Bioactive properties of Persea lingue Ness (Lauraceae) fruit and leaf extracts / Propriedades bioativas de extratos de folhas e frutos de Persea lingue Ness (Lauraceae)

Persea lingue Ness is a tree species that lives mainly in temperate forests of south-central Chile. Its leaves are used in ethnomedicine, the fruit is a drupe similar to that of the avocado and has not been studied. The aim of this study was to determine the cytotoxicity in leukemia cell and antibacterial activity, along with some chemical content characteristics of P. lingue fruit and leaf extracts. The antibacterial activity was determined by the inhibition of bacterial growth in liquid medium assay against Gram-positive and Gram-negative bacteria. The leukemia cell lines Kasumi-1 and Jurkat were used to evaluate the cytotoxic activity by using propidium iodide and AlamarBlue assays. Total phenolic, flavonoid, condensed tannin, alkaloid and lipid contents were evaluated in the fruit and in the leaf extracts. The antioxidant activity of both extracts were also elavaluated. Leaf extract presented the highest content of total phenols, condensed tannins and flavonoids, and also the highest antioxidant activity. While the fruit extract has a higher amount of lipids and alkaloids and the high antibacterial activity against Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus, Bacillus megaterium and Micrococcus luteus. The leaf extract only showed activity against M. luteus. Concerning the cytotoxic activity, only the fruit extract showed cytotoxicity against the cell lines Jurkat and Kasumi-1. P. lingue fruit extract is a potential source of biologically active molecules for the development of new drugs to be used in some types of leukemia, as well as antibacterial agent.

Persea lingue Ness é uma árvore que vive principalmente na floresta temperada do centro-sul do Chile. As folhas são usadas na etnomedicina. O fruto é uma drupa similar ao abacate e que nunca foi pesquisada anteriormente. O objetivo deste estudo foi o de avaliar a citotoxicidade em células leucêmicas e as atividades antibacterianas, assim como algumas características químicas do extrato de fruto e da folha do P. lingue. As atividades antibacterianas foram determinadas pelo método da inibição do crescimento bacteriano em meio líquido empregando-se bactérias Gram-positivas e Gram-negativas. As linhagens celulares leucêmicas, Kasumi-1 e Jurkat foram usadas para avaliar a atividade citotóxica em ensaios empregando-se iodeto de propídio e AlamarBlue. Foram avaliados os teores totais de fenóis, flavonóides, taninos condensados, alcalóides e lipídeos presentes nos extratos das folhas e dos frutos. As atividades antioxidantes de ambos os extratos também foram avaliadas. O extrato das folhas foi o que apresentou o maior conteúdo de fenóis, taninos condensados e flavonóides totais e a maior atividade antioxidante. Já o extrato de fruto apresentou a maior quantidade de lipídios e alcaloides e a melhor atividade antibacteriana contra Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus, Bacillus megaterium e Micrococcus luteus. Já o extrato das folhas apresentou apenas atividade contra M. luteus. Em relação à atividade citotóxica, apenas o extrato do fruto apresentou citotoxicidade contra as linhagens celulares Jurkat e Kasumi-1. Em resumo, o extrato do fruto de P. lingue é uma potencial fonte de moléculas com atividade biológica para o desenvolvimento de novos fármacos a serem utilizados em alguns tipos de leucemia, bem como agente antibacteriano.

Bioactive properties of Persea lingue Ness (Lauraceae) fruit and leaf extracts

Abstract Persea lingue Ness is a tree species that lives mainly in temperate forests of south-central Chile. Its leaves are used in ethnomedicine, the fruit is a drupe similar to that of the avocado and has not been studied. The aim of this study was to determine the cytotoxicity in leukemia cell and antibacterial activity, along with some chemical content characteristics of P. lingue fruit and leaf extracts. The antibacterial activity was determined by the inhibition of bacterial growth in liquid medium assay against Gram-positive and Gram-negative bacteria. The leukemia cell lines Kasumi-1 and Jurkat were used to evaluate the cytotoxic activity by using propidium iodide and AlamarBlue assays. Total phenolic, flavonoid, condensed tannin, alkaloid and lipid contents were evaluated in the fruit and in the leaf extracts. The antioxidant activity of both extracts were also elavaluated. Leaf extract presented the highest content of total phenols, condensed tannins and flavonoids, and also the highest antioxidant activity. While the fruit extract has a higher amount of lipids and alkaloids and the high antibacterial activity against Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus, Bacillus megaterium and Micrococcus luteus. The leaf extract only showed activity against M. luteus. Concerning the cytotoxic activity, only the fruit extract showed cytotoxicity against the cell lines Jurkat and Kasumi-1. P. lingue fruit extract is a potential source of biologically active molecules for the development of new drugs to be used in some types of leukemia, as well as antibacterial agent.

Resumo Persea lingue Ness é uma árvore que vive principalmente na floresta temperada do centro-sul do Chile. As folhas são usadas na etnomedicina. O fruto é uma drupa similar ao abacate e que nunca foi pesquisada anteriormente. O objetivo deste estudo foi o de avaliar a citotoxicidade em células leucêmicas e as atividades antibacterianas, assim como algumas características químicas do extrato de fruto e da folha do P. lingue. As atividades antibacterianas foram determinadas pelo método da inibição do crescimento bacteriano em meio líquido empregando-se bactérias Gram-positivas e Gram-negativas. As linhagens celulares leucêmicas, Kasumi-1 e Jurkat foram usadas para avaliar a atividade citotóxica em ensaios empregando-se iodeto de propídio e AlamarBlue. Foram avaliados os teores totais de fenóis, flavonóides, taninos condensados, alcalóides e lipídeos presentes nos extratos das folhas e dos frutos. As atividades antioxidantes de ambos os extratos também foram avaliadas. O extrato das folhas foi o que apresentou o maior conteúdo de fenóis, taninos condensados e flavonóides totais e a maior atividade antioxidante. Já o extrato de fruto apresentou a maior quantidade de lipídios e alcaloides e a melhor atividade antibacteriana contra Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus, Bacillus megaterium e Micrococcus luteus. Já o extrato das folhas apresentou apenas atividade contra M. luteus. Em relação à atividade citotóxica, apenas o extrato do fruto apresentou citotoxicidade contra as linhagens celulares Jurkat e Kasumi-1. Em resumo, o extrato do fruto de P. lingue é uma potencial fonte de moléculas com atividade biológica para o desenvolvimento de novos fármacos a serem utilizados em alguns tipos de leucemia, bem como agente antibacteriano.

Bioactive properties of Persea lingue Ness (Lauraceae) fruit and leaf extracts / Propriedades bioativas de extratos de folhas e frutos de Persea lingue Ness (Lauraceae)

Abstract Persea lingue Ness is a tree species that lives mainly in temperate forests of south-central Chile. Its leaves are used in ethnomedicine, the fruit is a drupe similar to that of the avocado and has not been studied. The aim of this study was to determine the cytotoxicity in leukemia cell and antibacterial activity, along with some chemical content characteristics of P. lingue fruit and leaf extracts. The antibacterial activity was determined by the inhibition of bacterial growth in liquid medium assay against Gram-positive and Gram-negative bacteria. The leukemia cell lines Kasumi-1 and Jurkat were used to evaluate the cytotoxic activity by using propidium iodide and AlamarBlue assays. Total phenolic, flavonoid, condensed tannin, alkaloid and lipid contents were evaluated in the fruit and in the leaf extracts. The antioxidant activity of both extracts were also elavaluated. Leaf extract presented the highest content of total phenols, condensed tannins and flavonoids, and also the highest antioxidant activity. While the fruit extract has a higher amount of lipids and alkaloids and the high antibacterial activity against Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus, Bacillus megaterium and Micrococcus luteus. The leaf extract only showed activity against M. luteus. Concerning the cytotoxic activity, only the fruit extract showed cytotoxicity against the cell lines Jurkat and Kasumi-1. P. lingue fruit extract is a potential source of biologically active molecules for the development of new drugs to be used in some types of leukemia, as well as antibacterial agent.

