matrix formation, and expression of Sox9, aggrecan, collagen II, and collagen X were evaluated. The Student-Newman-Keuls test was used. ASCs showed CD54, CD73, and CD90 before chondrogenic differentiation. The hormone treatment did not alter chondrogenic matrix formation, Sox9 expression at 14 or 21 days, or expression of collagen II or collagen X at any time. However, the 0.01, 1, and 1000 nM T3 doses decreased Sox9 expression at 7 days. In conclusion, chondrogenic differentiation of ASCs of female rats is not influenced by T3.

O objetivo do presente trabalho foi verificar o efeito in vitro da triiodotironina (T3) na diferenciação condrogênica de células tronco mesenquimais do tecido adiposo (CTM-TA) de ratas, durante vários períodos e em várias doses. CTM-TA foram coletadas de ratas Wistar e cultivadas em meio condrogênico com ou sem a presença de T3. Constitui-se cinco grupos: 1) CTM-TA sem T3; e 2,3,4,5) CTM-TA com T3 (0,01; 1; 100 e 1000 nM, respectivamente). Após sete, 14 e 21 dias, foram avaliados morfologia celular, formação de matriz condrogênica e expressão de Sox9, agrecano, colágeno II e colágeno X. Para as análises foi utilizado o teste de Student Newman Keuls. CTM-TA expressaram CD54, CD73 e CD90 antes da diferenciação condrogênica. O tratamento hormonal não alterou a formação de matriz condrogênica e a expressão de Sox9 aos 14 e 21 dias e expressão dos colágenos II e X em nenhum dos períodos avaliados. No entanto, as doses de 0,01; 1 e 1000 nM T3 diminuíram a expressão de Sox9 aos 7 dias. Conclui-se que a diferenciação condrogênica de CTM-TA de ratas não é influenciada pela T3.

Cytotoxicity of extracts and compounds isolated from Croton echioides in animal tumor cell (HTC) / Citotoxicidade de extratos e compostos isolados de Croton echioides em célula tumoral animal (HTC)

The search for compounds with anticancer effects is of paramount importance today due to the high incidence of the disease. The Euphorbiaceae family is known for having compounds with therapeutic properties, one of its genera being Croton. It has several species, which contain compounds already known for their biological activities, presenting anti-inflammatory, antimicrobial and anticancer properties. Thus, the cytotoxicity/antiproliferative activity of semi-purified fractions and compounds isolated from Croton echioides in liver tumor cells of Rattus norvegicus (HTC) was evaluated by the MTT test. The semi-purified fractions showed cytotoxicity at concentrations above 200 µg/mL, at 24, 48 and 72 hours, reaching cell viability of 24.78% [400 µg/mL] at 24 hours, 12.79% [500 µg/mL] at 48 hours and 10.57% [300 µg/mL] at 72 hours. For the isolated compounds, lupeol had a cytotoxic effect in all concentrations (1, 5, 10, 15, 20, 40, 60, 80 and 100 µg/mL) and tested times (24, 48 and 72 hours), reaching minimum viability of 4.37% [100 µg/mL], within 72 hours. The clerodan diterpenes CEH-1 and CEH-4 also showed antiproliferative activity, with minimum viability of 36.19% [100 µg/mL] over 72 hours and 21.33% [100 µg/mL] over 48 hours, respectively. However, the clerodan diterpenes CEH-2 and CEH-3 did not shows a cytotoxic effect for HTC cells. Thus, there is a cytotoxic/antiproliferative potential of C. echioides against tumor cells, with targeted to mitochondrial enzymes, associated with cell proliferation, indicating that this species deserves prominence in the search for new molecules for the treatment of cancer.

A busca por compostos com efeitos anticâncer é de suma importância nos dias atuais devido à alta incidência desta doença. A família Euphorbiaceae é conhecida por possuir compostos com propriedades terapêuticas, sendo um de seus gêneros o Croton. Este possui diversas espécies, que contêm compostos já conhecidos por suas atividades biológicas, apresentando propriedades anti-inflamatórias, antimicrobianas e anticancerígenas. Assim, a citotoxicidade/atividade antiproliferativa de frações semipurificadas e compostos isolados de Croton echioides em células tumorais hepáticas de Rattus norvegicus (HTC) foi avaliada pelo teste MTT. As frações semipurificadas apresentaram citotoxicidade em concentrações acima de 200 µg/mL, em 24, 48 e 72 horas, atingindo viabilidade celular de 24,78% [400 µg/mL] em 24 horas, 12,79% [500 µg/mL] em 48 horas e 10,57% [300 µg/mL] às 72 horas. Para os compostos isolados, o lupeol teve efeito citotóxico em todas as concentrações (1, 5, 10, 15, 20, 40, 60, 80 e 100 µg/mL) e tempos testados (24, 48 e 72 horas), atingindo a viabilidade mínima de 4,37% [100 µg/mL], em 72 horas. Os diterpenos clerodan CEH-1 e CEH-4 também apresentaram atividade antiproliferativa, com viabilidade mínima de 36,19% [100 µg/mL] em 72 horas e 21,33% [100 µg/mL] em 48 horas, respectivamente. No entanto, os diterpenos clerodanos CEH-2 e CEH-3 não apresentaram efeito citotóxico para células HTC. Assim, existe um potencial citotóxico/antiproliferativo de C. echioides contra células tumorais, com enzimas direcionadas a enzimas mitocondriais, associadas à proliferação celular, indicando que esta espécie merece destaque na busca de novas moléculas para o tratamento do câncer.

