Avaliação da ação germicida da luz ultravioleta de cabine de segurança biológica frente às espécies bacterianas / Evaluation of the germicidal action of ultraviolet light in biosafety cabinet concerning bacterial species

RESUMO: Introdução: A cabine de segurança biológica (CBS) é um equipamento de proteção coletiva, utilizado para efe-tuar a contenção de aerossóis produzidos nos procedimentos laboratoriais. A CBS protege tanto os trabalhadores, quanto o material manipulado e o meio ambiente. Dispõe de lâmpadas de luz ultravioleta (UV) que possui ação germicida, alterando os ácidos nucleicos dos micro-organismos. Objetivo: O objetivo do presente estudo foi avaliar a ação germicida da luz UV da CBS classe II, tipo A2, frente à cultura de duas espécies de bactérias com diferentes condições de exposição a luz UV. Material e Métodos: Para o desenvolvimento da pesquisa foram utilizadas as bactérias Staphylococcus aureus ATCC 25923 e Klebsiella pneumoniae ATCC 10031, na concentração de 1,5x108 Unidades Formadoras de Colônias/ml (UFC/ml), que após a semeadura em biplacas de Petri foram expostas à luz UV em diferentes condições e tempos. Resultados: Os resultados obtidos revelaram que as espécies de bactérias apresentaram igual perfil de crescimento ou inibição quando submetidas às diferentes condições de exposição. As biplacas de Petri com as tampas abertas e protegidas ou não com embalagem de esterilização apresentaram, nos tempos 15 e 20 minutos, inibição bacteriana. Nas biplacas protegidas pelo papel alumínio e nas biplacas com a tampa fechada, independentemente do tempo e da condição, os micro-organismos apresentaram crescimento bacteriano. Conclusão: Com os resultados obtidos, sugere-se que a ação germicida da luz UV foi eficaz, garantindo a descontaminação adequada e assegurando a qualidade na biossegurança laboratoria. (AU)

ABSTRACT: Introduction: The biological safety cabinet (BSC) is a collective protective device used to hold aerosols produced in laboratory procedures. The BSC protects workers, material handling, and the environment. It relies on ultraviolet light (UV) lamps that have germicidal action, altering the nucleic acids of microorganisms. Objective: The objective of the present study was to evaluate the germicidal action of BSC class II type A2 UV light against the culture of two bacterial species with different conditions of exposure to UV light. Methods: For the research, the bacteria Sta-phylococcus aureus ATCC 25923 and Klebsiella pneumoniae ATCC 10031 were used, at a concentration of 1.5x108Colony Forming Units/ml (CFU/ml), which were seeded in Petri biplates. Use UV light under different conditions and times. Results: The bacterial species showed the same growth or inhibition profile when subjected to different exposure conditions. Petri dishes with the cover open and protected or not with sterilization packaging showed bacterial inhibition at 15 and 20 minutes. The microorganisms in the biplates protected by the aluminum foil and in the biplates with the cover on, regardless of the time and condition, showed bacterial growth. Conclusion: With the results obtained, it is suggested that the germicidal action of UV light was effective, ensuring adequate decon-tamination and ensuring quality in laboratory biosafety. (AU)

Monitoramento em cabine de segurança biológica: manipulação de cepas e descontaminação em um laboratório de micobactérias / Biological safety cabinet monitoring: strains manipulation and decontamination in a mycobacteria laboratory

OBJETIVOS: Verificar evidências da formação de aerossóis durante a manipulação de cepas de micobactérias para teste de sensibilidade às drogas (ANT) e identificação (TIP) e o efeito da descontaminação com solução de álcool 70 por cento e luz ultravioleta (UV) na cabine de segurança biológica (CSB), após os procedimentos laboratoriais. MÉTODOS: Uma placa foi exposta na CSB durante os procedimentos de ANT e TIP. Ao término, a CSB foi limpa e descontaminada com álcool 70 por cento e exposta à luz UV por 15 minutos. Após esse tempo outra placa foi exposta por duas horas, somente com a ventilação da CSB ligada. As placas foram incubadas a 37ºC e observadas por 30 dias. Os esfregaços das colônias isoladas foram corados pelas técnicas de Ziehl Neelsen e Gram, e as colônias de bacilo álcool-ácido-resistente (BAAR) foram identificadas pelos métodos tradicionais. RESULTADOS: Nas 38 placas expostas durante o ANT, cresceram micobactérias em 10 placas (26,3 por cento), fungos em uma (2,6 por cento) e outros bacilos em duas (5,3 por cento). Das placas com micobactérias, oito (80 por cento) foram identificadas como M. tuberculosis e duas (20 por cento) tiveram identificação inconclusiva. Mesmo após a descontaminação com álcool 70 por cento e uso de UV, cresceram fungos em duas placas (5,3 por cento) e cocos em outras duas (5,3 por cento). Nas 30 placas colocadas nas CSB durante a TIP, cresceram micobactérias em 10 placas (33,3 por cento), fungos em duas (6,6 por cento), cocos em uma (3,4 por cento) e uma mistura de micobactérias e outro bacilo em uma (3,4 por cento). Não houve crescimento nas placas expostas após descontaminação das CSB com álcool a 70 por cento e uso de UV ao término da TIP. CONCLUSÃO: Durante os procedimentos houve formação de aerossóis contendo micobactérias, fato que ficou comprovado pelo crescimento de colônias de micobactérias nas placas expostas. Técnicas laboratoriais adequadas devem ser respeitadas para minimizar a formação de aerossóis...

OBJECTIVES: To verify the evidence of aerosol formation during the manipulation of mycobacteria strains for susceptibility (ST) and identification tests (IT) as well as the decontamination effect of alcohol solution 70 percent and ultraviolet (UV) radiation in biological safety cabinets (BSC) after laboratory procedures. METHODS: One plate was exposed in a BSC during ST and IT procedures. Afterwards, the BSC was cleaned and decontaminated with alcohol solution 70 percent and exposed to UV radiation for 15 minutes. After that, another plate was exposed for two hours, only with the BSC ventilation on. Both plates were incubated at 37ºC and observed for 30 days. The smears from the isolated colonies were stained with Ziehl Neelsen and Gram techniques, and acid fast bacilli (AFB) were identified by conventional methods. RESULTS: In 38 plates exposed during ST, there was mycobacteria growth in 10 plates (26.3 percent), fungi in one (2.6 percent) and bacilli in two (5.3 percent). Among those plates that presented mycobacteria growth, eight (80 percent) were identified as M. tuberculosis and two (20 percent) had inconclusive identification. Even after decontamination with alcohol solution 70 percent and UV radiation, two plates presented fungi growth (5.3 percent) and other two presented cocci growth (5.3 percent). Among 30 plates exposed during IT procedures, there was mycobacteria growth in 10 of them (33.3 percent), fungi in two (6.6 percent), cocci in one (3.4 percent) and one (3.4 percent) mixed mycobacteria and another bacillus. No growth was observed when alcohol solution 70 percent and UV radiation were used for decontamination after IT procedures. CONCLUSION: During the procedures there was aerosol formation with mycobacteria, which was proved by mycobacteria growth on the exposed plates. Not only should adequate laboratory techniques be respected to minimize aerosol formation, but professional expertise, the continuity of capacity...