Resumo Persea lingue Ness é uma árvore que vive principalmente na floresta temperada do centro-sul do Chile. As folhas são usadas na etnomedicina. O fruto é uma drupa similar ao abacate e que nunca foi pesquisada anteriormente. O objetivo deste estudo foi o de avaliar a citotoxicidade em células leucêmicas e as atividades antibacterianas, assim como algumas características químicas do extrato de fruto e da folha do P. lingue. As atividades antibacterianas foram determinadas pelo método da inibição do crescimento bacteriano em meio líquido empregando-se bactérias Gram-positivas e Gram-negativas. As linhagens celulares leucêmicas, Kasumi-1 e Jurkat foram usadas para avaliar a atividade citotóxica em ensaios empregando-se iodeto de propídio e AlamarBlue. Foram avaliados os teores totais de fenóis, flavonóides, taninos condensados, alcalóides e lipídeos presentes nos extratos das folhas e dos frutos. As atividades antioxidantes de ambos os extratos também foram avaliadas. O extrato das folhas foi o que apresentou o maior conteúdo de fenóis, taninos condensados e flavonóides totais e a maior atividade antioxidante. Já o extrato de fruto apresentou a maior quantidade de lipídios e alcaloides e a melhor atividade antibacteriana contra Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus, Bacillus megaterium e Micrococcus luteus. Já o extrato das folhas apresentou apenas atividade contra M. luteus. Em relação à atividade citotóxica, apenas o extrato do fruto apresentou citotoxicidade contra as linhagens celulares Jurkat e Kasumi-1. Em resumo, o extrato do fruto de P. lingue é uma potencial fonte de moléculas com atividade biológica para o desenvolvimento de novos fármacos a serem utilizados em alguns tipos de leucemia, bem como agente antibacteriano.

Bioactive properties of Persea lingue Ness (Lauraceae) fruit and leaf extracts / Propriedades bioativas de extratos de folhas e frutos de Persea lingue Ness (Lauraceae)

Persea lingue Ness is a tree species that lives mainly in temperate forests of south-central Chile. Its leaves are used in ethnomedicine, the fruit is a drupe similar to that of the avocado and has not been studied. The aim of this study was to determine the cytotoxicity in leukemia cell and antibacterial activity, along with some chemical content characteristics of P. lingue fruit and leaf extracts. The antibacterial activity was determined by the inhibition of bacterial growth in liquid medium assay against Gram-positive and Gram-negative bacteria. The leukemia cell lines Kasumi-1 and Jurkat were used to evaluate the cytotoxic activity by using propidium iodide and AlamarBlue assays. Total phenolic, flavonoid, condensed tannin, alkaloid and lipid contents were evaluated in the fruit and in the leaf extracts. The antioxidant activity of both extracts were also elavaluated. Leaf extract presented the highest content of total phenols, condensed tannins and flavonoids, and also the highest antioxidant activity. While the fruit extract has a higher amount of lipids and alkaloids and the high antibacterial activity against Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus, Bacillus megaterium and Micrococcus luteus. The leaf extract only showed activity against M. luteus. Concerning the cytotoxic activity, only the fruit extract showed cytotoxicity against the cell lines Jurkat and Kasumi-1. P. lingue fruit extract is a potential source of biologically active molecules for the development of new drugs to be used in some types of leukemia, as well as antibacterial agent.

Persea lingue Ness é uma árvore que vive principalmente na floresta temperada do centro-sul do Chile. As folhas são usadas na etnomedicina. O fruto é uma drupa similar ao abacate e que nunca foi pesquisada anteriormente. O objetivo deste estudo foi o de avaliar a citotoxicidade em células leucêmicas e as atividades antibacterianas, assim como algumas características químicas do extrato de fruto e da folha do P. lingue. As atividades antibacterianas foram determinadas pelo método da inibição do crescimento bacteriano em meio líquido empregando-se bactérias Gram-positivas e Gram-negativas. As linhagens celulares leucêmicas, Kasumi-1 e Jurkat foram usadas para avaliar a atividade citotóxica em ensaios empregando-se iodeto de propídio e AlamarBlue. Foram avaliados os teores totais de fenóis, flavonóides, taninos condensados, alcalóides e lipídeos presentes nos extratos das folhas e dos frutos. As atividades antioxidantes de ambos os extratos também foram avaliadas. O extrato das folhas foi o que apresentou o maior conteúdo de fenóis, taninos condensados e flavonóides totais e a maior atividade antioxidante. Já o extrato de fruto apresentou a maior quantidade de lipídios e alcaloides e a melhor atividade antibacteriana contra Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus, Bacillus megaterium e Micrococcus luteus. Já o extrato das folhas apresentou apenas atividade contra M. luteus. Em relação à atividade citotóxica, apenas o extrato do fruto apresentou citotoxicidade contra as linhagens celulares Jurkat e Kasumi-1. Em resumo, o extrato do fruto de P. lingue é uma potencial fonte de moléculas com atividade biológica para o desenvolvimento de novos fármacos a serem utilizados em alguns tipos de leucemia, bem como agente antibacteriano.

Cytotoxic activity of ethanolic extracts of Lippia graveolens HBK leaves and stem against lung cancer cell line SK-LU-1 / Actividad citotóxica de extractos etanólicos de hoja y tallos de Lippia graveolens HBK contra la línea celular de cáncer de pulmón SK-LU-1

Lippia graveolens HBK (Verbenaceae) is an aromatic herb of economic importance in Mexico, known as oregano. The leaves are used as condiments, and people use this species for respiratory and digestive disorders. The aim of this work was to evaluate the cytotoxic effect of ethanolic extracts obtained from free-oil leaves (L9) and stem (S15), against lung cancer cell line SK-LU-1, through tetrazolium salt (MTT) assay. Extracts concentrations of 0.3 to 300 µg/mL were used and HFF-1 as normal control cells. Both L9 and S15 extracts, showed cytotoxic effect, although stem was stronger than leaves and without damage to normal cell control. The phenolic compounds caffeic acid and acacetin werein higher concentration in L9, whereas naringenin, taxifolin, eriodictyol, luteolin, and apigenin had higher concentrations in S15. The ethanolic extracts of L. graveolens have excellent cytotoxic activity, and have a wide possibility of use in lung cancer treatment.

Lippia graveolens HBK. (Verbenaceae) es una hierba aromática de importancia económica en México, conocida como orégano. Las hojas se usan como condimento y en medicina tradicional se utiliza para aliviar malestares respiratorios y digestivos. El objetivo de este trabajo fue evaluar el efecto citotóxico de extractos etanólicos obtenidos de hojas sin aceite (L9) y tallo (S15), sobre la línea celular de cáncer de pulmón SK-LU-1, mediante el ensayo de la sal de tetrazolium (MTT). Los extractos se aplicaron a concentraciones de 0,3 a 300 µg/mL y se utilizaron células HFF-1 como control normal. Tanto los extractos L9 como S15 mostraron efecto citotóxico, aunque el efecto del tallo fue mayor al de las hojas y sin daño al control celular normal. Los compuestos fenólicos ácido cafeico y acacetina se encontraron en mayor concentración en L9, mientras que naringenina, taxifolina, eriodictyol, luteolina y apigenina tuvieron mayor concentración en S15. Los extractos etanólicos de L. graveolens tienen una excelente actividad citotóxica, con amplia posibilidad de utilizar en el tratamiento de cáncer de pulmón.