Feelings experienced by mothers and children/adolescents with sickle disease in the context of the covid-19 pandemic / Sentimientos experimentados por madres y niños/adolescentes con enfermedad falciforme en el contexto de la pandemia del covid-19 / Sentimentos vivenciados por mães e crianças/adolescentes com doença falciforme no contexto da pandemia da covid-19

ABSTRACT Objective to know the feelings of children/adolescents with Sickle Cell Disease perceived by mothers and to identify feelings experienced by mothers of children/adolescents with Sickle Cell Disease after the emergence of the COVID-19 pandemic. Method qualitative study, developed in a city in the state of Bahia with the participation of 19 mothers of children and adolescents with Sickle Cell Disease. Data were obtained between March and April 2020 through semi-structured interviews via WhatsApp calls, which were submitted to thematic, factor and similarity analysis after transcription. Results the participants reported feeling overloaded due to dedicating themselves full time to the care of their children, who were more vulnerable and emotionally unstable due to social distancing. Therefore, strategies were adopted by mothers, intending to help adaptation and stress reduction - provided by the context of the pandemic - for themselves and in their children. Conclusion mothers of children/adolescents with Sickle Cell Disease need to be supported and instrumentalized in order to implement care centered on the psychoemotional dimension and seek specialized help, especially regarding feelings triggered due to the need to maintain the therapeutic routine of their children in the midst of the pandemic.

RESUMEN Objetivo conocer los sentimientos de los niños/adolescentes con Drepanocitosis percibidos por las madres e identificar los sentimientos experimentados por las madres de niños/adolescentes con Drepanocitosis después del surgimiento de la pandemia de COVID-19. Método estudio cualitativo, desarrollado en una ciudad del estado de Bahía con la participación de 19 madres de niños y adolescentes con enfermedad de células falciformes. Los datos se obtuvieron entre marzo y abril de 2020 a través de entrevistas semiestructuradas a través de llamadas de WhatsApp, que fueron sometidas a análisis temático, factorial y de similitud después de la transcripción. Resultados los participantes relataron sentirse sobrecargados al dedicar tiempo completo al cuidado de sus hijos, quienes se encontraban más vulnerables e inestables emocionalmente debido al distanciamiento social. Por lo tanto, las estrategias fueron adoptadas por las madres, con la intención de adaptarse y reducir las tensiones, proporcionadas por el contexto de la pandemia, en ellas y en sus hijos. Conclusión las madres de niños/adolescentes con Enfermedad de Células Falciformes necesitan ser apoyadas e instrumentalizadas para implementar cuidados centrados en la dimensión psicoemocional y buscar ayuda especializada, especialmente en relación a los sentimientos desencadenados por la necesidad de mantener la rutina terapéutica de sus hijos en la medio de la pandemia.

RESUMO Objetivo conhecer sentimentos de crianças/adolescentes com Doença Falciforme percebidos pelas mães e identificar sentimentos vivenciados por mães de crianças/adolescentes com Doença Falciforme após o surgimento da pandemia da COVID-19. Método estudo qualitativo, desenvolvido numa cidade do estado da Bahia com a participação de 19 mães de crianças e adolescentes com Doença Falciforme. Os dados foram obtidos entre março e abril de 2020 mediante entrevistas semiestruturadas via WhatsApp, as quais, após transcritas, foram submetidas a análise temática, análise fatorial e análise de similitude. Resultados as participantes referiram sentir sobrecarga ao dedicarem tempo integral aos cuidados dos filhos, que se mostraram mais vulneráveis e instáveis emocionalmente devido ao distanciamento social. Diante disso, estratégias foram adotadas pelas mães, tencionando a adaptação e a diminuição das tensões - proporcionadas pelo contexto da pandemia - nelas mesmas e em seus filhos. Conclusão as mães de crianças/adolescentes com Doença Falciforme necessitam ser apoiadas e instrumentalizadas para que se implementem cuidados centrados na dimensão psicoemocional e se busque ajuda especializada, principalmente diante daqueles sentimentos deflagrados em razão da necessidade de manter a rotina terapêutica dos seus filhos em meio à pandemia.