Cáncer de mama triple negativo asociado a dermatomiositis paraneoplásica: Reporte de caso y revisión de la literatura / Triple-negative breast cancer associated with paraneoplastic dermatomyositis: Case report and literature review

Resumen La dermatomiositis (DM) es un tipo de miopatía inflamatoria bien definida, inmunomediada, con afectación específica del músculo esquelético y con compromiso variable de piel y otros órganos. Se caracteriza por debilidad muscular proximal, lesiones cutáneas patognomónicas de dermatomiositis como el signo de Gottron, eritema violáceo o heliotropo, y evidencia de inflamación muscular por enzimas elevadas, cambios miopáticos en electromiografía y biopsia muscular anormal. Tiene una asociación bien establecida con diferentes tipos de cáncer pero es rara su asociación con cáncer de mama. Cuando se presentan de manera concomitante, su diagnóstico requiere un estudio multidisciplinario para orientar el origen paraneoplásico frente a una etiología propiamente autoinmune que requiera terapia inmunosupresora dirigida. Describimos el caso de una paciente con diagnóstico simultáneo de carcinoma infiltrante de mama triple negativo y criterios de dermatomiositis como manifestación paraneoplásica.

Abstract Dermatomyositis (DM) is a well-defined immune-mediated inflammatory myopathy, with specific involvement of skeletal muscle and variable involvement of skin and other organs. It is characterized by proximal muscle weakness, pathognomonic skin lesions of dermatomyositis such as Gottron's sign, violaceous or heliotrope rash, and evidence of muscle inflammation due to elevated enzymes, myopathic changes on electromyography, and abnormal muscle biopsy. It has a well-established association with different types of cancer, but its association with breast cancer is rare. When they occur concomitantly, their diagnosis requires a multidisciplinary study to confirm the paraneoplastic origin versus a primarily autoimmune etiology that may require targeted immunosuppressive therapy. We describe the case of a patient with a simultaneous diagnosis of triple-negative infiltrating breast carcinoma and criteria for dermatomyositis as a paraneoplastic manifestation.

Assessment of the antibacterial, cytotoxic and antioxidant activities of Morus nigra L. (Moraceae) / Avaliação das atividades antibacteriana, citotóxica e antioxidante de Morus nigra L. (Moraceae)

Abstract This study was carried out to assess the antibacterial, cytotoxic and antioxidant activities of extracts of Morus nigra L. HPLC was used to determine the fingerprint chromatogram of the crude ethanolic extract (Mn-EtOH). The antibacterial effect was assessed through the method of microdilution. The cytotoxicity was tested against human tumour cell lines using the 3-(4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2H-tetrazolium bromide (MTT) assay. The total phenolic and flavonoid contents were also assessed through the Folin-Ciocalteu and aluminum chloride methods, respectively. Antioxidant activities of the extracts were evaluated by using 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazil (DPPH) radical scavenging and β-carotene-linoleic acid bleaching methods. The presence of phenolic compounds in Mn-EtOH was confirmed using HPLC. The extracts showed activity against most microorganisms tested. The extracts did not show any expressive antiproliferative effect in the assessment of cytotoxicity. The most significant total phenolic content was 153.00 ± 11.34 mg of gallic acid equivalent/g to the ethyl acetate extract (AcOEt). The total flavonoid content was 292.50 ± 70.34 mg of catechin equivalent/g to the AcOEt extract, which presented the best antioxidant activity (IC50 50.40 ± 1.16 μg/mL) for DPPH scavenging. We can conclude that this species shows strong antibacterial and antioxidant activities, as well as weak cytotoxic effects.

Resumo Este estudo foi realizado para avaliar as atividades antibacteriana, citotóxica e antioxidante de extratos de Morus nigra L. HPLC foi utilizado para determinar o perfil de compostos fenólicos do extrato etanólico bruto (Mn-EtOH). O efeito antibacteriano foi avaliado através do método de microdiluição. A citotoxicidade foi testada contra linhagens celulares de tumores humanos utilizando o ensaio do brometo de 3-(4,5-dimetil-2-tiazolil)-2,5-difenil-2H-tetrazólio (MTT). O conteúdo total de compostos fenólicos e flavonoides também foi avaliado por meio dos métodos de Folin-Ciocalteu e cloreto de alumínio, respectivamente. A atividade antioxidante dos extratos foi avaliada por meio do sequestro do radical livre 2,2-difenil-1-picrilhidrazil (DPPH) e co-oxidação do sistema β-caroteno-ácido linoleico. A presença de compostos fenólicos em Mn-EtOH foi confirmada utilizando HPLC. Os extratos mostraram atividade contra a maioria dos microrganismos testados. Os extratos não mostraram qualquer efeito antiproliferativo expressivo na avaliação da citotoxicidade. O conteúdo fenólico total mais significativo foi de 153,00 ± 11,34 mg de equivalente de ácido gálico/g para o extrato acetato de etila (AcOEt). O conteúdo de flavonoides totais foi de 292,50 ± 70,34 mg de equivalente de catequina/g para o extrato AcOEt, que apresentou a melhor atividade antioxidante (IC50 50,40 ± 1,16 mg/mL) para o sequestro do DPPH. Podemos concluir que esta espécie apresenta forte atividade antibacteriana e antioxidante, bem como fraca atividade citotóxica.

Avaliação da atividade moduladora e citotóxica do óleo essencial das folhas de Hyptis martiusii Benth / Evaluación de la actividad moduladora y citotóxica del aceite esencial de las hojas de Hyptis martiusii Benth / Assessment of Modulatory and Cytotoxic Activity of the Essential Oil in Hyptis Martiusii Benth Leaves

Resumo Introdução: a espécie Hyptis martiusii Benth, comumente chamada de "cidrera del campo", têm múltiplas propriedades biológicas, como ser inseticida, antifúngica e anti-inflamatória. O objetivo deste estudo foi investigar a atividade moduladora do óleo essencial das folhas frescas de Hyptis martiusii em associação com diferentes antibióticos contra as bactérias Staphylococcus aureus, Escherichia coli e Pseudomonas aeruginosa, e avaliar a atividade citotóxica da espécie. Materiais e métodos: o estudo utilizou a concentração inibitória mínima (CIM) como uma forma de avaliar a modulação com uma inoculação de 100 microlitros de cada estirpe bacteriana. As provas de citotoxicidade se realizaram mediante cultivo in vitro de células do tecido conectivo de camundongo (fibroblastos de mamíferos). Resultados: a pesquisa demonstrou que o óleo essencial das folhas de Hyptis martiusii Benth (OEHM) apresenta sinergismo só em associação com os antibióticos gentamicina e imipenem contra as bactérias Pseudomonas aeruginosa e Escherichia coli. No entanto, apresenta antagonismo em associação com amicacina, gentamicina e imipenem contra as três bactérias estudadas. Para além da ciprofloxacina não demonstrou resultados relevantes. Em relação com a atividade citotóxica, a concentração letal média (LC50) expôs um valor de 263,12 [ig/ml. Conclusão: finalmente, revelou-se que a H. martiusii apresenta atividade citotóxica sinérgica contra as bactérias avaliadas.

Resumen Introducción: la especie Hyptis martiusii Benth, comúnmente llamada "cidreira do campo", tiene múltiples propiedades biológicas, como ser insecticida, antifúngica y antiinflamatoria. El objetivo de este estudio fue investigar la actividad moduladora del aceite esencial de las hojas frescas de Hyptis martiusii en asociación con diferentes antibióticos contra las bacterias Staphylococcus aureus, Escherichia coli y Pseudomonas aeruginosa, y evaluar la actividad citotóxica de la especie. Materiales y métodos: el estudio utilizó la concentración mínima inhibitoria (CMI) como una forma de evaluar la modulación con una inoculación de 100 microlitros de cada cepa bacteriana. Las pruebas de citotoxicidad se realizaron mediante cultivo in vitro de células de tejido conectivo de ratón (fibroblastos de mamíferos). Resultados: la investigación demostró que el aceite esencial de las hojas de Hyptis martiusii Benth (OEHM) presenta sinergismo solo en asociación con los antibióticos gentamicina e imipenem contra las bacterias Pseudomonas aeruginosa y Escherichia coli. Sin embargo, presenta antagonismo en asociación con amikacina, gentamicina e imipenem contra las tres bacterias estudiadas. Además de la ciprofloxacina, no demostró resultados relevantes. En relación con la actividad citotóxica, la concentración letal media (CL50) exhibió un valor de 263,12 [ig/ml. Conclusión: finalmente, se reveló que la H. martiusii presenta actividad citotóxica sinérgica contra las bacterias evaluadas.

Abstract Introduction: The species Hyptis martiusii Benth. commonly called "cidreira do campo" has multiple biological properties, such as antifungal, anti-inflammatory, and insecticide. The aim of this study was to investigate the modulating activity of the essential oil of the fresh leaves of Hyptis martiusii in association with different antibiotics against the bacteria Staphylococcus aureus, Escherichia coli and Pseudomonas aeruginosa, as also the cytotoxic activity of this species. Materials and methods: The study used the MIC (minimum inhibitory concentration) as a way of assessing the modulation using an inoculation of 100 microliters of each bacterial strain. The cytotoxicity tests were conducted using in vitro culture of mouse connective tissue cells (fibroblasts of mammals). Results: The research demonstrated that the essential oil from leaves of Hyptis martiusii Benth (OEHM) presented synergism only when associated with the antibiotics gentamicin and imipenem against the bacteria Pseudomonas aeruginosa and Escherichia coli. However, it presented antagonism in association with amikacin, gentamicin and imipenem against the three studied bacteria. In addition to the ciprofloxacin showed no relevant results. In relation to the cytotoxic activity the lethal concentration (LC50) exhibited a value of 263.12 [ig/ml. Conclusion: Ultimately it was established, that H. Martiusii presents a synergistic cytotoxic activity against the evaluated bacteria.

Assessment of the antibacterial, cytotoxic and antioxidant activities of Morus nigra L. (Moraceae)

Abstract This study was carried out to assess the antibacterial, cytotoxic and antioxidant activities of extracts of Morus nigra L. HPLC was used to determine the fingerprint chromatogram of the crude ethanolic extract (Mn-EtOH). The antibacterial effect was assessed through the method of microdilution. The cytotoxicity was tested against human tumour cell lines using the 3-(4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2H-tetrazolium bromide (MTT) assay. The total phenolic and flavonoid contents were also assessed through the Folin-Ciocalteu and aluminum chloride methods, respectively. Antioxidant activities of the extracts were evaluated by using 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazil (DPPH) radical scavenging and -carotene-linoleic acid bleaching methods. The presence of phenolic compounds in Mn-EtOH was confirmed using HPLC. The extracts showed activity against most microorganisms tested. The extracts did not show any expressive antiproliferative effect in the assessment of cytotoxicity. The most significant total phenolic content was 153.00 ± 11.34 mg of gallic acid equivalent/g to the ethyl acetate extract (AcOEt). The total flavonoid content was 292.50 ± 70.34 mg of catechin equivalent/g to the AcOEt extract, which presented the best antioxidant activity (IC50 50.40 ± 1.16 g/mL) for DPPH scavenging. We can conclude that this species shows strong antibacterial and antioxidant activities, as well as weak cytotoxic effects.

Resumo Este estudo foi realizado para avaliar as atividades antibacteriana, citotóxica e antioxidante de extratos de Morus nigra L. HPLC foi utilizado para determinar o perfil de compostos fenólicos do extrato etanólico bruto (Mn-EtOH). O efeito antibacteriano foi avaliado através do método de microdiluição. A citotoxicidade foi testada contra linhagens celulares de tumores humanos utilizando o ensaio do brometo de 3-(4,5-dimetil-2-tiazolil)-2,5-difenil-2H-tetrazólio (MTT). O conteúdo total de compostos fenólicos e flavonoides também foi avaliado por meio dos métodos de Folin-Ciocalteu e cloreto de alumínio, respectivamente. A atividade antioxidante dos extratos foi avaliada por meio do sequestro do radical livre 2,2-difenil-1-picrilhidrazil (DPPH) e co-oxidação do sistema -caroteno-ácido linoleico. A presença de compostos fenólicos em Mn-EtOH foi confirmada utilizando HPLC. Os extratos mostraram atividade contra a maioria dos microrganismos testados. Os extratos não mostraram qualquer efeito antiproliferativo expressivo na avaliação da citotoxicidade. O conteúdo fenólico total mais significativo foi de 153,00 ± 11,34 mg de equivalente de ácido gálico/g para o extrato acetato de etila (AcOEt). O conteúdo de flavonoides totais foi de 292,50 ± 70,34 mg de equivalente de catequina/g para o extrato AcOEt, que apresentou a melhor atividade antioxidante (IC50 50,40 ± 1,16 mg/mL) para o sequestro do DPPH. Podemos concluir que esta espécie apresenta forte atividade antibacteriana e antioxidante, bem como fraca atividade citotóxica.

Chemical composition and biological activity of essential oil of achyrocline ramosissima briton ex rusby (asteraceae) / Composición química y actividad biológica del aceite esencial de achyrocline ramosissima britton ex rusby (asteraceae)

Essential oil from fresh aerial parts of Achyrocline ramosissima Britton ex Rusby (Asteraceae) collected in the Venezuelan Andes was obtained by hydrodistillation and analyzed by GC/MS. A yield of 0.10 percent w/v was afforded, and thirty seven components were identified by comparison of their retention indices (RI) and mass spectra with the Wiley GC-MS Library Data. The major components identified were rosifoliol (31.69 percent), beta-caryophyllene (8.61 percent), guaiol (3.95 percent), beta-eudesmol (3.33 percent) and selina-3,7 (11)-diene (2.99 percent). Antimicrobial activity of A. ramosissima essential oil was also evaluated against Gram positive, Gram negative bacterial strains and Candida albicans yeast. The results showed that, this oil is effective against Gram positive bacteria Staphylococcus aureus ATCC 6538 with MIC values ranging from 50 to 100 μg/mL and MBC values > 200 μg/mL as well as Bacillus subtilis CECT 39 with MIC values of 50 μg/mL and MBC of 100 μg/mL, however a low activity was observed against Gram negative bacterial strains, Pseudomonas aeruginosa AK 958, Escherichia coli CECT 99 and C. albicans yeast performing MIC and MBC values > 200 μg/mL. Cytotoxic activity was also determined against HeLa (cervix carcinoma), A-459 (lung carcinoma), MCF-7 (breast adenocarcinoma) human cancer cell lines and against normal Vero cells (African green monkey kidney), exhibiting antiproliferative effects with IC50 values of 28.2 μg/mL (HeLa cells). This is the first report regarding the chemical composition, antibacterial and cytotoxic activities of the essential oil from this species.