Influência da Delfinidina como potencial modulador da capacidade imunorregulatória das Células-Tronco Mesenquimais / Influence of Delphinidin as a potential modulator of the immunoregulatory capacity of Mesenchymal Stem Cells

As Células-Tronco Mesenquimais (CTMs), são células multipotentes, presentes em diversos tecidos, sendo bastante estudada devido sua capacidade imunorregulatória por meio da liberação de fatores solúveis. Fatores estes que atuam sobre as funções de células do sistema imunitário. Simultaneamente, estudos indicam que os compostos flavonoides, em destaque a Delfinidina, presente em alguns frutos e flores, possuem atuação anti-inflamatória e inibitória sobre células do sistema imunitário. Todavia, são escassos os estudos em relação entre a capacidade imunorregulatória da CTM e a influência da Delfinidina, sendo este o objetivo deste estudo. Inicialmente, a Delfinidina 3-O-ß-D-glicosídeo foi escolhido, devido a sua maior estabilidade e a dose de 50 µM foi selecionada após análise por citometria de fluxo que mostrou aumento da fase proliferativa do ciclo celular. Posteriormente ao realizar análise da produção de fatores solúveis pelas CTM, os resultados mostraram aumento da produção de IL-10, TGF-ß e Oxido nítrico pelas CTM tratadas com Delfinidina. Bem como, diminuição da expressão de p-NF-κB/NF-κB pelas CTMs tratadas com Delfinidina, quando avaliadas por Wersten Blot. Adicionalmente, para analisar a Delfinidina sobre os efeitos imunorregulatórios da CTM sob macrófagos (RAW 264.7), célula esta, importante no sistema imune inato. Foram realizadas culturas condicionadas, com posterior análise da produção de fatores solúveis, os resultados mostraram aumento da produção de IL-10, e diminuição da produção de TNF-α, IL-1α e IL-12 pelos macrófagos, nas culturas condicionadas. Assim como, diminuição da expressão do fator p-NF-κB/NF-κB pelos macrófagos nas culturas condicionadas, quando avaliadas por Wersten Blot. Ademais, ao analisar a atividade metabólica dos macrófagos por ensaio de MTT, os resultados mostraram que as culturas condicionadas e a Delfinidina per si foi capaz de diminuir a atividade metabólica, sem alterar os efeitos anti-inflamatórios sobre a célula. Em síntese, a Delfinidina mostrou acentuar a atuação imunorregulatória da CTM sobre a linhagem macrofágica, célula esta, de grande importância para o sistema imune inato

Mesenchymal Stem Cells (MSCs) are multipotent cells present in various tissues, being widely studied due to their immunoregulatory capacity through the release of soluble factors. These factors act on the functions of cells of the immune system. Simultaneously, studies indicate that flavonoid compounds, especially Delphinidin, present in some fruits and flowers, have anti inflammatory and inhibitory effects on immune system cells. However, there are few studies on the relationship between the immunoregulatory capacity of MSC and the influence of Delphinidin, which is the objective of this study. Initially, Delphinidin 3-O-ß-D-glycoside was chosen due to its greater stability and the 50 µM dose was selected after analysis by flow cytometry which showed an increase in the proliferative phase of the cell cycle. Subsequently, when analyzing the production of soluble factors by MSCs, the results showed an increase in the production of IL-10, TGF-ß and nitric oxide by MSCs treated with Delphinidin. As well as decreased expression of p-NF-κB/NF-κB by MSCs treated with Delphinidin, when evaluated by Wersten Blot. Additionally, to analyze Delphinidin on the immunoregulatory effects of MSC on macrophages (RAW 264.7), this cell is important in the innate immune system. Conditioned cultures were performed, with subsequent analysis of the production of soluble factors, the results showed an increase in the production of IL-10, and a decrease in the production of TNF-α, IL-1α and IL-12 by macrophages, in the conditioned cultures. As well as decreased expression of p-NF-κB/NF-κB factor by macrophages in conditioned cultures, when evaluated by Wersten Blot. Furthermore, when analyzing the metabolic activity of macrophages by MTT assay, the results showed that conditioned cultures and Delphinidin itself was able to decrease the metabolic activity, without altering the anti-inflammatory effects on the cell. In summary, Delphinidin has shown to enhance the immunoregulatory action of MSC on the macrophage lineage, a cell that is of great importance for the innate immune system