El aceite esencial de las partes aéreas frescas de Achyrocline ramosissima Britton ex Rusby (Asteraceae) recolectada en los Andes venezolanos fue extraído por hidrodestilación y analizado por CG/EM. Se obtuvo un rendimiento de 0,10 por ciento m/v, treinta y siete componentes fueron identificados por comparación de los índices de retención (IR) y sus espectros de masas con los datos de la biblioteca Wiley GC-MS. Los principales componentes identificados fueron rosifoliol (31,69 por ciento), beta-cariofileno (8,61 por ciento), guaiol (3,95 por ciento), beta-eudesmol (3,33 por ciento) y selina-3,7 (11)-dieno (2,99 por ciento). La actividad antimicrobiana del aceite esencial de A. ramosissima fue evaluada contra cepas bacterianas Gram positivas, Gram negativas y la levadura Candida albicans. Los resultados mostraron que el aceite esencial fue activo contra las bacterias Gram positivas Staphylococcus aureus ATCC 6538 con una CIM entre 50-100 μg/mL y CBM de valores > 200 μg/mL y Bacillus subtilis CECT 39 con CIM de 50 μg/mL y CBM de 100 μg/mL, sin embargo se observó una baja actividad contra las cepas bacterianas Gram negativas Pseudomonas aeruginosa AK 958, Escherichia coli CECT 99 y la levadura C. albicans cuyos valores de CIM y CBM fueron > 200 μg/mL. La actividad citotóxica fue determinada frente a las líneas celulares cancerígenas HeLa (carcinoma de cuello uterino), A-459 (carcinoma de pulmón), MCF-7 (adenocarcinoma de mama) y frente a las células normales Vero (células renales de mono verde), mostrando efectos antiproliferativos con valores de CI50 28.2 μg/mL frente a las células HeLa. Este es el primer reporte sobre la composición química, actividad antibacteriana y citotóxica del aceite esencial de esta especie.

Avaliação da atividade antibacteriana, citotóxica e antioxidante da espécie vegetal Opuntia cochenillifera (L. ) Mill / Evaluation of antibacterial, cytotoxic, and antioxidant activity of the plant species Opuntia cochenillifera (L. ) Mill

RESUMO O presente estudo teve como objetivo avaliar a atividade antibacteriana, antioxidante e citotóxica da espécie Opuntia cochenillifera (L.) Mill. Foi realizada a prospecção fitoquímica e espectroscopia de absorção de infravermelho (IV) dos extratos etanólicos brutos e frações dos cladódios grande e pequeno. A atividade antioxidante foi avaliada pelo método da capacidade sequestradora de radicais livres utilizando o radical sintético 2,2-difenil-1-picrilhidrazila (DPPH). A atividade citotóxica foi obtida através do método colorimétrico do Metiltetrazolium (MTT). Já a atividade antibacteriana foi avaliada pelo método de microdiluição em caldo para determinar a concentração inibitória mínima (CIM) frente às estirpes bacterianas Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Pseudomonas aeruginosa e Escherichia coli. A prospecção fitoquímica revelou principalmente a presença de fenóis, esteroides livres, alcaloides, alcanos, além de outras classes químicas. O IV apresentou grupos funcionais como alcanos, carbonilas, grupos de metila, duplas ligações de carbono, grupamentos alquilamina, entre outros. Sobre a citotoxicidade na concentração de 100 μg/mL, os dois extratos brutos, todas as frações do cladódio grande e as frações de clorofórmio e metanol do cladódio pequeno não apresentaram toxicidade. Os extratos brutos e frações do cladódio grande e pequeno, não demonstraram atividade antibacteriana e nem antioxidante. Esses resultados podem fornecer suporte para pesquisas futuras, visando outras atividades biológicas da presente espécie vegetal.

ABSTRACT The purpose of this study was to evaluate the antibacterial, antioxidant, and cytotoxic activity of Opuntia cochenillifera (L.) Mill. A phytochemical screening and infrared (IR) absorption spectroscopy were performed in the crude ethanolic extracts and fractions of large and small cladodes. The antioxidant activity was evaluated through the qualitative method of free-radical scavenging capacity using the synthetic radical 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH). The cytotoxic activity was obtained by the cell viability assay using methyl thiazolyl tetrazolium (MTT). Antibacterial activity was evaluated by broth microdilution method to determine the minimum inhibitory concentration (MIC) against the bacterial strains Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Pseudomonas aeruginosa, and Escherichia coli. The phytochemical screening mainly revealed the presence of phenols, flavonoids, free steroids, alkaloids, alkanes, and other chemical classes. The IR spectroscopy presented functional groups such as alkanes, carbonyls, methyl groups, carbon double bonds, and alkylamino groups, among others. Regarding cytotoxicity in the concentration of 100 μg/mL, neither the crude extracts, the fractions of the large cladode, nor the chloroform and methanol fractions of small cladode presented toxicity. The crude ethanolic extracts and fractions of large and small cladode showed no antibacterial or antioxidant activity. These results may provide support for future research aimed at other biological activities of this plant species.

Synthesis and cytotoxicity evaluation of thiosemicarbazones and their thiazole derivatives

ABSTRACT The aims of this study were to synthesize a series of thiosemicarbazones and their thiazole derivatives, to investigate their cytotoxic activity against three human cancers and normal (Vero cells) cell lines, and to evaluate the pro-apoptotic potential of the most active compounds. Materials and Methods: The thiosemicarbazones were obtained by reacting an aromatic aldehyde with thiosemicarbazide (yield 71-96%), which were subjected to a cyclization with α-bromoacetophenone to yield the required thiazole heterocycles (yield 63-100%). All the synthesized compounds were screened at 50 µM concentration against three cell lines representing HL60 (promyelocytic leukemia), Jurkat (acute lymphoblastic leukemia), and MCF-7 (breast cancer). The pro-apoptotic effect was measured by flow cytometry as the percentage of cells with hypodiploid DNA. Results: Three thiazole compounds showed activity against at least one tumor cell line (IC50 = 43-76 µM) and low cytotoxicity against Vero cells (IC50 > 100 M). The most active compound of this series induced 91% and 51% DNA fragmentation in HL60 and MCF-7 cell lines, respectively, suggesting that this compound triggered apoptosis in these cells. Conclusion: Among the synthesized compounds, one in particular was found to exert antiproliferative and pro-apoptotic activity on tumor cells and can be considered promising as a lead molecule for the design of new analogues with improved activity.

RESUMO O estudo teve como objetivo a síntese de uma série de tiossemicarbazonas e seus derivados tiazólicos e a avaliação da atividade citotóxica contra três linhagens de células tumorais humanas e células normais (Vero), a fim de se avaliar o potencial pró-apoptótico dos compostos mais ativos. As tiossemicarbazonas foram obtidas por reação entre um aldeído aromático e tiossemicarbazida (rend. 71-96%), as quais foram submetidas à ciclização com α-bromoacetofenona, fornecendo os heterociclos tiazólicos desejados (rend. 63-100%). Todos os compostos sintetizados foram testados na concentração de 50 µM contra três linhagens de células tumorais: HL60 (leucemia promielocítica), Jurkat (leucemia linfoblástica aguda) e MCF-7 (câncer de mama). O efeito pró-apoptótico foi avaliado por citometria de fluxo como porcentagem de células com DNA hipodiplóide. Três compostos tiazólicos foram ativos contra, pelo menos, uma linhagem tumoral (CI50=43-76 µM), com baixa citotoxicidade contra células Vero (CI50 > 100 M). O composto mais ativo dessa série induziu fragmentação do DNA de 91% e 51% nas linhagens HL60 e MCF-7, respectivamente, sugerindo que este composto ativou a apoptose nessas células. Dentre os compostos sintetizados, um em particular apresentou atividade antiproliferativa e pró-apoptótica em células tumorais e pode ser considerado composto protótipo promissor na busca por novos análogos com atividade melhorada.

Barcode e bioprospecção de metabólitos das algas marinhas Laurencia aldingensis, L. dendroidea e Laurenciella sp. (Ceramiales, Rhodophyta) / Barcode and bioprospecting of metabolites from the marine algae Laurencia aldingensis, L. dendroidea e Laurenciella sp. (Ceramiales, Rhodophyta)

A natureza e diversidade das estruturas químicas com atividade farmacológica que se tem encontrado nos organismos marinhos justificam a busca por novos compostos que são de interesse nas mais diversas áreas de aplicação. As espécies de macroalgas vermelhas, em especial Laurencia spp., merecem destaque pela enorme variedade de terpenos e acetogeninas que produzem, sendo consideradas de grande potencial na produção de novos fármacos. O estudo de seus constituintes pode fornecer importantes subsídios para a quimiotaxonomia, ecologia química, caracterização das espécies e avaliação do potencial biotecnológico. Baseado nisso, Laurencia aldingensis, L. dendroidea e Laurenciella sp. foram selecionadas para o presente estudo para isolamento, caracterização e teste de atividades biológicas dos seus compostos. A técnica do DNA barcoding foi utilizada como ferramenta de diagnóstico para garantir a similaridade entre as amostras de cada espécie, que foram coletadas em época e locais diferentes. Do extrato orgânico de Laurencia aldingensis, nove substâncias foram isoladas, sendo quatro esfingosinas (1-4), três terpenos (5-7) e duas novas substâncias halogenadas (8 e 9). Do extrato orgânico de Laurencia dendroidea formam isolados dois terpenos halogenados conhecidos (10, 11) e, do extrato de Laurenciella sp. três novas substâncias halogenadas alifáticas insaturadas (12-14), assim como um ácido graxo (15) e um esterol (16) conhecidos. Dentre elas, a 8 apresentou atividade citotóxica, mas não se mostrou seletivo, e as substâncias 4 e 11 apresentaram atividade esquistossomicida, bastante promissora. No entanto, nenhum deles apresentou atividade antioxidante. Diante desta investigação, podemos dizer que as informações geradas com os estudos de Laurencia aldingensis, L. dendroidea e Laurenciella sp. expandiram significantemente o conhecimento no que tange a diversidade química no gênero e o potencial biológico-farmacêutico dos mesmos

The nature and diversity of chemical structures with pharmacological activity that have been found in marine organisms justifies the search for new compounds that may have applications in various areas of interest. Species of red seaweeds, especially Laurencia spp., are special because of the unprecedented variety of terpenes and acetogenins they produce that are considered potentially useful for the production of new drugs. Study of their constituents can also provide important insights relating to their chemotaxonomy, chemical ecology, characterization of species and biotechnological potential. On this basis Laurencia aldingensis, L. dendroidea and Laurenciella sp., were selected for study and isolation, characterization, and biological activity assessment of isolatable quantities of their compounds. The technique of DNA barcoding was used as a diagnostic tool to ensure similarity between samples of each species collected at different times and places. From the organic extract of Laurencia aldingensis nine compounds were isolated; four sphingosines (1-4), three terpenes (5-7) and other two new halogenated compound (8, 9). From the organic extract of Laurencia dendroidea two known halogenated terpenes (10, 11) were isolated while from a similar extract of Laurenciella sp., three new halogenated aliphatic compounds (12-14) were isolated together with known fatty acid (15) and sterol (16). Among all isolates, 8 demonstrated unspecific cytotoxic activity and compounds 4 and 11 showed promising schistosomicidal activity. In applied antioxidant assays none of the isolates we noted to have activity. From the overall investigation it is also clear that the information gleaned from the studies of Laurencia aldingensis, L. dendroidea and Laurenciella sp., significantly expanded our knowledge base concerning chemical diversity in the genus Laurencia and their biological-pharmaceutical potential

Avaliação da microdureza e do potencial antimicrobiano de cimentos para cimentação modificados com diacetato de clorexidina a 0, 5% / Microhardness and antimicrobial potential evaluation of cements for cementation modified with 0, 5% diacetate chlorhexidine

O objetivo deste estudo foi avaliar, in vitro, a microdureza e o potencial antimicrobiano de três cimentos para cimentação utilizados em dentística modificados com diacetato de clorexidina a 0,5%. Para o teste de exaustão foram usados 48 corpos de prova de 5 mm de diâmetro por 2 mm de altura, colocados numa placa de 96 orifícios, divididos em 2 corpos de prova de acordo com o período de eluição para cada grupo previamente determinado. A eluição foi feita com PBS (tampão fostato), tornando o ambiente isotônico, por períodos de 60, 30 e 15 dias, ou sem exaustão (imediato), com posterior exposição ao inóculo bacteriano (Streptococcus mutans em 80 Unidades Formadoras de Colônias - UFC), em meio isotônico para evitar a morte da bactéria. Após 60 minutos de exposição a 37ºC, cada corpo de prova recebeu 100 µL de agar TSA, para a análise do crescimento das colônias. A viabilidade celular foi avaliada através do teste colorimétrico de Metiltetrazolium (MTT), em que foi utilizada uma suspensão celular L929 (fibroblastos gengival de camundongo), linhagem recomendada pela ISO 10993-5 de 2009 para a realização dos testes de citotoxicidade. As amostras ficaram em eluição pelos períodos de 24 horas, 72 horas e 7 dias , momentos em que foram aliquotados 200 µL da solução de eluição do corpo de prova, para a realização do teste. No geral foram testadas quatro réplicas de cada uma das amostras obtidas distribuídas nos grupos de corpo de prova previamente definidos, sendo confeccionados 18 corpos de prova com 5 mm de diâmetro por 2 mm de altura. A análise de microdureza Knoop (KHN) foi feita confeccionando cinco espécimes para cada grupo experimental com 5 mm de diâmetro e 2 mm de altura, incluídos em seis blocos de resina acrílica rosa. Cada grupo foi denominado conforme os respectivos tratamentos a serem utilizados. Grupo 1 (G1) - cimento de fosfato de zinco sem diacetato de clorexidina; Grupo 2 (G2) - Ketac™ Cem Easymix sem diacetato de clorexina; Grupo 3 (G3) - RelyX™ U 200 sem diacetato de clorexidina; Grupo 4 (G4) - cimento de fosfato de zinco com diacetato de clorexidina 0,5%; Grupo 5 (G5) - Ketac™ Cem Easymix com diacetato de clorexidina 0,5%; Grupo 6 (G6) - RelyX™ U 200 com diacetato de clorexidina 0,5%. Em relação ao teste de exaustão, o cimento de fosfato de zinco foi o que apresentou melhor atividade antimicrobiana. No referente à citotoxicidade, não houve efeito citotóxico significativo entre todas as amostras testadas, tendo apenas o cimento de fosfato de zinco sem adição de diacetato de clorexina no período de eluição de 72 h ficado ligeiramente acima da barra de viabilidade celular. Considerando a microdureza Knoop, o cimento de fostato de zinco apresentou comportamento inferior ao Ketac™ Cem Easymyx e ao RelyX™ U 200, que não foram diferentes entre si e, assim, a adição do diacetato de clorexidina a 0.5% não modificou a propriedade mecânica analisada dos cimentos testados.

The aim of this study was to evaluate, in vitro, the hardness and the antimicrobial potential of three cements for cementation used in dentistry modified with 0.5% chlorhexidine diacetate. For the exhaustion test were used 48 specimens samples with 5 mm in diameter and 2 mm in height, placed in a 96 well plate, divided into 2 specimens samples according to the elution period for each previously determined group. The elution was done with PBS (phosphate buffer), making an isotonic environment for periods of 60, 30 and 15 days, or without exhaustion (immediate), with subsequent exposure to the bacterial inoculum (Streptococcus mutans in 80 Colony Forming Units - UFC) in an isotonic medium to prevent the death of bacteria. After 60 minutes at 37°C exposure, each specimen received 100 µL of agar TSA, for the analysis of the colonies' growth. Cell viability was evaluated by colorimetric test Metiltetrazolium (MTT), which was used in a suspension of the cell type L929 (mouse fibroblasts gum), strain recommended by ISO 10993-5 2009 for carrying out the cytotoxicity tests. The samples were eluted in the periods of 24 hours, 72 hours and 7 days, when 200 µL were aliquoted from specimens samples eluting solution, to perform the colorimetric test. In general, four replicates were tested of each obtained samples, distributed into previously defined specimen groups, totalizing 18 specimens samples with a diameter of 5 mm and a height of 2 mm. The Knoop microhardness analysis (KHN) was done preparing five specimens samples for each experimental group with 5 mm in diameter and 2 mm in height, included in 6 pink acrylic resin blocks. Each group was designed according to the treatment to be received. Group 1 (G1) - Zinc phosphate cement without chlorhexidine diacetate; Group 2 (G2) - Ketac™ Cem Easymyx without clorexina diacetate; Group 3 (G3) - RelyX™ U 200 without chlorhexidine diacetate; Group 4 (G4) - Zinc phosphate cement with 0,5 % chlorhexidine diacetate; Group 5 (G5) - Ketac™ Cem EasyMix with 0,5% chlorhexidine diacetate; Group 6 (G6) - RelyX™ U 200 with 0,5% chlorhexidine diacetate. Regarding to exhaustion test, zinc phosphate cement showed the best antimicrobial activity. With regard to cytotoxicity, there was no significant cytotoxic effect of all tested samples, having only the zinc phosphate cement without adding chlorhexidine diacetate in the elution period of 72 h, stayed slightly above the cell viability bar. Considering the Knoop hardness, zinc phosphate cement showed less behavior than Ketac™ Cem Easymyx and RelyX™ U 200, which were not different between them. Thus, the addition of 0.5% chlorhexidine diacetate did not modified the mechanical property of the tested cements.