Transformação leucêmica do microambiente das células-tronco hematopoiéticas

O microambiente das células-tronco hematopoiéticas é responsável por coordenar diversos eventos envolvidos na produção de células sanguíneas. Essa renovação hematopoiética só é possível graças às interações e sinalizações bem ordenadas que mantém a harmonia do tecido. Nas leucemias ocorre ruptura nesses mecanismos de controle e ocorre processo de transformação leucêmica do microambiente, de forma a favorecer a manutenção neoplásica do tecido sanguíneo. O objetivo deste estudo foi expor o processo de transformação leucêmica do microambiente, no âmbito das modificações celulares e moleculares sofridas para sustentar o tumor. Trata-se de um artigo de revisão narrativa e as bases de dados Pubmed, SciELO, Cocrahne Library e MedLine foram consultadas em busca de publicações dos últimos anos sobre o tema. Os dados apresentados contribuem para o entendimento holístico acerca das leucemias. A transformação leucêmica, seja por mutações primárias nos componentes do microambiente ou pelo sequestro de suas funções normais pelas células iniciadoras de leucemia, é relevante para que ocorra a instalação, a progressão, a disseminação e a quimiorresistência tumoral. Por meio da atuação de vários componentes este microambiente sustenta as células-tronco leucêmicas e representa caminho promissor para o desenvolvimento de novas terapias antileucêmicas

The microenvironment of hematopoietic stem cells is responsible for coordinating several events involved with the production of blood cells. This hematopoietic renewal is only possible thanks to the well-ordered interactions and signals that maintain tissue harmony. In leukemias, the control mechanisms break down and the leukemic transformation of the microenvironment occurs, thus favoring the neoplastic maintenance of blood tissue. From this perspective, this study aimed to investigate the microenvironment transformation process within the scope of cellular and molecular changes that support tumor progression. It is a narrative review article in which the Pubmed, SciELO, Cochrane Library, and MedLine databases were consulted in search of recent publications that addressed the proposed subject. The data obtained contribute to a more holistic understanding of leukemias. The leukemic transformation, either by primary mutations in the microenvironment components or through the sequestration of its normal functions by leukemia-initiating cells, is relevant for tumor establishment, progression, dissemination, and chemoresistance. Through the action of various components, this microenvironment supports leukemic stem cells and represents a promising path for developing new antileukemic therapies.

Development and femoral growth of rabbits of the New Zealand line / Desarrollo y crecimiento femoral de conejas de la línea new zealand

RESUMEN En este proyecto se investigan los cambios que acontecen en el desarrollo y crecimiento de conejos hembras de la línea New Zealand (CoNZ) en sus huesos femorales. Los animales fueron mantenidas en jaulas individuales desde las dos semanas de edad, con comida y agua ad libitum y se sacrificaron en tiempos mensualmente consecutivos: 1, 2, 3, 4, 5, y 6 meses. Tras la obtención de las piezas femorales, y a partir de estudios imagenológicos se determinaron los ángulos del cuello femoral (Af), la longitud total (L), la densidad mineral ósea total, del centro óseo y de la metáfisis femoral (DMOt, DMOco y DMOmf respectivamente), analizándose las variaciones intergrupales por el test Wilcoxon, y corrección de Bonferroni. Se realizaron estudios histológicos de los cortes descalcificados de las piezas femorales. Los análisis sobre los Af mostraron un incremento significativo durante el primer mes mientras que L se estabilizó a partir del 4to mes. Los valores de DMOt mostraron un plateau a partir del cuarto mes, si bien las DMOco y DMOmf ya a partir del tercer mes no mostraron incrementos significativos. Histológicamente se observó para el cuarto mes ausencia de las diferentes zonas características del cartílago de crecimiento metafisiario, con presencia únicamente de un pequeño remanente de células condrales. Desde el quinto mes se observa ausencia total de cartílago, con presencia únicamente de tejido osteoide (TO). La interpretación integrada de los resultados nos permite afirmar, que a partir del cuarto mes de desarrollo, el fémur de CoNZ adquiere características compatibles con un periodo de adultez.

ABSTRACT In this project we investigated the changes of femoral development and growth of female New Zealand rabbits (NZr). Animals were maintained in individual cages since they were two weeks old with food and water ad libitum, and were sacrificed monthly consecutively: 1, 2, 3, 4, 5 and 6. Radiological studies were made with femoral pieces to determine femoral neck angle (fnA), total length (L), total bone mineral density (tBMD), bone center mineral density (bcBMD) and femoral metaphysis bone mineral density (fmBMD). We analyzed intergroup variations with Wilcoxon test and Bonferroni correction. We also performed histologic studies with femoral pieces. The fnA analyzes showed a significant increase in the first month while L stabilized since the fourth month. tBMD showed a plateu since the fourth month, even though bcBMD and fmBMD did not show any significant changes since the third month. In histology it was observed the absence of all typical growth cartilage zones since the fourth month, with the only presence of small remaining cartilage cells. In the fifth month we observed complete absence of cartilage, and presence of osteoid tissue only. The integrated interpretation of the results allows us to affirm that since the fourth month of development the femur of NZr acquires characteristics compatible with the adulthood.