Efeito leishmanicida in vitro do látex de Croton lechleri (Euphorbiaceae) / In vitro leishmanicidal effect of Croton lechleri latex

A Leishmaniose Tegumentar Americana é uma infecção causada por uma variedade de espécies de Leishmania, é transmitida ao homem por flebotomíneos. Os antimoniais pentavalentes são utilizados na quimioterapia dessa doença; no entanto, esses fármacos provocam uma série de efeitos colaterais, além de apresentar altos índices de toxicidade. Na busca por novos agentes leishmanicidas, avaliamos in vitro o extrato do látex de Croton lechleri (Sangue de dragão) frente a formas promastigotas de Leishmania amazonensis e Leishmania guyanensis. O extrato foi obtido através da desidratação do látex de C. lechleri e diluído em solução 10% de etanol em salina tamponada com fosfato. As promastigotas de Leishmania foram cultivadas juntamente com o extrato nas concentrações de 6,25; 12,5 e 25µg/ mL por 72 horas. O extrato apresentou eficácia em todas as concentrações testadas apresentando um IC50 (concentração inibitória) de 5,04µg/mL para L. amazonensis e IC50 de 9,05µg/mL para L. guyanensis. Foi realizada a avaliação citotóxica em células J774 nas mesmas concentrações usadas no ensaio leishmanicida, porém a concentração de 25µg/mL apresentou índice de toxicidade de aproximadamente 50% para a célula hospedeira. Os testes realizados mostraram-se promissores, pois o extrato testado também foi capaz de inibir o crescimento de promastigotas de L. amazonensis após ensaio de infecção com células J774.

Cutaneous Leishmaniasis is an infection caused by a several species of Leishmania, is transmitted to humans by phlebotomine sandflies. Pentavalent antimonial compounds are used in the chemotherapy of this disease; however, these drugs cause several collateral effects, besides presenting high levels of toxicity. The search for new antiLeishmanial agents, we assessed in vitro the extract of Croton lechleri latex (Blood Dragon) against the promastigote forms of Leishmania amazonensis and Leishmania guyanensis. The extract was obtained by dehydration C. lechleri latex mass and the solution was diluted with 10% ethanol in phosphate buffered saline solution. The Leishmania promastigotes were grown with the extract following concentrations 6.25; 12.5 and 25µg/mL for 72 hours. The extract showed efficacy in all concentrations tested showing an IC50 (inhibitory concentration) of 5.04 µg/mL for L. amazonensis and IC50 of 9.05 µg/mL for L. guyanensis. Cytotoxic evaluation was performed in J774 cells at the same concentrations used in the leishmanicidal assay, but the concentration of 25µg/mL showed toxicity index of approximately 50% for the host cell. Tests carried out proved promising, since the extracts tested was also able to inhibit the L. amazonensis promastigotes growth after infection assay with J774 cells.

Cytotoxic activity and induction of inflammatory mediators of the methanol:chloroform extract of Fusarium moniliforme.

BACKGROUND: Fusarium moniliforme is a phytopathogenic facultative fungus with a cosmopolitan distribution in all types of climates, and has a wide host range, including, among others, bean, rice, wheat and sorghum crops. There is a current lack of knowledge regarding the potential of these fungi, so it is considered to be of great importance to obtain information related to the biological activity of extracts and secondary metabolites. AIMS: An evaluation of the role of methanol:chloroform extract of F. moniliforme in the production of inflammatory cytokines and their cytotoxic activity. METHODS: The production of nitric oxide was analyzed by the Griess method, the production of cytokines using ELISA, and the effects of the extract on cell cycle and induction of apoptosis by flow cytometry. RESULTS: The extract of F. moniliforme was seen to be able to stimulate nitric oxide (NO) production in J774A.1 cells, as well as to produce cytokines such as, IL-1ß, IL-6, and TNF-α. It was also observed that the extract of F. moniliforme produces activity on cell cycle modulation and apoptosis when tested in carcinogenic cell lines. CONCLUSIONS: The results obtained from this study open the possibility of obtaining and identifying metabolites of the extract of F. moniliforme that can be evaluated for possible use in cancer therapy.

Cytotoxic and Antiviral Activity of Extracts and Compounds Isolated from Clusia Fluminensis Planch. & Triana (Clusiaceae) / Atividade Citotóxica e Antiviral de Extratos e Compostos Isolados de Clusia Fluminensis Planch. & Triana (Clusiaceae)

The worldwide distribution of herpes simplex virus type 1 (HSV-1) allied to the emergence of resistant strains makes necessary and urgent the search and development of new substances capable of preventing and treating HSV-1 infections. Studies demonstrate synergy between genital herpes and human immunodeficiency virus type 1 (HIV-1), which represents a major concern for global public health. Objective: The objective of this study was to evaluate the activity of crude extracts and isolated substances from C. fluminensis in the in vitro replication of the HSV-1 virus and HIV-1-RT activity. Methods: This study evaluated the activity of extracts and isolated compounds from Clusia fluminensis Planch. & Triana against HSV-1 using Vero cells in culture and against HIV-1 using a recombinant reverse transcriptase enzyme (HIV -1 RT). The percentage of inhibition against HSV-1 was determined from viral lysis plaque reduction assay, and the anti-HIV-1-RT test was performed by a fluorimetric assay. It was also evaluated the cytotoxic activity of the samples using MTT [3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide]. Results: The crude extracts showed high percentage of inhibition against HSV-1, reaching 81.4 to 100.0% inhibition in non-cytotoxic concentration (50 µg/mL). The isolated compounds, lanosterol and clusianone, demonstrated 100% inhibition in non-cytotoxic concentration (50 µg/mL). We also examined the effects of the extracts and isolates on the activity of the HIV-1-RT. Among the crude extracts, only the methanolic extract of leaves and methanolic extract of stems showed inhibitory activity against HIV-1-RT. Regarding the isolated compounds, lanosterol showed a moderate activity. Conclusion: Our data demonstrate that extracts and isolates compounds Clusia fluminensis Planch. & Triana have promising antiviral activity inhibiting HSV-1 replication and HIV-1 by inhibiting the anti-RT activity.

A distribuição mundial do vírus herpes simplex tipo 1 (HSV-1) aliada ao surgimento de cepas resistentes torna necessária e urgente a busca e o desenvolvimento de novas substâncias capazes de prevenir e tratar infecções HSV-1. Estudos demonstram sinergia entre herpes genital e vírus da imunodeficiência humana tipo 1 (HIV-1), o que representa uma grande preocupação para a saúde pública global. Objetivo: O objetivo deste estudo foi avaliar a atividade de extratos brutos e substâncias isoladas de Clusia fluminensis Planch. & Triana na replicação in vitro do vírus HSV-1 e na atividade anti HIV-1-RT. Métodos: Este estudo avaliou a atividade de extratos e substâncias isoladas de Clusia fluminensis Planch. & Triana contra o HSV-1 utilizando células Vero em cultura e contra o HIV-1 utilizando a enzima transcriptase reversa recombinante (HIV-1 RT). A porcentagem de inibição contra o HSV-1 foi determinada a partir do ensaio de redução de placas de lise viral, e o ensaio anti-HIV-1 RT foi realizado por um ensaio fluorimétrico. Também foi avaliada a atividade citotóxica das amostras utilizando MTT [brometo de 3- (4,5-dimetiltiazol-2-il) -2,5-difeniltetrazólio]. Resultados: Os extratos demonstraram elevada percentagem de inibição contra o HSV-1, atingindo 81,4 a 100,0% de inibição em concentração não citotóxica (50 µg/mL). Os compostos isolados, lanosterol e clusianona, demonstraram 100% de inibição em concentração não citotóxica (50 µg/mL). Examinamos também os efeitos dos extratos e isolados sobre a atividade anti-HIV-1 RT. Entre os extratos brutos, apenas o extrato metanólico das folhas e caules apresentaram atividade anti-HIV-1 RT. Em relação aos compostos isolados, lanosterol mostrou uma atividade moderada. Conclusão: Nossos dados demonstram que os extratos e compostos isolados de Clusia fluminensis Planch. & Triana possuem atividade antiviral promissora inibindo a replicação do HSV-1 e HIV-1 através da inibição da atividade anti-RT.

Atividade leishmanicida in vitro de Eugenia uniflora e Momordica charantia / Antileishmanial in vitro activity of Eugenia uniflora and Momordica charantia

A Leishmaniose Tegumentar Americana no Brasil é causada por uma variedade de espécies de Leishmania e uma grande diversidade destes parasitas pode ser encontrada na Região Amazônica. Revisões recentes na quimioterapia de leishmaniose enfatizam as deficiências dos agentes terapêuticos atualmente disponíveis e mostram a necessidade urgente de novos candidatos. Uma alternativa para substituir esses medicamentos são extratos naturais de Eugenia uniflora e Momordica charantia. Foram preparados extratos etanólicos das folhas de E. uniflora e M. charantia. Para os testes in vitro de Leishmania brasiliensis foram utilizadas formas promastigotas. O ensaio de citotoxicidade foi realizado com linhagens de fibroblastos. Nossos resultados indicam que E. uniflora foi eficaz contra a cepa de parasita testada, representando uma fonte alternativa de produtos naturais com atividade contra L. brasiliensis.

Cutaneous leishmaniasis is caused in Brazil by several species of the genus Leishmania and a wide variety of these protozoan parasites can be found in Brazil, mainly in the Amazon region. Recent reviews on the chemotherapy of leishmaniasis show the low effectiveness of the usual therapeutic agents, demonstrating the need for new drugs. An interesting possible alternative to the conventional drugs is offered by natural products extracted from Eugenia uniflora and Momordica charantia. Ethanol extracts were prepared from the leaves of Eugenia uniflora and Momordica charantia and assayed in vitro against Leishmania brasiliensis promastigotes and fibroblasts to assess their antileishmanial and cytotoxic activities, respectively. Our results indicate that E. uniflora was active against the parasitic forms of L. brasiliensis

Fitoquímica y evaluación biológica de croton caracasana Pittier. Hemisintesis y evaluación biológica de derivados del ácido de caracasina / Phytochemistry and biological evaluation of croton caracasana Pittier. Hemisynthesis and biological evaluation of caracasin acid derivatives

En este trabajo de investigación se presenta los resultados del estudio fitoquímico de la planta Croton caracasana Pittier (Euphorbiaceae) colectada en Venezuela. De los tallos y hojas de la planta, se aislaron y caracterizaron siete compuestos identificados como 5-hidroxi-3, 7, 8, 3', 4'-pentametoxiflavona (I), lupeol (II), crotofolin E (III), crotocarasin A (IV), crotocarasin B (V), crotocarasin C (VI) y crotocarasin D (VII). Los compuestos IV, V, VI y VII se reportan por primera vez en la literatura de productos naturales. Se evaluó la actividad citotóxica de estos compuestos a través del método del MTT sobre las líneas celulares MCF-7 y SKBR3 (carcinoma mamario). Se encontró que los compuestos IV, V, VI y VII presentaron actividad citotóxica sobre las líneas MCF-7 y SKBR3, mientras que el compuesto III solo mostró actividad sobre la línea SKBR3. Adicionalmente, se realizó la hemisíntesis de diversos derivados del ácido de caracasina aislado de Croton micans. Estos derivados se obtuvieron a través de reacciones de formación de ésteres y amidas, reducción con H2 Pd/C y con NaBH4, reacciones con mm-CPBA y adiciones nucleofílicas 1,4. Se evaluó la actividad citotóxica, antibacteriana, leishmanicida y tripanocida de estos compuestos y se realizó un análisis preliminar de la relación estructura química-actividad biológica con los resultados obtenidos.

Avaliação da atividade anti-Trypanosoma e anti-Leishmania de Mentha arvensis e Turnera ulmifolia / Evaluation of the anti-Trypanosoma and anti-Leishmania activity of Mentha arvensis and Turnera ulmifolia

Tripanosomiasis or “Chagas disease”, caused by Trypanosoma cruzi, affect 10 million people in Latin America. Today, the chemotherapy is the only specific treatment against this disease, being the most used drugs the nifurtimox and benznidazole. Leishmaniasis is a disease caused by parasites of the genus Leishmania, mainly founded in regions with forests, as the Amazonia. Recent reports about the Leishmaniasis indicate a deficit of therapeutical drugs available against this disease and reinforce the necessity of the discovering of new drugs. An interesting approach against these diseases is the use of natural products, as the extracts of plants as Mentha arvensis and Turnera ulmifolia. For the in vitro assays against T. cruzi and Leishmania, was used the clone CL-B5 and promastigote forms, respectively. The cytotoxic assay was performed using fibroblasts. Our results indicated that M. arvensis was active against all strains assayed, inhibiting 65 e 47 percent of the assayed strains (IC50 = 192.3 and 531.9 ug/mL respectively), representing an interesting and alternative source of natural products with anti-kinetoplastida activity.

Doença de Chagas, causada por Trypanosoma cruzi, afeta cerca de 10 milhões de pessoas nas Américas. Atualmente, a quimioterapia é o único tratamento específico disponível para esta doença, onde os medicamentos utilizados são nifurtimox e benzonidazol. Leishmaniose tegumentar Americana no Brasil é causada por uma variedade de espécies de Leishmania e uma grande diversidade destes parasitos pode ser encontrada na Região Amazônica. Revisões recentes na quimioterapia de leishmaniose enfatizam as deficiências dos agentes terapêuticos atualmente disponíveis e mostram a necessidade urgente de novos candidatos. Uma alternativa para substituir esses medicamentos são extratos naturais de Mentha arvensis e Turnera ulmifolia. Foram preparados extratos etanólicos das folhas de M. arvensis e T. ulmifolia. Para os testes in vitro de T. cruzi, foi utilizado o clone CL-B5 e para Leishmania brasiliensis foram utilizadas formas promastigotas. O ensaio de citotoxicidade foi realizado com linhagens de fibroblastos. Nossos resultados indicam que M. arvensis foi eficaz contra as cepas de parasitos testadas apresentando 65 e 47 por cento de inibição em uma concentração de 500 ug/mL (respectivamente, CE50 = 192.3 e 531.9 ug/mL), sendo considerada uma fonte alternativa de produtos naturais com atividade contra T. cruzi e L. brasiliensis.